| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-25页 |
| 1 孢囊线虫的发生、分布和危害 | 第16-18页 |
| 1.1 发生分布及危害 | 第16-17页 |
| 1.2 孢囊线虫的生活史 | 第17-18页 |
| 1.3 孢囊线虫的孵化特点 | 第18页 |
| 2 我国竹林种植分布及竹子根围线虫病害 | 第18-19页 |
| 2.1 中国竹林种植分布 | 第18页 |
| 2.2 竹子根围线虫 | 第18-19页 |
| 3 孢囊线虫属的分类鉴定方法及主要特征 | 第19-21页 |
| 3.1 形态学鉴定 | 第19-20页 |
| 3.1.1 形态特征描述 | 第19页 |
| 3.1.2 形态测量值 | 第19-20页 |
| 3.2 分子鉴定 | 第20-21页 |
| 3.2.1 基于rDNA-ITS的分子数据 | 第20页 |
| 3.2.2 ITS-PCR-限制性片段长度多态性(ITS-PCR-RFLP) | 第20-21页 |
| 3.2.3 随机扩增多态性DNA(RAPD) | 第21页 |
| 4 孢囊线虫的分子检测研究概述 | 第21-23页 |
| 4.1 特异性引物双重PCR | 第21-22页 |
| 4.2 DNA条码 | 第22页 |
| 4.3 实时荧光定量PCR | 第22-23页 |
| 4.4 LAMP技术 | 第23页 |
| 5 β-1,4-内切葡聚糖酶基因的研究进展 | 第23-24页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 寄生雷竹的孢囊线虫种类鉴定 | 第25-37页 |
| 1 材料与方法 | 第25-28页 |
| 1.1 仪器与试剂 | 第25页 |
| 1.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 1.2.1 线虫标本的采集 | 第25页 |
| 1.2.2 线虫的分离 | 第25-26页 |
| 1.2.3 2龄幼虫的杀死、固定和临时玻片的制备 | 第26页 |
| 1.2.4 阴门锥的制作 | 第26页 |
| 1.2.5 扫描电子显微镜下的样品制备 | 第26页 |
| 1.2.6 DNA的提取 | 第26-27页 |
| 1.2.7 rDNA-ITS区和28S D2D3区的扩增 | 第27页 |
| 1.2.8 PCR产物纯化、连接及转化 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-35页 |
| 2.1 田间症状 | 第28-29页 |
| 2.2 形态学鉴定结果 | 第29-33页 |
| 2.2.1 形态特征描述 | 第29-31页 |
| 2.2.2 形态测量数据 | 第31-33页 |
| 2.3 rDNA-ITS区和28S D2D3区的扩增结果 | 第33-35页 |
| 3 小结与讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 朝鲜孢囊线虫特异性分子检测方法的建立 | 第37-46页 |
| 1 材料与方法 | 第37-40页 |
| 1.1 线虫标本的收集 | 第37页 |
| 1.2 线虫的分离 | 第37页 |
| 1.3 DNA的提取 | 第37页 |
| 1.4 基于ITS区设计朝鲜孢囊线虫特异性引物 | 第37-39页 |
| 1.5 PCR反应体系的优化 | 第39页 |
| 1.6 PCR反应体系的特异性检测 | 第39-40页 |
| 1.7 双重PCR的灵敏度检测 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-45页 |
| 2.1 特异性引物的设计及筛选 | 第40-41页 |
| 2.2 PCR反应体系的优化 | 第41-42页 |
| 2.3 特异性检测 | 第42-44页 |
| 2.4 灵敏度检测 | 第44-45页 |
| 3 小结与讨论 | 第45-46页 |
| 第四章 朝鲜孢囊线虫孵化特性研究 | 第46-52页 |
| 1 材料与方法 | 第46-47页 |
| 1.1 仪器与试剂 | 第46页 |
| 1.2 实验方法 | 第46-47页 |
| 1.2.1 线虫标本的采集 | 第46页 |
| 1.2.2 温度对朝鲜孢囊线虫孵化的影响 | 第46页 |
| 1.2.3 雷竹根围的土壤渗出液对朝鲜孢囊线虫孵化的影响 | 第46页 |
| 1.2.4 Zn~(2+)、Cu~(2+)对朝鲜孢囊线虫孵化的影响 | 第46-47页 |
| 1.2.5 温度对朝鲜孢囊线虫2龄幼虫生活力的影响 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-50页 |
| 2.1 温度对朝鲜孢囊线虫孵化的影响 | 第47-48页 |
| 2.2 Zn~(2+)、Cu~(2+)对朝鲜孢囊线虫孵化的影响 | 第48-49页 |
| 2.3 雷竹根围的土壤渗出液对朝鲜孢囊线虫孵化的影响 | 第49-50页 |
| 2.4 温度对朝鲜孢囊线虫2龄幼虫生活力的影响 | 第50页 |
| 3 小结与讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 朝鲜孢囊线虫β-1,4-内切葡聚糖酶基因cDNA的克隆与序列分析 | 第52-61页 |
| 1 材料与方法 | 第52-57页 |
| 1.1 仪器和试剂 | 第52页 |
| 1.2 实验方法 | 第52-57页 |
| 1.2.1 线虫来源 | 第52页 |
| 1.2.2 总RNA的提取 | 第52-53页 |
| 1.2.3 总RNA反转录合成cDNA第一条链 | 第53页 |
| 1.2.4 保守序列的扩增 | 第53-54页 |
| 1.2.5 PCR扩增产物的纯化、连接、转化及测序 | 第54页 |
| 1.2.6 RACE-cDNA的制备 | 第54-55页 |
| 1.2.7 5'-RACE和3'-RACE cDNA末端扩增 | 第55-56页 |
| 1.2.8 Hk-eng全长序列的获得 | 第56页 |
| 1.2.9 Hk-eng全长序列特征分析 | 第56-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-60页 |
| 2.1 保守序列的扩增结果 | 第57页 |
| 2.2 5'-RACE和3'-RACE的扩增结果 | 第57页 |
| 2.3 全长序列的获得与分析 | 第57-60页 |
| 3 小结与讨论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
