| 中文摘要 | 第3-4页 |
| 英文摘要 | 第4页 |
| 第一部分 研究背景 | 第8-30页 |
| 一、生物体衰老的标志和特征 | 第8-10页 |
| (一)衰老的特征 | 第8-9页 |
| (二)衰老与疾病的关系 | 第9页 |
| (三)衰老与氧压力的关系 | 第9-10页 |
| 二、秀丽隐杆线虫是衰老研究的经典模式生物 | 第10-12页 |
| (一)秀丽隐杆线虫的生活周期 | 第10-11页 |
| (二)秀丽隐杆线虫作为模式生物的优势 | 第11页 |
| (三)秀丽隐杆线虫RNAi技术 | 第11-12页 |
| 三、秀丽隐杆线虫调控寿命的信号通路 | 第12-19页 |
| (一)Insulin／IGF-1(IIS)信号通路 | 第12-17页 |
| (二)进食限制信号通路 | 第17页 |
| (三)线粒体呼吸链／ATP合成体系信号通路 | 第17-18页 |
| (四)生殖系统调控的信号通路 | 第18-19页 |
| 四、组蛋白赖氨酸甲基化对生物体寿命调控的重要作用 | 第19-25页 |
| (一)H3K4me2/me3修饰对寿命的调控作用 | 第21-22页 |
| (二)H3K27me2/me3修饰对寿命的调控作用 | 第22-23页 |
| (三)H3K9me2/me3修饰对寿命的调控作用 | 第23-24页 |
| (四)H3K36me3修饰对寿命的调控作用 | 第24-25页 |
| 五、SET-18人类同源物SMYD家族的研究进展 | 第25-28页 |
| (一)SMYD1催化的组蛋白甲基化修饰及生理功能 | 第26页 |
| (二)SMYD2催化的组蛋白甲基化修饰及生理功能 | 第26-27页 |
| (三)SMYD3催化的组蛋白甲基化修饰及生理功能 | 第27-28页 |
| 六、本论文的研究内容 | 第28-30页 |
| (一)立题依据 | 第28-29页 |
| (二)本文的研究内容 | 第29-30页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第30-50页 |
| 一、实验材料 | 第30-32页 |
| (一)本实验用到的秀丽隐杆线虫品系 | 第30页 |
| (二)本实验用到的细菌菌株 | 第30页 |
| (三)试剂 | 第30-31页 |
| (四)主要仪器 | 第31-32页 |
| (五)抗体 | 第32页 |
| 二、实验方法 | 第32-49页 |
| (一)基本母液及试剂配制 | 第32-34页 |
| (二)线虫的培养方法 | 第34-35页 |
| (三)检测线虫寿命的方法 | 第35页 |
| (四)单线虫进行PCR扩增基因组DNA的方法 | 第35-36页 |
| (五)秀丽线虫突变体正交交叉法杂交实验 | 第36-37页 |
| (六)检测DAF-16::GFP荧光的方法 | 第37页 |
| (七)SKN-1::GFP的细胞定位分析 | 第37-38页 |
| (八)线虫RNA提取 | 第38-39页 |
| (九)RT-PCR和RealtimePCR | 第39-41页 |
| (十)WesternBlot实验 | 第41-42页 |
| (十一)GST-SET-18融合蛋白诱导纯化 | 第42-44页 |
| (十二)体外3H同位素标记实验 | 第44-45页 |
| (十三)染色质免疫共沉淀 | 第45-49页 |
| 三、统计分析 | 第49-50页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第50-74页 |
| 1.SET-18随着线虫衰老进程表达上调 | 第50页 |
| 2.SET-18RNAI,线虫的寿命比对照组延长 | 第50-52页 |
| 3.SET-18在线虫的肌肉中表达 | 第52-54页 |
| 4.SET-18参与了线虫的寿命和抗氧化能力调控 | 第54-55页 |
| 5.SET-18依赖胰岛素/IGF-1样通路和DAF-16的活性调节寿命 | 第55-57页 |
| 6.SET-18是一种新型组蛋白H3K36二甲基转移酶 | 第57-62页 |
| 7.SET-18抑制DAF-16表达 | 第62-66页 |
| 8.SET-18通过H3K36ME2修饰负调控DAF-16A表达 | 第66-70页 |
| 9.SET-18的肌肉特异性表达在衰老阶段被激活,导致整体H3K36ME2水平的增加和DAF-16A表达的降低 | 第70-74页 |
| 第四部分 讨论 | 第74-78页 |
| 1.秀丽隐杆线虫SET-18参与了H3K36ME2修饰,而不参与H3K36ME3修饰 | 第74-75页 |
| 2.DAF-16A被鉴定为SET-18的靶基因,其转录调控对寿命有重要影响 | 第75页 |
| 3.SET-18缺失导致肌肉中DAF-16A表达上调,肌肉中上调DAF-16A,可能通过肠特异性因子促进肠中DAF-16的活性 | 第75-76页 |
| 4.肌肉特异性表达SET-18介导的H3K36ME2修饰增强可能是促进衰老的一个新因素 | 第76-78页 |
| 主要结论和创新点 | 第78-79页 |
| 一、主要结论 | 第78页 |
| 二、创新点 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-91页 |
| 附录一 | 第91-92页 |
| 附录二 | 第92-95页 |
| 附录三 | 第95-97页 |
| 附录四 | 第97-98页 |
| 附录五 | 第98-99页 |
| 附录六 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第103页 |
