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苹果MdMYB2基因的克隆及功能鉴定

符号说明第4-9页
中文摘要第9-11页
英文摘要第11-12页
1 前言第13-20页
    1.1 非生物胁迫对植物的影响第13-15页
        1.1.1 干旱胁迫对植物的影响第13页
        1.1.2 盐胁迫对植物的影响第13-15页
    1.2 植物的非生物胁迫响应第15-17页
        1.2.1 植物抵御非生物胁迫的功能基因第15-16页
            1.2.1.1 渗透调节物质合成相关基因第15页
            1.2.1.2 编码抗逆蛋白相关基因第15-16页
        1.2.2 植物抵御非生物胁迫的转录因子第16-17页
            1.2.2.1 NAC转录因子第16页
            1.2.2.2 WRKY转录因子第16-17页
            1.2.2.3 DREB转录因子第17页
    1.3 ABA信号的功能第17-18页
        1.3.1 调控植物响应非生物胁迫第17页
        1.3.2 调节种子的休眠和萌发第17页
        1.3.3 调节植物衰老第17-18页
        1.3.4 调节气孔运动第18页
        1.3.5 调节根系构型第18页
    1.4 植物中MYB转录因子研究进展第18-19页
        1.4.1 MYB转录因子的结构和分类第18页
        1.4.2 MYB转录因子的功能第18-19页
    1.5 本研究的目的和意义第19-20页
2 材料和方法第20-35页
    2.1 材料第20-21页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 菌株第20页
        2.1.3 载体第20页
        2.1.4 酶第20页
        2.1.5 引物及测序第20页
        2.1.6 试剂盒第20-21页
        2.1.7 其他试剂和药品第21页
        2.1.8 实验仪器第21页
    2.2 实验方法第21-35页
        2.2.1 植物组织总RNA提取第21-24页
        2.2.2 RNA含量与纯度检测第24页
        2.2.3 植物RNA纯化(除DNA)的方法第24页
        2.2.4 配置第一链cDNA合成的反应液第24页
        2.2.5 cDNA模板的合成第24-25页
        2.2.6 基因扩增第25-26页
        2.2.7 回收纯化DNA第26页
        2.2.8 连接克隆载体第26-27页
        2.2.9 大肠杆菌的转化第27页
        2.2.10 测序第27页
        2.2.11 质粒DNA的提取第27-28页
        2.2.12 双酶切反应第28-29页
        2.2.13 表达载体的构建第29-30页
        2.2.14 农杆菌感受态细胞的转化第30页
        2.2.15 植物材料的种植及转化第30-33页
        2.2.16 植物基因组DNA的提取第33-34页
        2.2.17 组织含水量的测定第34页
        2.2.18 生物信息学分析方法第34-35页
3 结果与分析第35-51页
    3.1 苹果MdMYB2基因的分子克隆及序列分析第35-37页
        3.1.1 MdMYB2基因的分子克隆第35页
        3.1.2 MdMYB2与其他物种中MYB2蛋白的进化树分析和氨基酸序列比对第35-37页
    3.2 MdMYB2基因的表达分析第37-38页
        3.2.1 MdMYB2基因在不同苹果组织和器官中的表达第37页
        3.2.2 MdMYB2的启动子顺式作用元件分析第37-38页
    3.3 非生物胁迫和外源激素影响MdMYB2基因的表达第38-39页
    3.4 MdMYB2过量表达提高苹果愈伤组织对非生物胁迫的抗性第39-42页
        3.4.1 转基因苹果愈伤组织的筛选与鉴定第39-40页
        3.4.2 MdMYB2过量表达提高苹果愈伤组织对盐胁迫的抗性第40-41页
        3.4.3 MdMYB2过量表达提高苹果愈伤组织对渗透胁迫的抗性第41-42页
    3.5 MdMYB2过量表达转基因苹果愈伤组织对ABA更敏感第42-43页
    3.6 异位表达MdMYB2提高拟南芥对非生物胁迫的抗性第43-49页
        3.6.1 异位表达MdMYB2的转基因拟南芥的筛选与鉴定第43-44页
        3.6.2 异位表达MdMYB2提高拟南芥幼苗对盐和渗透胁迫的抗性第44-46页
        3.6.3 异位表达MdMYB2提高拟南芥幼苗对PEG的抵抗能力第46-48页
        3.6.4 异位表达MdMYB2提高拟南芥成苗对干旱胁迫的抗性第48-49页
    3.7 异位表达MdMYB2转基因拟南芥幼苗对ABA更敏感第49-51页
4 讨论第51-54页
    4.1 MdMYB2响应多种非生物胁迫第51-52页
    4.2 MdMYB2过量表达提高植株对ABA的敏感程度第52-54页
5 结论第54-55页
6 参考文献第55-64页
7 附录第64-66页
8 致谢第66-67页
9 攻读学位期间发表论文情况第67页

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