| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 CRISPR/Cas9技术 | 第10-14页 |
| 1.1.1 CRISPR/Cas9技术的发现 | 第10页 |
| 1.1.2 CRISPR/Cas系统的分类 | 第10-11页 |
| 1.1.3 CRISPR/Cas9技术的工作原理 | 第11-13页 |
| 1.1.4 CRISPR/Cas9技术在农作物基因编辑中的应用 | 第13-14页 |
| 1.2 油菜素内酯概述 | 第14-17页 |
| 1.2.1 油菜素内酯的发现 | 第14页 |
| 1.2.2 油菜素内酯的作用 | 第14-16页 |
| 1.2.3 油菜素内酯信号的转导机制 | 第16-17页 |
| 1.3 BR11蛋白 | 第17-20页 |
| 1.3.1 BRI1蛋白是BRs的受体 | 第17页 |
| 1.3.2 BRI1蛋白的结构组成和功能特点 | 第17-18页 |
| 1.3.3 BRI1蛋白相互作用的下游信号组分 | 第18页 |
| 1.3.4 BRI1激酶区相关突变体介绍 | 第18-20页 |
| 1.4 BRI1基因的突变对植物生物学效应的影响 | 第20-22页 |
| 1.4.1 BRI1基因的突变对植物表型的影响 | 第20-21页 |
| 1.4.2 BRI1基因的突变对植物激素响应的影响 | 第21-22页 |
| 第2章 引言 | 第22-24页 |
| 2.1 研究的目的与意义 | 第22页 |
| 2.2 研究内容 | 第22页 |
| 2.3 技术路线 | 第22-24页 |
| 第3章 CRISPR/Cas9定点突变NtBRI1基因 | 第24-38页 |
| 3.1 材料与方法 | 第24-32页 |
| 3.1.1 材料和试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.2 表达载体构建 | 第25-29页 |
| 3.1.3 烟草的遗传转化 | 第29-30页 |
| 3.1.4 突变体筛选及检测 | 第30-32页 |
| 3.2 结果与分析 | 第32-37页 |
| 3.2.1 pCACas9-BRI1-AB表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 3.2.2 烟草遗传转化 | 第33-34页 |
| 3.2.3 CRISPR/Cas9敲除烟草NtBRI1基因的T_0突变体分析 | 第34-37页 |
| 3.3 本章小结 | 第37-38页 |
| 第4章 T_0突变体NtBRI1的生物信息学分析 | 第38-46页 |
| 4.1 材料 | 第38页 |
| 4.2 方法 | 第38页 |
| 4.2.1 T_0突变体NtBRI1基因的测序和统计 | 第38页 |
| 4.2.2 T_0突变体NtBRI1基因的生物信息学分析 | 第38页 |
| 4.3 结果分析 | 第38-44页 |
| 4.3.1 T_0突变体NtBRI1基因的突变类型统计 | 第38-39页 |
| 4.3.2 T_0突变体NtBRI1基因的生物信息学分析 | 第39-44页 |
| 4.4 本章小结 | 第44-46页 |
| 第5章 T_0突变体NtBRI1基因表达差异分析及其表型观察 | 第46-54页 |
| 5.1 材料 | 第46页 |
| 5.2 方法 | 第46-49页 |
| 5.2.1 T_0突变体叶片NtBRI1基因实时荧光定量PCR | 第46-49页 |
| 5.2.2 T_0突变体表型观察 | 第49页 |
| 5.3 结果分析 | 第49-53页 |
| 5.3.1 T_0突变体叶片NtBRI1基因实时荧光定量PCR | 第49-50页 |
| 5.3.2 T_0突变体表型观察 | 第50-53页 |
| 5.4 本章小结 | 第53-54页 |
| 5.4.1 T_0突变体NtBRI1基因的表达量分析 | 第53页 |
| 5.4.2 T_0突变体表型观察 | 第53-54页 |
| 第6章 结论与讨论 | 第54-58页 |
| 6.1 结论 | 第54页 |
| 6.1.1 CRISPR/Cas9定点突变NtBRI1基因 | 第54页 |
| 6.1.2 T_0突变体NtBRI1基因的生物信息学分析 | 第54页 |
| 6.1.3 T_0突变体NtBRI1基因表达差异分析及其表型观察 | 第54页 |
| 6.2 讨论 | 第54-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 附录 | 第68-86页 |
| 野生型及部分T_0突变体NtBRI1基因CDS序列 | 第68-76页 |
| 野生型及部分T_0突变体氨基酸序列 | 第76-84页 |
| 主要缩略词 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
