| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 中英文缩写表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一篇 猪伪狂犬病的研究进展 | 第13-24页 |
| 1 猪伪狂犬病病原学研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1 猪伪狂犬病毒结构 | 第13-14页 |
| 1.2 猪伪狂犬病毒的基因组特征 | 第14页 |
| 1.3 猪伪狂犬病毒的毒力基因 | 第14-16页 |
| 1.4 猪伪狂犬病毒的主要蛋白 | 第16-18页 |
| 2 猪伪狂犬病流行病学研究进展 | 第18-20页 |
| 2.1 猪伪狂犬病流行形式 | 第18-19页 |
| 2.2 猪伪狂犬病毒株变化 | 第19-20页 |
| 3 猪伪狂犬病诊断研究进展 | 第20-24页 |
| 3.1 基于gE基因的分子生物学诊断方法 | 第20-22页 |
| 3.2 基于gE蛋白的血清学方法 | 第22-24页 |
| 第二篇 研究内容 | 第24-55页 |
| 第一章 猪伪狂犬病毒gE蛋白的表达及单抗制备 | 第24-41页 |
| 1 材料 | 第24-26页 |
| 1.1 病毒、细胞、二抗及载体 | 第24页 |
| 1.2 主要试剂购置 | 第24-25页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第25-26页 |
| 1.4 主要仪器 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-33页 |
| 2.1 引物设计 | 第26-27页 |
| 2.2 目的基因扩增 | 第27页 |
| 2.3 目的片段回收 | 第27页 |
| 2.4 目的片段和载体的双酶切 | 第27-28页 |
| 2.5 目的片段与载体连接转化 | 第28-29页 |
| 2.6 重组表达质粒的鉴定 | 第29页 |
| 2.7 重组表达菌株的培养及表达 | 第29-30页 |
| 2.8 原核表达条件优化 | 第30页 |
| 2.9 蛋白Ni柱纯化 | 第30页 |
| 2.10 表达产物的免疫印迹 | 第30-31页 |
| 2.11 ELISA筛选系统的建立 | 第31页 |
| 2.12 单克隆抗体的制备 | 第31-33页 |
| 3 结果 | 第33-38页 |
| 3.1 目的基因扩增结果 | 第33页 |
| 3.2 pET-gE_(37～243)菌液PCR鉴定 | 第33-34页 |
| 3.3 pET-gE_(37～243)表达 | 第34页 |
| 3.4 诱导时间优化 | 第34页 |
| 3.5 诱导温度和转速的优化 | 第34页 |
| 3.6 gE_(37～243)蛋白纯化及Western blot分析 | 第34-37页 |
| 3.7 融合前SP2/0的生长状态 | 第37页 |
| 3.8 单克隆孔中杂交瘤细胞的生长状态 | 第37-38页 |
| 3.9 单抗筛选结果 | 第38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 5 小结 | 第40-41页 |
| 第二章 PRV抗体检测间接ELISA方法的建立 | 第41-55页 |
| 1 材料 | 第41-42页 |
| 1.1 阴阳性血清及二抗 | 第41页 |
| 1.2 主要试剂购置 | 第41页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第41-42页 |
| 1.4 主要仪器 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-46页 |
| 2.1 兔抗猪IgG与HRP偶联 | 第42-43页 |
| 2.2 iELISA检测方法 | 第43页 |
| 2.3 iELISA检测方法条件优化 | 第43-45页 |
| 2.4 iELISA检测方法的性能评价 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-52页 |
| 3.1 iELISA检测方法条件优化 | 第46-51页 |
| 3.2 iELISA检测方法性能评价 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 5 小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第62-63页 |
| 导师简介 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |