| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 目录 | 第12-15页 |
| 图目录 | 第15-16页 |
| 表目录 | 第16-17页 |
| 缩略词 | 第17-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-37页 |
| 1 杂交水稻生产中应用的雄性不育与育性恢复体系 | 第19-27页 |
| 1.1 细胞质雄性不育与育性恢复 | 第19-25页 |
| 1.1.1 粳稻CMS与育性恢复系统 | 第20-23页 |
| 1.1.2 籼稻CMS与育性恢复系统 | 第23页 |
| 1.1.3 CMS机理研究 | 第23-25页 |
| 1.2 光温敏核雄性不育 | 第25-27页 |
| 1.2.1 农垦58S及其衍生系 | 第26页 |
| 1.2.2 安农S-1及其衍生系 | 第26-27页 |
| 1.2.3 株1S及其衍生系 | 第27页 |
| 2 光温敏核雄性不育的遗传基础 | 第27-30页 |
| 2.1 PGMS基因 | 第27-28页 |
| 2.2 TGMS基因 | 第28-29页 |
| 2.3 不育机理研究 | 第29-30页 |
| 3 核糖核酸酶Z基因相关研究 | 第30-32页 |
| 4 HRM分型技术及其在植物中的应用 | 第32-35页 |
| 5 本研究的目的与主要内容 | 第35-37页 |
| 第二章 株1S雄性核不育基因定位及候选基因分析 | 第37-54页 |
| 摘要 | 第37-38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-42页 |
| 1.1 试验材料 | 第38页 |
| 1.2 温敏不育系育性观察 | 第38页 |
| 1.3 DNA提取和SSR分析 | 第38-39页 |
| 1.4 数据统计分析与遗传作图 | 第39页 |
| 1.5 RNZ基因测序分析 | 第39-41页 |
| 1.5.1 高保真酶PCR扩增及纯化 | 第39-40页 |
| 1.5.2 纯化产物加A与连接 | 第40页 |
| 1.5.3 转化 | 第40-41页 |
| 1.5.4 质粒DNA的提取 | 第41页 |
| 1.6 dCAPS分子标记开发 | 第41-42页 |
| 1.6.1 引物设计 | 第41-42页 |
| 1.6.2 PCR扩增和酶切 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-52页 |
| 2.1 株1S温敏核不育基因的遗传与初步定位 | 第42-43页 |
| 2.1.1 遗传特性 | 第42-43页 |
| 2.1.2 初步定位 | 第43页 |
| 2.2 等位性测验 | 第43-45页 |
| 2.3 候选基因分析 | 第45-52页 |
| 2.3.1 RNZ基因突变与多态性 | 第46-50页 |
| 2.3.2 分子标记鉴定表明突变RNZ只存在于温敏不育系 | 第50-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 第三章 我国两系杂交水稻中光温敏不育基因的鉴定与演化分析 | 第54-65页 |
| 摘要 | 第54-55页 |
| 1 材料与方法 | 第55-58页 |
| 1.1 材料及系谱信息 | 第55-56页 |
| 1.2 光温敏基因分子检测 | 第56-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-63页 |
| 2.1 光敏不育基因分子标记 | 第58-59页 |
| 2.2 两系不育系携带的光温敏不育基因 | 第59-60页 |
| 2.2.1 农垦58S衍生系 | 第59页 |
| 2.2.2 株1S和安农S-1衍生不育系 | 第59页 |
| 2.2.3 不育系杂交培育的不育系 | 第59-60页 |
| 2.2.4 其他来源两系不育系 | 第60页 |
| 2.3 两系不育系光温敏不育基因系谱图 | 第60-61页 |
| 2.4 生产应用两系杂交稻携带光温敏基因的演变 | 第61-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 第四章 光温敏不育基因功能性HRM标记开发与应用 | 第65-81页 |
| 摘要 | 第65-66页 |
| 1 材料与方法 | 第66-69页 |
| 1.1 试验材料 | 第66页 |
| 1.2 引物及非标记探针设计 | 第66-68页 |
| 1.2.1 光敏基因位点HRM引物设计 | 第66-68页 |
| 1.2.2 温敏基因位点HRM引物设计 | 第68页 |
| 1.3 DNA提取、PCR扩增与HRM分析 | 第68-69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-79页 |
| 2.1 不同HRM方法的比较 | 第69-77页 |
| 2.1.1 光敏基因的分型 | 第69-73页 |
| 2.1.2 温敏基因的分型 | 第73-75页 |
| 2.1.3 基于CADMA的两系不育系分型 | 第75-77页 |
| 2.2 基于CADMA的光温敏不育基因分型在不育系杂交后代群体分析中的应用 | 第77-78页 |
| 2.2.1 光敏F_2群体分型 | 第77页 |
| 2.2.2 温敏F_2群体分型 | 第77-78页 |
| 2.3 基于CADMA的光温敏不育基因分型在种子纯度鉴定中的应用 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-81页 |
| 第五章 水稻RNZ基因的分子表征 | 第81-96页 |
| 摘要 | 第81-82页 |
| 1 材料与方法 | 第82-90页 |
| 1.1 试验材料 | 第82页 |
| 1.2 DNA和RNA提取及cDNA合成 | 第82-84页 |
| 1.2.1 DNA提取 | 第82页 |
| 1.2.2 RNA提取 | 第82-84页 |
| 1.2.3 cDNA合成 | 第84页 |
| 1.3 实时定量RT-PCR反应 | 第84页 |
| 1.4 亚细胞定位载体构建 | 第84-85页 |
| 1.4.1 RNZ基因cDNA克隆 | 第84-85页 |
| 1.4.2 双酶切鉴定重组质粒 | 第85页 |
| 1.4.3 RNZ-GFP融合载体构建 | 第85页 |
| 1.5 原生质体转化 | 第85-86页 |
| 1.6 RNAi载体的构建 | 第86-87页 |
| 1.6.1 目的片段的获得 | 第86页 |
| 1.6.2 RNZ-RNAi植物表达载体构建 | 第86-87页 |
| 1.7 农杆菌转化 | 第87-88页 |
| 1.7.1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第87页 |
| 1.7.2 农杆菌的转化 | 第87-88页 |
| 1.8 水稻遗传转化 | 第88-89页 |
| 1.9 GUS染色分析 | 第89页 |
| 1.10 幼穗减数分裂期的高低温处理 | 第89-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-95页 |
| 2.1 亚细胞定位载体构建及原生质体融合表达 | 第90-91页 |
| 2.2 RNAi植物表达载体构建及转基因水稻的获得 | 第91页 |
| 2.3 T_0代转基因水稻的鉴定及靶基因的表达分析 | 第91-93页 |
| 2.3.1 阳性单株鉴定：GUS染色以及PCR扩增 | 第91-92页 |
| 2.3.2 转基因单株表型初步观察 | 第92页 |
| 2.3.3 转基因株系的靶基因表达水平初步检测 | 第92-93页 |
| 2.4 减数分裂期RNZ基因对温度胁迫的应答反应 | 第93-94页 |
| 2.5 RNZ蛋白质三维结构预测 | 第94-95页 |
| 3 讨论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-109页 |
| 附录1 两系不育系系谱信息 | 第109-112页 |
| 附录2 USDA核心种质信息 | 第112-117页 |
| 作者简介 | 第117页 |
