| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第13-29页 |
| 1.1 蛋白质的可逆磷酸化 | 第13-19页 |
| 1.1.1 蛋白质的可逆磷酸化概述 | 第13-14页 |
| 1.1.2 蛋白质酪氨酸磷酸酶催化机制 | 第14-15页 |
| 1.1.3 蛋白质酪氨酸磷酸酶相关疾病及治疗 | 第15-19页 |
| 1.2 PTP-MEG1简介 | 第19-22页 |
| 1.2.1 PTP-MEG1研究现状 | 第19-21页 |
| 1.2.2 △PTP-MEG1基因cDNA及氨基酸序列 | 第21-22页 |
| 1.3 FKBP简介 | 第22-27页 |
| 1.3.1 FKBP概述 | 第22-23页 |
| 1.3.2 几种重要的FKBPs及相关疾病 | 第23-25页 |
| 1.3.3 FKBP-C在目的蛋白表达过程中的作用 | 第25-26页 |
| 1.3.4 FKBP-C基因cDNA及氨基酸序列 | 第26-27页 |
| 1.4 本实验的研究思路与意义 | 第27-29页 |
| 第二章 △PTP-MEG1&FKBP-C载体的构建 | 第29-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-32页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第30页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第30-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-36页 |
| 2.2.1 基本分子生物学实验方法 | 第32页 |
| 2.2.2 基因克隆及表达载体的构建 | 第32-36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-37页 |
| 2.3.1 △PTP-MEG1基因片段的扩增 | 第36-37页 |
| 2.3.2 重组质粒的双酶切鉴定 | 第37页 |
| 2.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 ΔPTP-MEG1蛋白的表达与分离纯化 | 第38-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-42页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第38-39页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第39页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第39-42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-44页 |
| 3.2.1 目的蛋白的诱导表达 | 第42页 |
| 3.2.2 目的蛋白的粗提取 | 第42页 |
| 3.2.3 Ni柱亲和层析 | 第42-43页 |
| 3.2.4 His6-ΔPTP-MEG1蛋白的特异性分析 | 第43-44页 |
| 3.3 实验结果 | 第44-46页 |
| 3.3.1 目的蛋白的粗提取 | 第44页 |
| 3.3.2 Ni柱亲和层析纯化后的蛋白质电泳 | 第44-45页 |
| 3.3.3 His6-ΔPTP-MEG1的特异性分析 | 第45-46页 |
| 3.4 本章小结 | 第46-47页 |
| 第四章 ΔPTP-MEG1的酶学表征 | 第47-53页 |
| 4.1 实验方法 | 第47-49页 |
| 4.1.1 酶活力的测定 | 第47页 |
| 4.1.2 最适pH值的测定 | 第47-48页 |
| 4.1.3 最适温度的测定 | 第48页 |
| 4.1.4 最适离子强度的测定 | 第48页 |
| 4.1.5 Km值的测定 | 第48-49页 |
| 4.2 实验结果 | 第49-51页 |
| 4.2.1 酶活力 | 第49页 |
| 4.2.2 最适pH值 | 第49页 |
| 4.2.3 最适温度 | 第49-50页 |
| 4.2.4 最适离子强度 | 第50页 |
| 4.2.5 Km值 | 第50-51页 |
| 4.3 本章小结 | 第51-53页 |
| 第五章 △cKIT&FKBP-C载体的构建及表达 | 第53-59页 |
| 5.1 cKIT克隆的背景及意义 | 第53页 |
| 5.2 实验材料 | 第53-54页 |
| 5.2.1 实验仪器 | 第53-54页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第54页 |
| 5.2.3 试剂配制 | 第54页 |
| 5.3 实验方法 | 第54-56页 |
| 5.3.1 基本分子生物学实验方法 | 第54页 |
| 5.3.2 基因克隆及表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 5.3.3 目的蛋白的诱导表达 | 第55页 |
| 5.3.4 目的蛋白的粗提取 | 第55-56页 |
| 5.4 实验结果 | 第56-58页 |
| 5.4.1 △cKIT基因片段的扩增 | 第56页 |
| 5.4.2 重组质粒的双酶切鉴定 | 第56-57页 |
| 5.4.3 目的蛋白的粗提取 | 第57-58页 |
| 5.5 本章小结 | 第58-59页 |
| 全篇总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
