摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
一 前言 | 第12-19页 |
1.1 拟南芥花瓣 | 第12-14页 |
1.2 拟南芥花瓣锥形表皮细胞 | 第14-16页 |
1.3 JAG的功能及研究现状 | 第16-17页 |
1.4 本课题的研究内容及拟解决的科学问题 | 第17-19页 |
1.4.1 研究内容 | 第17-18页 |
1.4.2 拟解决的科学问题 | 第18-19页 |
二 材料与方法 | 第19-31页 |
2.1 实验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 实验用到的种子 | 第19页 |
2.1.2 实验用到的菌株 | 第19页 |
2.1.3 实验用到的质粒 | 第19-20页 |
2.1.4 实验用的培养基 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-31页 |
2.2.1 种子的消毒 | 第21页 |
2.2.2 种子的种植 | 第21-22页 |
2.2.3 植物组织DNA的提取 | 第22页 |
2.2.4 突变体纯杂合的鉴定 | 第22-23页 |
2.2.5 基因组DNA的PCR扩增 | 第23页 |
2.2.6 RNA的反转录(反转1500 ng 20μL体系) | 第23-24页 |
2.2.7 实时定量PCR | 第24-25页 |
2.2.8 载体的构建 | 第25页 |
2.2.9 土壤农杆菌侵染实验 | 第25-26页 |
2.2.10 GUS染色 | 第26-27页 |
2.2.11 Western免疫印迹实验 | 第27-28页 |
2.2.12 小苗、子叶、花瓣及锥形细胞的观察方法 | 第28-29页 |
2.2.13 农杆菌介导的拟南芥叶片瞬时转化 | 第29页 |
2.2.14 活性氧染色 | 第29-30页 |
2.2.15 菌种的保存 | 第30-31页 |
三 结果与分析 | 第31-65页 |
3.1 jag-1突变体的鉴定 | 第31-32页 |
3.2 jag-1突变体表型的观察 | 第32-57页 |
3.2.1 jag-1突变体子叶表皮细胞、子叶表型观察 | 第32-34页 |
3.2.2 JAG在幼苗中的组织定位 | 第34-35页 |
3.2.3 jag-1突变体花的观察 | 第35-36页 |
3.2.4 JAG在花瓣中的组织定位 | 第36-37页 |
3.2.5 jag-1突变体花瓣、萼片表型的观察 | 第37-42页 |
3.2.6 jag-1突变体锥形细胞的表型观察 | 第42-47页 |
3.2.7 jag-1突变体的互补株系与JAG过表达株系的构建与表型观察 | 第47-57页 |
3.3 jag-1突变体花瓣锥形细胞的微管排列观察 | 第57页 |
3.4 jag-1突变体的活性氧染色 | 第57-59页 |
3.5 jag-1突变体中差异表达基因的RNA-seq分析 | 第59-65页 |
四 讨论 | 第65-68页 |
4.1 JAG影响器官的发育和不均一性 | 第65-66页 |
4.2 JAG在锥形细胞发育早期表达 | 第66页 |
4.3 活性氧影响锥形细胞的发育 | 第66-67页 |
4.4 jag-1突变体花序转录组分析 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
附录A 构建载体及电泳图 | 第75-77页 |
附录B 克隆及表达量检测引物 | 第77-78页 |
附录C 荧光定量PCR引物 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |