| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第16-48页 |
| 1.1 基因治疗简介 | 第16-25页 |
| 1.1.1 基因治疗概述 | 第16-18页 |
| 1.1.2 用于基因治疗的载体 | 第18-22页 |
| 1.1.3 基因治疗中的基因传递途径 | 第22-25页 |
| 1.2 生物材料表面界面介导的基因传递 | 第25-30页 |
| 1.2.1 表面介导的基因传递概述 | 第25-26页 |
| 1.2.2 表面介导基因传递作为基因治疗手段的重要意义 | 第26-30页 |
| 1.3 生物材料表面介导的非病毒基因传递手段 | 第30-44页 |
| 1.3.1 表面介导的非病毒基因载体传递的常规手段 | 第30-35页 |
| 1.3.2 改进表面介导基因传递的新策略 | 第35-44页 |
| 1.4 课题的提出与设计思路 | 第44-48页 |
| 1.4.1 课题的提出 | 第44-46页 |
| 1.4.2 具体设计思路 | 第46-48页 |
| 第二章 多孔膜-水凝胶表面介导的酶敏感选择性刺激响应基因传递 | 第48-67页 |
| 2.1 引言 | 第48-50页 |
| 2.2 实验部分 | 第50-53页 |
| 2.2.1 原料与试剂 | 第50页 |
| 2.2.2 多孔BF膜的制备及表面处理 | 第50页 |
| 2.2.3 含PEI/DNA复合物酶敏感水凝胶的制备与在BF膜表面的负载 | 第50-51页 |
| 2.2.4 MDG水凝胶形成的化学表征 | 第51页 |
| 2.2.5 MDG水凝胶酶响应致DNA释放表征 | 第51-52页 |
| 2.2.6 负载酶敏感水凝胶BF表面的表征 | 第52页 |
| 2.2.7 细胞培养 | 第52页 |
| 2.2.8 BF-MDG表面细胞粘附和生长行为研究 | 第52-53页 |
| 2.2.9 BF-MDG和BF-MNG表面细胞酶响应基因转染 | 第53页 |
| 2.2.10 BF-MDG表面细胞选择性刺激响应基因转染 | 第53页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第53-66页 |
| 2.3.1 酶敏感水凝胶MDG的制备及其表征 | 第53-55页 |
| 2.3.2 MDG的酶敏感降解与DNA释放行为表征 | 第55-57页 |
| 2.3.3 负载酶敏感水凝胶BF-MDG膜的构建及其表征 | 第57-58页 |
| 2.3.4 BF-MDG表面对细胞粘附和生长支持性评价 | 第58-63页 |
| 2.3.5 BF-MDG表面介导的酶敏感响应型细胞基因转染行为研究 | 第63-64页 |
| 2.3.6 BF-MDG表面介导的细胞选择性刺激响应基因转染研究 | 第64-66页 |
| 2.4 本章小结 | 第66-67页 |
| 第三章 光热辅助用于提升表面介导基因传递的转染效率的研究 | 第67-94页 |
| 3.1 引言 | 第67-68页 |
| 3.2 实验部分 | 第68-73页 |
| 3.2.1 原料与试剂 | 第68-69页 |
| 3.2.2 材料表面的PDA-PEI与PDA修饰 | 第69页 |
| 3.2.3 PDA-PEI与PDA表面拓扑形貌与断面厚度表征 | 第69页 |
| 3.2.4 PDA-PEI的表面光热效应表征 | 第69页 |
| 3.2.5 PEI-质粒DNA复合物在PDA-PEI表面的负载 | 第69-70页 |
| 3.2.6 细胞培养 | 第70页 |
| 3.2.7 细胞粘附表征 | 第70页 |
| 3.2.8 光热辅助的表面介导细胞基因转染 | 第70-71页 |
| 3.2.9 近红外光照下pDNA从PDA-PEI表面的释放 | 第71-72页 |
| 3.2.10 近红外光照射PDA-PEI表面导致细胞膜扰动的表征 | 第72页 |
| 3.2.11 细胞活性表征 | 第72-73页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第73-93页 |
| 3.3.1 共沉积PDA-PEI表面性质及其光热行为表征 | 第73-78页 |
| 3.3.2 PDA-PEI表面DNA/PEI复合物的负载 | 第78-79页 |
| 3.3.3 PDA-PEI表面EC粘附行为 | 第79-80页 |
| 3.3.4 PDA-PEI表面对于难转染EC的基因转染行为 | 第80-84页 |
| 3.3.5 PDA-PEI表面对于大尺寸质粒的基因转染行为 | 第84-88页 |
| 3.3.6 光热辅助表面介导基因传递提升细胞转染效率的机理探究 | 第88-93页 |
| 3.4 本章小结 | 第93-94页 |
| 第四章 表面介导的功能基因传递用于抑制心血管支架内再狭窄的研究 | 第94-115页 |
| 4.1 引言 | 第94-95页 |
| 4.2 实验部分 | 第95-101页 |
| 4.2.1 原料与试剂 | 第95-96页 |
| 4.2.2 (PrS/pDNA)多层膜的制备和表征 | 第96-97页 |
| 4.2.3 NIH/3T3细胞的培养 | 第97页 |
| 4.2.4 表面介导的细胞转染与TGF-β1分泌检测 | 第97页 |
| 4.2.5 细胞ECM分泌的免疫荧光表征 | 第97-98页 |
| 4.2.6 基因涂层修饰支架的动物体支架植入实验 | 第98页 |
| 4.2.7 支架植入后动物血管组织基因表达和蛋白分泌表征 | 第98-100页 |
| 4.2.8 支架植入后动物血管组织学分析和免疫组化分析 | 第100-101页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第101-114页 |
| 4.3.1 心血管支架内再狭窄问题及表面介导基因传递体系的设计 | 第101-103页 |
| 4.3.2 (PrS/pDNA)多层膜的组装及性质表征 | 第103-105页 |
| 4.3.3 (PrS/pDNA)_(12)的体外细胞转染及其对细胞ECM分泌和增殖的调控 | 第105-108页 |
| 4.3.4 (PrS/pDNA)_(12)体内实验7天时组织转染和基因表达水平表征 | 第108-111页 |
| 4.3.5 (PrS/pDNA)_(12)体内实验28天时组织学分析和免疫组化分析表征 | 第111-114页 |
| 4.4 本章小结 | 第114-115页 |
| 第五章 全文主要结论、创新和展望 | 第115-118页 |
| 参考文献 | 第118-139页 |
| 附录Ⅰ 细胞免疫荧光染色实验步骤 | 第139-140页 |
| 作者简介 | 第140-143页 |
