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红麻CMS系和保持系能量代谢相关基因的克隆、表达及RNAi载体构建

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
縮略词表第8-11页
1. 前言第11-20页
    1.1 植物细胞质雄性不育的研究进展第11-13页
    1.2 红麻生产应用第13-14页
    1.3 红麻CMS机理研究进展第14-16页
    1.4 差异表达基因的研究技术第16-17页
    1.5 能量代谢与雄性不育第17页
    1.6 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)基因研究进展第17-18页
    1.7 乙醇脱氢酶(ADH)基因研究进展第18-19页
    1.8 研究目的和意义第19-20页
2. 红麻能量代谢差异基因6-PGDH和ADH1的克隆和表达分析第20-49页
    2.1 材料与方法第20-21页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 主要仪器和试剂第20-21页
    2.2 实验方法第21-29页
        2.2.1 红麻DNA提取第21页
        2.2.2 红麻RNA提取第21-23页
        2.2.3 红麻能量代谢差异基因6-PGDH和ADH1的克隆第23-27页
        2.2.4 能量代谢差异表达6-PGDH和ADH1基因的半定量RT-PCR第27-29页
    2.2 结果与分析第29-46页
        2.2.1 红麻总DNA和总RNA的提取第29-30页
        2.2.2 检测反转录的cDNA是否混有总DNA第30-31页
        2.2.3 6-PGDH基因克隆与分析第31-37页
        2.2.4 ADH1基因全长克隆与分析第37-44页
        2.2.5 红麻6-PGDH和ADH1基因半定量RT-PCR分析第44-46页
    2.3 讨论第46-49页
        2.3.1 红麻核酸提取第46-47页
        2.3.2 红麻能量代谢差异表达基因6-PGDH和ADH1的克隆第47页
        2.3.3 红麻能量代谢差异表达基因6-PGDH和ADH1的半定量分析第47-49页
3. 红麻6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)基因RNA干扰载体构建第49-60页
    3.1 材料与方法第50-56页
        3.1.1. 植物材料第50页
        3.1.2 菌株与质粒第50-52页
        3.1.3 主要试剂和酶第52页
        3.1.4 质粒提取方法(碱裂法少量制备)第52-53页
        3.1.5 红麻6-PGDH基因RNA干扰载体构建第53-56页
    3.2 结果分析第56-59页
        3.2.1 干扰片段的扩增和克隆第56-57页
        3.2.2 中间载体pKANNIBAL-R1+2的酶切鉴定第57-58页
        3.2.3 干扰载体PART27-pKANNIBAL-R1+2的酶切鉴定第58-59页
    3.3 讨论第59-60页
4. 全文结论和创新点第60-61页
    4.1 全文结论第60页
    4.2 创新点第60-61页
5. 问题与展望第61-62页
参考文献第62-68页
附录第68-69页
致谢第69-70页
攻读学位期间发表论文情况第70页

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