| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略语 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-20页 |
| 1 APOLP-Ⅲ蛋白及其功能 | 第13-15页 |
| 1.1 ApoLp-Ⅲ与脂质转运 | 第13-14页 |
| 1.2 ApoLp-Ⅲ与免疫 | 第14-15页 |
| 2 乙酰化及其功能 | 第15-18页 |
| 2.1 组蛋白的乙酰化与去乙酰化 | 第15-16页 |
| 2.2 蛋白质的乙酰化与蛋白质的稳定性 | 第16页 |
| 2.3 乙酰化和去乙酰化与信号激活 | 第16页 |
| 2.4 乙酰化与癌症 | 第16-17页 |
| 2.5 乙酰化、泛素化与蛋白稳定性 | 第17-18页 |
| 3.家蚕蛋白乙酰化研究进展 | 第18-20页 |
| 第二章 试验方案设计 | 第20-22页 |
| 1 实验目的与意义 | 第20页 |
| 2 实验内容 | 第20-21页 |
| 3 实验流程图 | 第21-22页 |
| 第三章 真核表达载体PIEX1SI-GFP的构建 | 第22-33页 |
| 1 材料、试剂与仪器 | 第22-24页 |
| 1.1 材料 | 第22页 |
| 1.2 试剂 | 第22页 |
| 1.3 试剂配制 | 第22-23页 |
| 1.4 仪器 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-29页 |
| 2.1 p IEX-1 多克隆位点的优化 | 第24-25页 |
| 2.2 p IEX1Si-GFP载体的构建 | 第25-28页 |
| 2.3 GFP蛋白的真核表达与鉴定 | 第28-29页 |
| 3 结果 | 第29-32页 |
| 3.1 actin A3-GFP-SV40表达盒的构建 | 第29页 |
| 3.2 真核表达载体pIEX1Si-GFP的构建 | 第29-31页 |
| 3.3 真核表达载体pIEX1Si-GFP表达绿色荧光蛋白 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 第四章 BMAPOLP-Ⅲ的真核表达及乙酰化鉴定 | 第33-42页 |
| 1 材料、试剂与仪器 | 第33-35页 |
| 1.1 材料 | 第33页 |
| 1.2 试剂 | 第33页 |
| 1.3 设备 | 第33-34页 |
| 1.4 试剂配制 | 第34-35页 |
| 2 方法 | 第35-39页 |
| 2.1 家蚕细胞总RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.2 真核表达载体pIEX1Si-GFP-ApoLp-Ⅲ的构建 | 第36-38页 |
| 2.3 BmApoLp-Ⅲ蛋白的真核表达与乙酰化的鉴定 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-40页 |
| 3.1 pIEX1Si-GFP-ApoLp-Ⅲ真核表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3.2 BmApoLp-Ⅲ蛋白的真核表达及乙酰化鉴定 | 第40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 第五章 乙酰化对BMAPOLP-Ⅲ蛋白表达的影响 | 第42-48页 |
| 1 实验材料、试剂与仪器设备 | 第42页 |
| 1.1 材料 | 第42页 |
| 1.2 试剂 | 第42页 |
| 1.3 仪器设备 | 第42页 |
| 1.4 试剂的配制 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-44页 |
| 2.1 乙酰化水平的变化对BmApoLp-Ⅲ蛋白表达的影响 | 第42-44页 |
| 2.2 乙酰化水平的变化对BmApoLp-Ⅲ基因转录的影响 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-46页 |
| 3.1 乙酰化水平的变化对BmApoLp-Ⅲ蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.2 qRT-PCR检测BmApoLp-Ⅲ的转录水平 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 第六章 乙酰化上调BMAPOLP-Ⅲ蛋白表达的分子机制研究 | 第48-57页 |
| 1 材料试剂与设备 | 第48页 |
| 1.1 材料 | 第48页 |
| 1.2 试剂 | 第48页 |
| 1.3 仪器设备 | 第48页 |
| 1.4 试剂配制 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-52页 |
| 2.1 乙酰化对BmApoLp-Ⅲ蛋白降解曲线影响的分析 | 第48-50页 |
| 2.2 乙酰化对BmApoLp-Ⅲ蛋白的累积曲线影响分析 | 第50-51页 |
| 2.3 BmApoLp-Ⅲ蛋白乙酰化与泛素化竞争关系的研究 | 第51-52页 |
| 3 结果 | 第52-56页 |
| 3.1 乙酰化对BmApoLp-Ⅲ的累积曲线影响研究 | 第52-53页 |
| 3.2 乙酰化对BmApoLp-Ⅲ的降解曲线影响研究 | 第53-54页 |
| 3.3 BmApoLp-Ⅲ蛋白乙酰化与泛素化竞争关系研究 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 第七章 乙酰化对BMAPOLP-Ⅲ蛋白抗凋亡功能的影响分析 | 第57-61页 |
| 1 材料、试剂与仪器 | 第57页 |
| 1.1 材料 | 第57页 |
| 1.2 试剂 | 第57页 |
| 1.3 试剂配制 | 第57页 |
| 1.4 仪器设备 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-58页 |
| 2.1 BmApoLp-Ⅲ蛋白对H2O2诱导的细胞凋亡的影响 | 第57-58页 |
| 2.2 BmApoLp-Ⅲ蛋白抗凋亡活性的剂量依赖性研究 | 第58页 |
| 2.3 BmApoLp-Ⅲ蛋白的乙酰化修饰作用对其抗凋亡功能的影响 | 第58页 |
| 3 结果 | 第58-60页 |
| 3.1 BmApoLp-Ⅲ抗凋亡功能研究以及乙酰化对BmApoLp-Ⅲ的抗凋亡影响 | 第58-59页 |
| 3.2 BmApoLp-Ⅲ抗凋亡功能的剂量效应 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
