| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 符号说明及缩略词 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-34页 |
| 1.1 蛋白质晶体学 | 第16-23页 |
| 1.1.1 测定蛋白质结构的基本步骤 | 第17页 |
| 1.1.2 蛋白质的结晶和结晶条件的筛选与优化 | 第17-21页 |
| 1.1.3 X射线衍射数据的收集 | 第21-22页 |
| 1.1.4 X射线衍射数据的处理 | 第22-23页 |
| 1.2 木聚糖酶概述 | 第23-30页 |
| 1.2.1 木聚糖的组成和结构 | 第23-24页 |
| 1.2.2 木聚糖酶的分类 | 第24-25页 |
| 1.2.3 GH11木聚糖酶 | 第25-29页 |
| 1.2.4 木聚糖酶的应用 | 第29-30页 |
| 1.3 纤维堆囊菌中的木聚糖酶 | 第30-32页 |
| 1.3.1 纤维堆囊菌概述 | 第30-31页 |
| 1.3.2 纤维堆囊菌So0157-2木聚糖酶研究进展 | 第31-32页 |
| 1.4 本论文工作开展思路和研究内容 | 第32-34页 |
| 第二章 Xyn11B-C降解底物特性分析 | 第34-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 2.1.1 主要实验试剂和材料 | 第35-36页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-37页 |
| 2.2.1 Xyn11B-C与PNP-X2作用及产物检测 | 第36页 |
| 2.2.2 Xyn11B-C与ANTS-Xn作用及产物检测 | 第36-37页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第37-38页 |
| 2.3.1 Xyn11B-C与PNP-X2作用的产物分析 | 第37页 |
| 2.3.2 Xyn11B-C与ANTS-Xn作用的产物分析 | 第37-38页 |
| 2.4 本章小结 | 第38-40页 |
| 第三章 Xyn11B-C的表达、纯化和结晶 | 第40-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第41-45页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第41页 |
| 3.1.2 培养基 | 第41页 |
| 3.1.3 主要实验试剂 | 第41-44页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第44-45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-51页 |
| 3.2.1 Xyn11B-C氨基酸序列分析 | 第45页 |
| 3.2.2 表达载体的构建 | 第45-48页 |
| 3.2.3 目的蛋白的异源表达及纯化 | 第48-50页 |
| 3.2.4 Xyn11B-C蛋白质结晶条件的筛选和优化 | 第50-51页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第51-56页 |
| 3.3.1 Xyn11B-C的氨基酸序列分析 | 第51-52页 |
| 3.3.2 表达载体的构建 | 第52页 |
| 3.3.3 目的蛋白的异源表达及纯化 | 第52-55页 |
| 3.3.4 Xyn11B-C的结晶条件筛选和优化 | 第55-56页 |
| 3.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章 Xyn11B-C(E331A/Q)的表达、纯化及其与底物共晶的尝试 | 第57-71页 |
| 4.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第58-59页 |
| 4.1.2 培养基 | 第59页 |
| 4.1.3 主要实验试剂 | 第59页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第59页 |
| 4.2 实验方法 | 第59-64页 |
| 4.2.1 表达载体的构建 | 第59-62页 |
| 4.2.2 目的蛋白的异源表达及纯化 | 第62-63页 |
| 4.2.3 Xyn11B-C(E331A/Q)蛋白-底物共晶的尝试 | 第63-64页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第64-70页 |
| 4.3.1 表达载体的构建 | 第64页 |
| 4.3.2 目的蛋白的诱导表达及纯化 | 第64-65页 |
| 4.3.3 Xyn11B-C(E331A)+X6共晶条件的筛选及优化 | 第65-68页 |
| 4.3.4 Xyn11B-C(E331Q)底物共晶的尝试 | 第68-70页 |
| 4.3.5 Xyn11B-C(E331Q)蛋白结晶的底物浸泡结果 | 第70页 |
| 4.4 本章小结 | 第70-71页 |
| 第五章 Xyn11B-C与Xyn11B-C(E331Q)结构的获得和分析 | 第71-82页 |
| 5.1 实验材料 | 第71页 |
| 5.1.1 晶体衍射数据收集所需材料和仪器 | 第71页 |
| 5.2 实验方法 | 第71-76页 |
| 5.2.1 晶体衍射数据的测试和收集 | 第71-73页 |
| 5.2.2 衍射数据的处理 | 第73-74页 |
| 5.2.3 相角的求解 | 第74-75页 |
| 5.2.4 结构模型的建立 | 第75页 |
| 5.2.5 结构模型的修正 | 第75-76页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第76-81页 |
| 5.3.1 Xyn11B-C晶体和Xyn11B-C(E331Q)晶体的衍射数据处理结果 | 第76页 |
| 5.3.2 Xyn11B-C的三维结构 | 第76-80页 |
| 5.3.3 Xyn11B-C(E331Q)的三维结构 | 第80-81页 |
| 5.4 本章小结 | 第81-82页 |
| 总结与展望 | 第82-83页 |
| 附录 | 第83-86页 |
| 参考文献 | 第86-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 攻读硕士期间主要研究成果 | 第93-94页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第94页 |
