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基于磁性微球的化学发光免疫标记技术的研究及其应用

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第1章 前言第11-24页
 1 化学发光第11-16页
   ·化学发光的历史第11页
   ·化学发光的定义和原理第11-12页
   ·常用的化学发光试剂第12-15页
     ·鲁米诺及其衍生物化学发光试剂第12-13页
     ·过氧草酰类化学发光试剂第13-14页
     ·吖啶酯类化学发光试剂第14页
     ·钌(Ⅱ)-联吡啶或钌(Ⅱ)-邻菲啰啉配合物第14页
     ·其它常用化学发光试剂第14-15页
   ·化学发光分析法的应用第15-16页
     ·化学发光分析在农药残留检测中的应用第15页
     ·化学发光分析在药物分析中的应用第15页
     ·化学发光分析在生物活性物质分析中的应用第15-16页
     ·化学发光分析在其它物质分析中的应用第16页
   ·化学发光分析法的发展趋势第16页
 2 免疫分析的简介第16-18页
   ·免疫分析第16-17页
   ·免疫分析方法的分类第17-18页
     ·按测定原理分类第17页
     ·按检测方式分类第17-18页
 3 化学发光免疫分析方法第18-20页
   ·化学发光免疫分析方法第18页
   ·化学发光酶免疫分析方法第18-19页
     ·HRP 标记的免疫分析方法第18-19页
     ·ALP 标记的免疫分析方法第19页
   ·电致化学发光免疫分析方法第19-20页
 4 化学发光免疫分析中的固定方法第20-21页
   ·吸附法第20页
   ·共价键合法第20-21页
   ·包埋法第21页
   ·层层自组装法第21页
 5 化学发光免疫分析中的载体第21-22页
   ·化学发光免疫免疫分析方法对载体材料性能的要求第21页
   ·磁性微球作为固相载体在免疫分析中的应用第21-22页
 6 纳米技术在化学发光免疫分析中的应用第22-23页
   ·纳米材料概述第22页
   ·纳米材料在化学发光免疫分析方法中的应用第22-23页
 7 课题意义及主要内容第23-24页
第2章 化学发光磁酶免疫分析检测甲胎蛋白第24-32页
 1 引言第24-25页
 2 实验部分第25-27页
   ·仪器与试剂第25-26页
     ·仪器及试剂第25-26页
     ·溶液配置方法第26页
   ·实验方法第26-27页
     ·免疫磁性微球的制备第26页
     ·基于MB/anti-AFP/AFP/ anti-AFP-HRP 鲁米诺-过氧化氢-TRP 化学发光体系测定AFP第26-27页
     ·ELISA 法测定AFP第27页
 3 结果与讨论第27-31页
   ·制备免疫磁性微球的条件选择第27-28页
     ·AFP 单克隆抗体(anti-AFP)浓度的选择第27-28页
     ·磁性微球用量的选择第28页
   ·基于MB/anti-AFP/AFP/ anti-AFP-HRP 化学发光检测AFP第28-29页
   ·血清样品分析第29-30页
   ·选择性第30页
   ·重现性和回收率第30-31页
 4 小结第31-32页
第3章 基于磁性微球的鲁米诺标记金纳米粒子化学发光无酶免疫分析检测癌胚抗原第32-45页
 1 引言第32-34页
 2 实验部分第34-35页
   ·仪器与试剂第34页
   ·实验方法第34-35页
     ·Luminol-H_2O_2-Co~(2+)化学发光体系的实验方法第34页
     ·金纳米粒子(Au NPs)的制备与表征第34页
     ·化学发光免疫探针LAAu NPs 的制备第34页
     ·免疫磁性微球的制备第34-35页
     ·基于MB/anti-CEA /CEA/LAAu NPsLuminol-H_2O_2-Co~(2+)无酶化学发光体系检测CEA第35页
     ·ELISA 法测定CEA第35页
 3 结果与讨论第35-44页
   ·巯基丙酸(MPA)浓度的选择第35页
   ·anti-CEA 2 和Luminol 浓度的选择第35-37页
   ·LAAu NPs 的光谱表征第37-38页
   ·LAAu NPs 的TEM 表征第38-39页
   ·LAAu NPs 的化学发光性质研究第39-40页
   ·基于磁性微球的鲁米诺标记金纳米粒子化学发光无酶免疫分析检测CEA第40-42页
     ·Luminol-H_2O_2-Co~(2+) 无酶化学发光体系条件选择第41-42页
     ·基于磁性微球的鲁米诺标记金纳米粒子化学发光无酶化学发光体系测定CEA第42页
   ·血清样品分析第42-43页
   ·选择性第43页
   ·重现性和回收率第43-44页
 4 小结第44-45页
第4章 异鲁米诺标记聚苯乙烯微球化学发光法测定谷胱甘肽第45-57页
 1 引言第45-46页
 2 实验部分第46-48页
   ·仪器与试剂第46-47页
     ·仪器第46页
     ·试剂第46-47页
   ·实验方法第47-48页
     ·异鲁米诺化学发光探针的制备第47页
     ·磁珠-异鲁米诺化学发光探针复合物的制备第47页
     ·谷胱甘肽打断双硫键第47页
     ·化学发光检测第47页
     ·K562 细胞中游离巯基的检测第47-48页
 3 结果与讨论第48-56页
   ·桥联DNA 体积的优化第48-49页
   ·聚苯乙烯微球、桥联DNA、异鲁米诺分子比例的计算第49-51页
     ·标准桥联DNA 溶液的紫外测定第49页
     ·标准异鲁米诺溶液的紫外测定第49-50页
     ·聚苯乙烯微球表面DNA 分子数的计算第50-51页
     ·聚苯乙烯微球表面异鲁米诺分子数的计算第51页
     ·聚苯乙烯微球的个数计算第51页
     ·聚苯乙烯微球、侨联DNA、异鲁米诺分子比例的计算第51页
   ·磁珠与聚苯乙烯微球比例的计算第51-52页
     ·标准异鲁米诺溶液的化学发光测定第51-52页
     ·磁珠-异鲁米诺化学发光探针复合物上异鲁米诺浓度的测定第52页
     ·磁珠个数的计算第52页
     ·磁珠与聚苯乙烯微球比例的计算第52页
   ·谷胱甘肽打断磁珠-异鲁米诺化学发光探针复合物中双硫键条件的选择第52-54页
     ·谷胱甘肽pH 的选择第52-53页
     ·谷胱甘肽反应时间的选择第53-54页
   ·化学发光条件的选择第54-56页
     ·pH 的选择第54-55页
     ·过氧化氢浓度的选择第55-56页
   ·谷胱甘肽浓度的测定第56页
   ·细胞中游离巯基化合物的测定第56页
 4 小结第56-57页
结论第57-58页
参考文献第58-68页
致谢第68-69页
攻读学位期间发表的学术论文目录第69-70页

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