摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略词表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-13页 |
材料与方法 | 第13-26页 |
1 材料 | 第13-17页 |
1.1 标本收集 | 第13页 |
1.2 细胞与质粒来源 | 第13-14页 |
1.3 主要试剂 | 第14-16页 |
1.4 主要仪器、设备 | 第16-17页 |
2 方法 | 第17-25页 |
2.1 HPV分型检测宫颈脱落细胞 | 第17页 |
2.2 HPV16感染检测及HPV16阳性样本测序 | 第17-18页 |
2.3 细胞培养 | 第18-19页 |
2.4 原型质粒和突变质粒的构建 | 第19-20页 |
2.5 增菌提质粒 | 第20-21页 |
2.6 质粒的转染 | 第21-22页 |
2.7 细胞爬片法免疫荧光检测蛋白的表达 | 第22页 |
2.8 G418筛选稳定表达的细胞株 | 第22-23页 |
2.9 透射电镜观察细胞形态 | 第23页 |
2.10 CCK8法检测细胞增殖能力 | 第23-24页 |
2.11 细胞平板克隆实验检测细胞增殖能力 | 第24页 |
2.12 Transwell细胞迁移实验 | 第24页 |
2.13 Transwell细胞侵袭实验 | 第24-25页 |
2.14 细胞凋亡实验 | 第25页 |
3 统计学分析 | 第25-26页 |
结果 | 第26-46页 |
1 宫颈HPV感染流行病学分析 | 第26-28页 |
1.1 汉族和维吾尔族HPV感染阳性率分析 | 第26页 |
1.2 分析760例汉族和维吾尔族HPV阳性基因亚型构成 | 第26-28页 |
1.3 汉族和维吾尔族HPV多重感染情况 | 第28页 |
2 HPV16阳性的基因组DNA测序 | 第28-36页 |
2.1 基因组DNA提取后进行HPV16感染检测 | 第28-29页 |
2.2 HPV16E6基因测序及多态性分析 | 第29-35页 |
2.3 HPV16 E6核苷酸序列进化树分析 | 第35-36页 |
3 HPV16E6病毒基因多态性功能分析 | 第36-46页 |
3.1 HPV16E6原型和HPV16E6突变型质粒的构建 | 第36-40页 |
3.2 HPV16E6在宫颈癌C33A细胞中的表达 | 第40页 |
3.3 透射电子显微镜观察稳定转染HPV16E6的C33A细胞形态 | 第40-41页 |
3.4 HPV16E6突变对C33A细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
3.5 HPV16E6突变对C33A细胞克隆形成的影响 | 第42-43页 |
3.6 HPV16E6突变对C33A细胞迁移和侵袭的影响 | 第43-44页 |
3.7 HPV16E6突变对C33A细胞凋亡的影响 | 第44-46页 |
讨论 | 第46-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
文献综述 | 第54-60页 |
参考文献 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
附录 | 第61-65页 |
作者简介 | 第65-66页 |
导师评阅表 | 第66页 |