| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第8-12页 |
| 1.1 线粒体的基因组 | 第8页 |
| 1.2 线粒体的翻译机器 | 第8-9页 |
| 1.3 线粒体的翻译起始因子 | 第9-10页 |
| 1.4 本课题的研究内容和方法 | 第10-12页 |
| 1.4.1 本课题的研究内容 | 第10页 |
| 1.4.2 本课题的研究方法 | 第10-12页 |
| 第二章 粟酒裂殖酵母mti3基因缺失后的表型研究 | 第12-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第12-16页 |
| 2.1.1 菌株 | 第12页 |
| 2.1.2 质粒 | 第12-13页 |
| 2.1.3 试剂 | 第13页 |
| 2.1.4 培养基与溶液 | 第13-15页 |
| 2.1.5 引物序列 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-26页 |
| 2.2.1 质粒的构建 | 第16-24页 |
| 2.2.2 mti3的敲除 | 第24-25页 |
| 2.2.3 表型实验 | 第25-26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-29页 |
| 2.3.1 △mti3菌株的构建 | 第26-29页 |
| 2.3.2 △mti3菌株的表型 | 第29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 粟酒裂殖酵母Mti2和Mti3蛋白的定位 | 第31-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 3.1.1 菌株 | 第31页 |
| 3.1.2 试剂 | 第31页 |
| 3.1.3 培养基与溶液 | 第31-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-37页 |
| 3.2.1 酵母线粒体的粗提取 | 第34页 |
| 3.2.2 酵母线粒体的精提取 | 第34-35页 |
| 3.2.3 超速离心 | 第35页 |
| 3.2.4 分离线粒体的膜蛋白与可溶性蛋白(碱处理) | 第35页 |
| 3.2.5 TritonX-100和蛋白酶K溶液共同处理线粒体提取液 | 第35-36页 |
| 3.2.6 Western Blot实验 | 第36-37页 |
| 3.3 实验结果 | 第37-40页 |
| 3.3.1 Mti2和Mti3蛋白的定位于线粒体的信号肽(MTS)分析 | 第37页 |
| 3.3.2 Mti2和Mti3蛋白在细胞中的定位 | 第37-38页 |
| 3.3.3 Mti2和Mti3蛋白在线粒体中的定位 | 第38-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 粟酒裂殖酵母Mti2和Mti3蛋白对mtDNA编码的蛋白稳定水平的影响 | 第42-45页 |
| 4.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 4.1.1 菌株 | 第42页 |
| 4.1.2 试剂 | 第42页 |
| 4.1.3 培养基与溶液 | 第42-43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43页 |
| 4.2.1 酵母线粒体的粗提取 | 第43页 |
| 4.2.2 Western Blot实验 | 第43页 |
| 4.3 实验结果 | 第43-44页 |
| 4.4 讨论 | 第44-45页 |
| 第五章 粟酒裂殖酵母Mti2和Mti3蛋白对mtDNA编码的蛋白合成的影响 | 第45-50页 |
| 5.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 5.1.1 菌株 | 第45页 |
| 5.1.2 试剂 | 第45页 |
| 5.1.3 培养基与溶液 | 第45-46页 |
| 5.2 实验方法 | 第46-47页 |
| 5.2.1 [~(35)S]-Protein Labeling Mix标记yHL6381野生型菌株、△mti2菌株、△mti3菌株和△mti2△mti3菌株中mtDNA编码的蛋白 | 第46-47页 |
| 5.3 实验结果 | 第47-49页 |
| 5.3.1 [~(35)S]-Protein Labeling Mix标记yHL6381野生型菌株、△mti2菌株、△mti3菌株和△mti2△mti3菌株中mtDNA编码的蛋白 | 第47-49页 |
| 5.4 讨论 | 第49-50页 |
| 第六章 粟酒裂殖酵母Mti2和Mti3蛋白在蔗糖密度梯度中的分布 | 第50-57页 |
| 6.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 6.1.1 菌株 | 第50页 |
| 6.1.2 试剂 | 第50页 |
| 6.1.3 培养基与溶液 | 第50-51页 |
| 6.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 6.2.1 蔗糖密度梯度离心分离线粒体核糖体 | 第51-52页 |
| 6.2.2 亲和纯化Rsm23蛋白复合体 | 第52-53页 |
| 6.2.3 标签菌在发酵型及非发酵型培养基上的生长状况 | 第53页 |
| 6.3 实验结果 | 第53-56页 |
| 6.3.1 蔗糖密度梯度离心分离线粒体核糖体 | 第53-54页 |
| 6.3.2 亲和纯化检测Rsm23与其它蛋白质的相互作用 | 第54-55页 |
| 6.3.3 粟酒裂殖酵母原位加标签不影响蛋白质的功能 | 第55-56页 |
| 6.4 讨论 | 第56-57页 |
| 全文总结 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录一 实验仪器 | 第65-67页 |
| 附录二 菌种 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
