摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
縮略词表 | 第8-11页 |
1. 前言 | 第11-20页 |
1.1 植物细胞质雄性不育的研究进展 | 第11-13页 |
1.2 红麻生产应用 | 第13-14页 |
1.3 红麻CMS机理研究进展 | 第14-16页 |
1.4 差异表达基因的研究技术 | 第16-17页 |
1.5 能量代谢与雄性不育 | 第17页 |
1.6 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)基因研究进展 | 第17-18页 |
1.7 乙醇脱氢酶(ADH)基因研究进展 | 第18-19页 |
1.8 研究目的和意义 | 第19-20页 |
2. 红麻能量代谢差异基因6-PGDH和ADH1的克隆和表达分析 | 第20-49页 |
2.1 材料与方法 | 第20-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 主要仪器和试剂 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-29页 |
2.2.1 红麻DNA提取 | 第21页 |
2.2.2 红麻RNA提取 | 第21-23页 |
2.2.3 红麻能量代谢差异基因6-PGDH和ADH1的克隆 | 第23-27页 |
2.2.4 能量代谢差异表达6-PGDH和ADH1基因的半定量RT-PCR | 第27-29页 |
2.2 结果与分析 | 第29-46页 |
2.2.1 红麻总DNA和总RNA的提取 | 第29-30页 |
2.2.2 检测反转录的cDNA是否混有总DNA | 第30-31页 |
2.2.3 6-PGDH基因克隆与分析 | 第31-37页 |
2.2.4 ADH1基因全长克隆与分析 | 第37-44页 |
2.2.5 红麻6-PGDH和ADH1基因半定量RT-PCR分析 | 第44-46页 |
2.3 讨论 | 第46-49页 |
2.3.1 红麻核酸提取 | 第46-47页 |
2.3.2 红麻能量代谢差异表达基因6-PGDH和ADH1的克隆 | 第47页 |
2.3.3 红麻能量代谢差异表达基因6-PGDH和ADH1的半定量分析 | 第47-49页 |
3. 红麻6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)基因RNA干扰载体构建 | 第49-60页 |
3.1 材料与方法 | 第50-56页 |
3.1.1. 植物材料 | 第50页 |
3.1.2 菌株与质粒 | 第50-52页 |
3.1.3 主要试剂和酶 | 第52页 |
3.1.4 质粒提取方法(碱裂法少量制备) | 第52-53页 |
3.1.5 红麻6-PGDH基因RNA干扰载体构建 | 第53-56页 |
3.2 结果分析 | 第56-59页 |
3.2.1 干扰片段的扩增和克隆 | 第56-57页 |
3.2.2 中间载体pKANNIBAL-R1+2的酶切鉴定 | 第57-58页 |
3.2.3 干扰载体PART27-pKANNIBAL-R1+2的酶切鉴定 | 第58-59页 |
3.3 讨论 | 第59-60页 |
4. 全文结论和创新点 | 第60-61页 |
4.1 全文结论 | 第60页 |
4.2 创新点 | 第60-61页 |
5. 问题与展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
附录 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第70页 |