| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第9-11页 |
| 第2章 材料 | 第11-15页 |
| 2.1 细胞株及质粒 | 第11页 |
| 2.2 主要试剂 | 第11-12页 |
| 2.3 自配试剂 | 第12-14页 |
| 2.4 主要仪器设备 | 第14-15页 |
| 第3章 方法 | 第15-29页 |
| 3.1 临床病人资料收集与分析 | 第15-16页 |
| 3.1.1 收集整理临床病人资料 | 第15页 |
| 3.1.2 对临床标本免疫组化染色、评分 | 第15-16页 |
| 3.1.3 使用Kaplan-Meier生存曲线分析 | 第16页 |
| 3.1.4 使用Cox回归分析 | 第16页 |
| 3.2 细胞培养 | 第16-18页 |
| 3.2.1 细胞传代 | 第16-17页 |
| 3.2.2 细胞冻存 | 第17-18页 |
| 3.2.3 细胞复苏 | 第18页 |
| 3.3 shRNA与pcDNA3.1(+)质粒 | 第18-23页 |
| 3.3.1 设计并合成IFITM3基因shRNA干扰片段和过表达质粒 | 第18-19页 |
| 3.3.2 半定量RT-PCR分析mRNA变化 | 第19-23页 |
| 3.3.2.1 基因转染 | 第19-20页 |
| 3.3.2.2 RNA提取（OMEGA离心柱法） | 第20-21页 |
| 3.3.2.3 RNA逆转录成cDNA | 第21页 |
| 3.3.2.4 PCR扩增 | 第21-22页 |
| 3.3.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第22-23页 |
| 3.3.2.6 qRT-PCR扩增 | 第23页 |
| 3.4 Westernblot实验检测肝癌细胞蛋白表达 | 第23-26页 |
| 3.4.1 细胞转染 | 第23页 |
| 3.4.2 细胞总蛋白提取 | 第23-24页 |
| 3.4.3 SDS-PAGE电泳 | 第24-25页 |
| 3.4.4 转膜 | 第25页 |
| 3.4.5 免疫反应 | 第25-26页 |
| 3.4.6 化学发光,显影,定影 | 第26页 |
| 3.4.7 凝胶图像分析 | 第26页 |
| 3.5 细胞侵袭、迁移试验(Transwell) | 第26-27页 |
| 3.5.1 细胞转染 | 第26页 |
| 3.5.2 Transwell侵袭试验测定细胞侵袭能力 | 第26-27页 |
| 3.5.3 Transwell侵袭试验测定细胞迁移能力 | 第27页 |
| 3.6 细胞迁移试验(划痕试验) | 第27-28页 |
| 3.7 统计学分析 | 第28-29页 |
| 第4章 结果 | 第29-41页 |
| 4.1 IFITM3在肝癌组织学标本中高表达 | 第29-30页 |
| 4.2 IFITM3与肝癌的进展密切相关 | 第30-33页 |
| 4.3 IFITM3在肝癌细胞株中的蛋白和mRNA表达情况 | 第33-34页 |
| 4.4 IFITM3诱导上皮细胞间质转化 | 第34-36页 |
| 4.5 IFITM3促进肝细胞肝癌侵袭转移 | 第36-39页 |
| 4.6 IFITM3通过p38-MAPK通路诱导上皮细胞间质转化发生 | 第39-41页 |
| 第5章 讨论 | 第41-43页 |
| 第6章 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-47页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
| 综述 | 第48-57页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
