摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
文献综述 | 第9-21页 |
第一章 猪瘟病毒及甘油醛-3-磷酸脱氢酶研究进展 | 第9-21页 |
1.1 猪瘟病毒研究进展 | 第9-15页 |
1.1.1 猪瘟概况 | 第9页 |
1.1.2 猪瘟病毒研究进展 | 第9-11页 |
1.1.3 NS5B蛋白研究进展 | 第11-12页 |
1.1.4 猪瘟病毒和宿主细胞相互作用的研究进展 | 第12-15页 |
1.2 GAPDH研究进展 | 第15-21页 |
1.2.1 GAPDH与细胞凋亡 | 第15-16页 |
1.2.2 与GAPDH相互作用的其他蛋白质 | 第16页 |
1.2.3 GAPDH和端粒 | 第16-17页 |
1.2.4 GAPDH和RNA | 第17页 |
1.2.5 GAPDH和病毒感染 | 第17页 |
1.2.6 GAPDH的磷酸化活性 | 第17-18页 |
1.2.7 GAPDH的调节 | 第18-19页 |
1.2.8 GAPDH与神淀粉样蛋白神经退行性疾病 | 第19-20页 |
1.2.9 GAPDH与糖化作用 | 第20-21页 |
试验研究 | 第21-42页 |
第二章 酵母双杂交筛选与NS5B相互作用的宿主蛋白 | 第21-33页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 菌株、细胞和质粒 | 第21页 |
2.1.2 主要试剂 | 第21页 |
2.1.3 仪器设备 | 第21-22页 |
2.2 方法 | 第22-25页 |
2.2.1 载体构建 | 第22-23页 |
2.2.2 互作蛋白的筛选 | 第23-25页 |
2.3 结果 | 第25-31页 |
2.3.1 载体构建及鉴定结果 | 第25-26页 |
2.3.2 酵母菌落PCR鉴定 | 第26页 |
2.3.3 诱饵蛋白对酵母细胞毒性的检测 | 第26-27页 |
2.3.4 诱饵蛋白对酵母细胞自激活性的检测 | 第27-28页 |
2.3.5 阳性克隆筛选结果 | 第28页 |
2.3.6 阳性克隆的PCR鉴定 | 第28-29页 |
2.3.7 测序结果 | 第29-30页 |
2.3.8 酵母回返试验对蛋白互作的验证 | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-32页 |
2.5 小结 | 第32-33页 |
第三章 猪瘟病毒NS5B与宿主蛋白相互作用鉴定 | 第33-42页 |
3.1 材料 | 第33-34页 |
3.1.1 细胞、菌株与质粒 | 第33页 |
3.1.2 主要试剂 | 第33页 |
3.1.3 仪器设备 | 第33-34页 |
3.2 方法 | 第34-36页 |
3.2.1 载体构建 | 第34-35页 |
3.2.2 真核重组质粒的转染与表达结果验证 | 第35页 |
3.2.3 原核重组质粒的表达与表达结果检测 | 第35-36页 |
3.2.4 GST-Pulldown验证NS5B与GAPDH的相互作用 | 第36页 |
3.2.5 激光共聚焦验证NS5B与GAPDH的相互作用 | 第36页 |
3.3 结果 | 第36-40页 |
3.3.1 载体构建及鉴定结果 | 第36-38页 |
3.3.2 真核重组质粒的表达鉴定结果 | 第38页 |
3.3.3 原核重组质粒的表达鉴定结果 | 第38-39页 |
3.3.4 GST-Pulldown验证NS5B与GAPDH相互作用 | 第39-40页 |
3.3.5 激光共聚焦验证NS5B与GAPDH的相互作用 | 第40页 |
3.4 讨论 | 第40-41页 |
3.5 小结 | 第41-42页 |
结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-53页 |
致谢 | 第53-55页 |
个人简介 | 第55-57页 |