中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第12-20页 |
1.1 胰腺癌的介绍 | 第12-14页 |
1.1.1 胰腺癌概述 | 第12页 |
1.1.2 胰腺癌相关发病因素 | 第12-13页 |
1.1.3 胰腺癌的治疗进展 | 第13-14页 |
1.2 Irisin的介绍 | 第14-17页 |
1.2.1 Irisin的发现 | 第14页 |
1.2.2 Irisin的结构 | 第14-15页 |
1.2.3 Irisin的释放和分布 | 第15-16页 |
1.2.4 Irisin与肥胖 | 第16页 |
1.2.5 Irisin与胰岛素抵抗(IR)和糖尿病 | 第16-17页 |
1.2.6 Irisin与癌症 | 第17页 |
1.3 AMPK/mTOR/p70S6K/4EBP1信号通路 | 第17-20页 |
第二章 重组irisin的表达与纯化 | 第20-32页 |
2.1 实验材料 | 第20-23页 |
2.1.1 菌株 | 第20页 |
2.1.2 实验仪器 | 第20-21页 |
2.1.3 实验试剂 | 第21页 |
2.1.4 试剂配制 | 第21-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-28页 |
2.2.1 Irisin在大肠杆菌中的诱导表达 | 第23页 |
2.2.2 Irisin在毕赤酵母中的诱导表达 | 第23-24页 |
2.2.3 SDS-PAGE电泳 | 第24-25页 |
2.2.4 WesternBlot | 第25-26页 |
2.2.5 Irisin的纯化 | 第26-27页 |
2.2.6 透析 | 第27页 |
2.2.7 BCA蛋白定量 | 第27-28页 |
2.3 实验结果与分析 | 第28-31页 |
2.3.1 Irisin在毕赤酵母中的诱导表达(TheexpressionofIrisininP.pastoris) | 第28页 |
2.3.2 毕赤酵母重组菌株中irisin的Western-Blot鉴定 | 第28-29页 |
2.3.3 毕赤酵母表达重组蛋白irisin的纯化 | 第29-30页 |
2.3.4 非糖基化irisin的去除 | 第30页 |
2.3.5 BCA法蛋白定量 | 第30-31页 |
2.4 本章小结 | 第31-32页 |
第三章 Irisin抑制胰腺癌Panc03.27细胞的增殖、迁移和侵袭 | 第32-53页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第32-34页 |
3.1.1 细胞株 | 第32页 |
3.1.2 实验仪器 | 第32-33页 |
3.1.3 实验试剂耗材 | 第33-34页 |
3.1.4 主要溶液的配制 | 第34页 |
3.2 实验方法 | 第34-39页 |
3.2.1 细胞培养 | 第34-35页 |
3.2.2 免疫荧光染色(Immunofluorescentstaining) | 第35-36页 |
3.2.3 MTT实验 | 第36页 |
3.2.4 细胞集落形成实验 | 第36页 |
3.2.5 细胞周期测定 | 第36-37页 |
3.2.6 划痕实验 | 第37页 |
3.2.7 Transwell实验 | 第37-38页 |
3.2.8 WesternBlot | 第38-39页 |
3.3 实验结果分析 | 第39-52页 |
3.3.1 胰腺癌Panc03.27细胞表面可能存在irisin的受体 | 第39-40页 |
3.3.2 Irisin抑制胰腺癌Panc03.27细胞的增殖 | 第40-41页 |
3.3.3 Irisin诱导Panc03.27细胞周期阻滞 | 第41-44页 |
3.3.4 Irisin抑制Panc03.27细胞迁移和侵袭能力 | 第44-45页 |
3.3.5 Irisin抑制Panc03.27细胞上皮间质转化现象(EMT) | 第45-46页 |
3.3.6 Irisin调控激活AMPK-mTOR信号通路 | 第46-48页 |
3.3.7 CompoundC逆转irisin引起的胰腺癌Panc03.27细胞的肿瘤特性 | 第48-52页 |
3.4 本章小结 | 第52-53页 |
第四章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |