| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩写词表 | 第11-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-15页 |
| 第2章 材料与方法 | 第15-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-18页 |
| 2.1.1 实验细胞来源 | 第15页 |
| 2.1.2 主要试剂及来源 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要仪器和设备 | 第16页 |
| 2.1.4 主要试剂及液体配制 | 第16-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-28页 |
| 2.2.1 细胞的培养及分组 | 第18-19页 |
| 2.2.2RT-PCR检测HIF-2a、Oct-4 及 β-catenin的表达 | 第19-21页 |
| 2.2.3Western blot印迹法检测蛋白表达 | 第21-23页 |
| 2.2.4CCK-8 检测细胞增殖分析 | 第23-24页 |
| 2.2.5 流式细胞仪分别检测细胞的凋亡率 | 第24页 |
| 2.2.6 流式细胞仪检测细胞胞内ROS水平 | 第24页 |
| 2.2.7 A549细胞及A549干细胞球的慢病毒转染 | 第24-28页 |
| 2.3 统计方法 | 第28-29页 |
| 第3章 结果 | 第29-47页 |
| 3.1 细胞培养的形态观察 | 第29-30页 |
| 3.1.1 A549细胞系及A549干细胞球常氧条件下培养的形态 | 第29页 |
| 3.1.2 缺氧刺激下A549细胞及A549干细胞球的形态 | 第29-30页 |
| 3.2 Western Blot及RT-PCR检测结果 | 第30-35页 |
| 3.2.1 Western Blot法分别检测A549细胞及A549干细胞球HIF-2α 蛋白最佳表达的时间 | 第30-31页 |
| 3.2.2 Western Blot检测A549细胞及A549干细胞球在常氧和缺氧小时HIF-2α、β-catenin、OCT-4 蛋白表达 | 第31-33页 |
| 3.2.3 RT-PCR检测A549细胞、A549干细胞球在常氧和缺氧刺激下HIF-2α、β-catenin、OCT-4 的mRNA表达 | 第33-35页 |
| 3.3 流式检测常氧和缺氧两组细胞的凋亡率及ROS | 第35-38页 |
| 3.3.1 流式细胞仪分别检测常氧和缺氧24小时下两组细胞的凋亡率 | 第35-36页 |
| 3.3.2 流式细胞仪分别检测常氧和缺氧24小时下两组细胞的ROS | 第36-38页 |
| 3.4 CCK-8 检测细胞增殖结果 | 第38页 |
| 3.5 荧光显微镜对A549细胞系和A549干细胞球的shRNA-HIF-2α 干扰慢病毒表达载体转染观察 | 第38-39页 |
| 3.6 Western Blot、RT-PCR检测shRNA-HIF-2α 干扰慢病毒转染两组细胞后HIF-2α、β-catenin、OCT-4 蛋白及mRNA表达 | 第39-44页 |
| 3.7 流式细胞仪分别检测常氧和缺氧24小时条件下shRN A-HIF-2α 干扰慢病毒转染两组细胞的凋亡率及ROS结果 | 第44-47页 |
| 第4章 讨论 | 第47-51页 |
| 第5章 结论与展望 | 第51-52页 |
| 5.1 结论 | 第51页 |
| 5.2 展望 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第56-57页 |
| 综述 | 第57-64页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
