| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1. 甘蔗花叶病病原 | 第11-12页 |
| 2. 甘蔗抗花叶病育种 | 第12-13页 |
| 3. Potyvirus病毒与寄主互作研究进展 | 第13-19页 |
| 3.1 Potyvirus病毒与寄主的互作 | 第14-16页 |
| 3.2 eIF4E与VPg互作启动病毒复制 | 第16-17页 |
| 3.4 隐性抗性基因及其在抗病育种上的应用 | 第17-19页 |
| 4. 酵母双杂交系统 | 第19-20页 |
| 4.1 酵母双杂交技术原理 | 第19-20页 |
| 4.2 酵母双杂交技术的应用 | 第20页 |
| 5. 双分子荧光互补技术 | 第20-21页 |
| 5.1 BiFC原理 | 第20-21页 |
| 5.2 BiFC在研究potyviruses与寄主互作中的应用 | 第21页 |
| 6. Real-time PCR技术及其应用 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-41页 |
| 1. 甘蔗eIF4E基因与SCMV- VPg基因克隆 | 第23-32页 |
| 1.1 实验材料与试剂 | 第23页 |
| 1.2 甘蔗eIF4E基因中间片段的克隆 | 第23-26页 |
| 1.3 利用RACE获得基因全长序列 | 第26-31页 |
| 1.4 基因全长序列的克隆 | 第31页 |
| 1.5 SCMV-VPg基因克隆 | 第31-32页 |
| 2. eIF4E基因与VPg基因互作验证 | 第32-38页 |
| 2.1 酵母双杂交系统验证SCMV-VPg与Sc-eIF4Es互作 | 第32-34页 |
| 2.2. 双分子荧光互补验证SCMV-VPg与Sc-eIF4Es互作 | 第34-38页 |
| 3. 定量PCR:感染病毒前后定量与组织特异性表达 | 第38-41页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-39页 |
| 3.2 试验方法 | 第39-41页 |
| 第三章 结果与分析 | 第41-58页 |
| 1. 甘蔗eIF4E基因与甘蔗花叶病毒VPg基因克隆 | 第41-42页 |
| 1.1 甘蔗叶片RNA的提取 | 第41页 |
| 1.2 甘蔗eIF4E基因全长序列的克隆 | 第41-42页 |
| 2. 甘蔗eIF4E基因全长获得与生物信息学分析 | 第42-51页 |
| 2.1 甘蔗Sc-eIF4E蛋白二级结构预测 | 第45-46页 |
| 2.2 甘蔗Sc-eIF4E蛋白的等电点和分子量预测 | 第46-47页 |
| 2.3 甘蔗Sc-eIF4E蛋白的亚细胞定位预测 | 第47页 |
| 2.4 甘蔗Sc-eIF4E蛋白的三级结构预测 | 第47-48页 |
| 2.5 甘蔗Sc-eIF4E基因的系统进化分析 | 第48-51页 |
| 3. 蛋白互作验证结果 | 第51-58页 |
| 3.1 Sc-eIF4E、SCMV-VPg基因酵母表达载体的构建 | 第51-52页 |
| 3.2 SCMV-VPg与Sc-eIF4Es蛋白在酵母中的互作 | 第52-53页 |
| 3.3 双分子荧光互补技术验证SCMV-VPg与Sc-eIF4Es的互作 | 第53-55页 |
| 3.4 利用Real time PCR技术检测Sc-eIF4E基因mRNA的表达情况 | 第55-58页 |
| 第四章 讨论 | 第58-61页 |
| 1. eIF4E基因与SCMV-VPg基因的克隆 | 第58页 |
| 2. Sc-eIF4E与SCMV-VPg的互作 | 第58-59页 |
| 3. 基因定量表达 | 第59页 |
| 4. 以Sc-eIF4E为分子改良靶点创制抗SMD甘蔗新种质的可行性 | 第59-60页 |
| 5. 主要结论及下一步研究计划 | 第60-61页 |
| 5.1 主要结论 | 第60页 |
| 5.2 下一步研究计划 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
