摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 前言 | 第10-19页 |
1.1 致倦库蚊 | 第10-15页 |
1.1.1 简介 | 第10页 |
1.1.2 分布 | 第10页 |
1.1.3 生活史 | 第10-11页 |
1.1.4 生态习性 | 第11页 |
1.1.4.1 革生习性 | 第11页 |
1.1.4.2 吸血习性 | 第11页 |
1.1.4.3 成虫季节性消长 | 第11页 |
1.1.5 主要传播疾病 | 第11-13页 |
1.1.5.1 班氏丝虫病 | 第11-12页 |
1.1.5.2 乙型脑炎 | 第12-13页 |
1.1.6 防治策略 | 第13-15页 |
1.1.6.1 环境防治 | 第13页 |
1.1.6.2 化学防治 | 第13-14页 |
1.1.6.3 生物防治 | 第14-15页 |
1.2 苏云金芽孢杆菌 | 第15-17页 |
1.2.1 苏云金芽孢杆菌简介 | 第15-16页 |
1.2.2 Bt毒理与昆虫的应答机制 | 第16-17页 |
1.2.2.1 Bt杀虫机理 | 第16页 |
1.2.2.2 昆虫对病原微生物的防御机制 | 第16-17页 |
1.2.2.3 蚊虫对Bt的应答机制研究 | 第17页 |
1.3 蛋白质组研究技术 | 第17-18页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-29页 |
2.1 试验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 菌株 | 第19页 |
2.1.2 供试蚊虫 | 第19页 |
2.1.3 培养基 | 第19页 |
2.1.4 试剂 | 第19-21页 |
2.1.5 其余主要材料 | 第21页 |
2.2 试验方法 | 第21-29页 |
2.2.1 致倦库蚊饲养 | 第21页 |
2.2.2 菌株活化及保存 | 第21页 |
2.2.3 菌株形态学观察 | 第21-22页 |
2.2.4 Bt晶体毒素提取 | 第22页 |
2.2.5 Cyt毒素的分离纯化 | 第22-25页 |
2.2.5.1 Bt晶体毒素的纯化 | 第22-23页 |
2.2.5.2 葡聚糖G-50凝胶色谱 | 第23页 |
2.2.5.2.1 柱材料填装 | 第23页 |
2.2.5.2.2 凝胶过滤层析 | 第23页 |
2.2.5.3 Cyt毒素的检测(SDS-PAGE) | 第23-25页 |
2.2.5.4 Cyt毒素的纯化 | 第25页 |
2.2.6 Bradford法测定蛋白含量 | 第25-26页 |
2.2.7 生物测定 | 第26页 |
2.2.8 致倦库蚊中肠提取 | 第26页 |
2.2.9 致倦库蚊中肠双向电泳分析 | 第26-28页 |
2.2.9.1 等电聚焦(Isoelectric focusing) | 第26-27页 |
2.2.9.2 胶条平衡 | 第27页 |
2.2.9.3 SDS-PAGE | 第27页 |
2.2.9.4 染色 | 第27页 |
2.2.9.5 凝胶扫描分析 | 第27-28页 |
2.2.10 致倦库蚊中肠差异蛋白质谱检测 | 第28页 |
2.2.10.1 酶解及脱盐 | 第28页 |
2.2.10.2 串联质谱MALDI-TOF-TOF | 第28页 |
2.2.11 致倦库蚊中肠差异蛋白组分析 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-42页 |
3.1 LLP29形态学观察 | 第29-30页 |
3.1.1 菌落形态学观察 | 第29页 |
3.1.2 显微形态学观察 | 第29-30页 |
3.2 晶体毒素提取及Cyt毒素的分离 | 第30-34页 |
3.2.1 晶体毒素提取 | 第30-32页 |
3.2.2 Cyt毒素的分离纯化 | 第32-34页 |
3.2.2.1 Sephadex G50凝胶色谱 | 第32-33页 |
3.2.2.2 Cyt毒素的检测及获取 | 第33-34页 |
3.3 蛋白质浓度测定 | 第34-35页 |
3.4 生物测定 | 第35-36页 |
3.5 致倦库蚊中肠双向电泳分析 | 第36-37页 |
3.6 差异蛋白的质谱比对 | 第37-39页 |
3.7 差异蛋白GO分析 | 第39-42页 |
4 讨论与总结 | 第42-46页 |
5 展望 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
附录 | 第52-59页 |
致谢 | 第59页 |