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致倦库蚊对Bti晶体毒素应答的差异蛋白质组学分析

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
1 前言第10-19页
    1.1 致倦库蚊第10-15页
        1.1.1 简介第10页
        1.1.2 分布第10页
        1.1.3 生活史第10-11页
        1.1.4 生态习性第11页
            1.1.4.1 革生习性第11页
            1.1.4.2 吸血习性第11页
            1.1.4.3 成虫季节性消长第11页
        1.1.5 主要传播疾病第11-13页
            1.1.5.1 班氏丝虫病第11-12页
            1.1.5.2 乙型脑炎第12-13页
        1.1.6 防治策略第13-15页
            1.1.6.1 环境防治第13页
            1.1.6.2 化学防治第13-14页
            1.1.6.3 生物防治第14-15页
    1.2 苏云金芽孢杆菌第15-17页
        1.2.1 苏云金芽孢杆菌简介第15-16页
        1.2.2 Bt毒理与昆虫的应答机制第16-17页
            1.2.2.1 Bt杀虫机理第16页
            1.2.2.2 昆虫对病原微生物的防御机制第16-17页
            1.2.2.3 蚊虫对Bt的应答机制研究第17页
    1.3 蛋白质组研究技术第17-18页
    1.4 本研究的目的及意义第18-19页
2 材料与方法第19-29页
    2.1 试验材料第19-21页
        2.1.1 菌株第19页
        2.1.2 供试蚊虫第19页
        2.1.3 培养基第19页
        2.1.4 试剂第19-21页
        2.1.5 其余主要材料第21页
    2.2 试验方法第21-29页
        2.2.1 致倦库蚊饲养第21页
        2.2.2 菌株活化及保存第21页
        2.2.3 菌株形态学观察第21-22页
        2.2.4 Bt晶体毒素提取第22页
        2.2.5 Cyt毒素的分离纯化第22-25页
            2.2.5.1 Bt晶体毒素的纯化第22-23页
            2.2.5.2 葡聚糖G-50凝胶色谱第23页
                2.2.5.2.1 柱材料填装第23页
                2.2.5.2.2 凝胶过滤层析第23页
            2.2.5.3 Cyt毒素的检测(SDS-PAGE)第23-25页
            2.2.5.4 Cyt毒素的纯化第25页
        2.2.6 Bradford法测定蛋白含量第25-26页
        2.2.7 生物测定第26页
        2.2.8 致倦库蚊中肠提取第26页
        2.2.9 致倦库蚊中肠双向电泳分析第26-28页
            2.2.9.1 等电聚焦(Isoelectric focusing)第26-27页
            2.2.9.2 胶条平衡第27页
            2.2.9.3 SDS-PAGE第27页
            2.2.9.4 染色第27页
            2.2.9.5 凝胶扫描分析第27-28页
        2.2.10 致倦库蚊中肠差异蛋白质谱检测第28页
            2.2.10.1 酶解及脱盐第28页
            2.2.10.2 串联质谱MALDI-TOF-TOF第28页
        2.2.11 致倦库蚊中肠差异蛋白组分析第28-29页
3 结果与分析第29-42页
    3.1 LLP29形态学观察第29-30页
        3.1.1 菌落形态学观察第29页
        3.1.2 显微形态学观察第29-30页
    3.2 晶体毒素提取及Cyt毒素的分离第30-34页
        3.2.1 晶体毒素提取第30-32页
        3.2.2 Cyt毒素的分离纯化第32-34页
            3.2.2.1 Sephadex G50凝胶色谱第32-33页
            3.2.2.2 Cyt毒素的检测及获取第33-34页
    3.3 蛋白质浓度测定第34-35页
    3.4 生物测定第35-36页
    3.5 致倦库蚊中肠双向电泳分析第36-37页
    3.6 差异蛋白的质谱比对第37-39页
    3.7 差异蛋白GO分析第39-42页
4 讨论与总结第42-46页
5 展望第46-47页
参考文献第47-52页
附录第52-59页
致谢第59页

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