摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第9-23页 |
第一节 蛋白质磷酸化与去磷酸化 | 第9页 |
第二节 蛋白激酶和蛋白磷酸酶 | 第9-11页 |
第三节 蛋白磷酸酶1(PP1) | 第11-21页 |
一、蛋白磷酸酶1的结构 | 第12-15页 |
二、酶学特性和催化机制 | 第15-16页 |
三、活性调节与功能 | 第16-21页 |
第四节 本课题研究背景 | 第21-23页 |
第二章 实验材料与方法 | 第23-43页 |
第一节 实验材料 | 第23-25页 |
一、实验材料 | 第23-24页 |
二、实验仪器 | 第24-25页 |
第二节 实验方法 | 第25-43页 |
一、人肺腺癌细胞(H1299)的培养 | 第25页 |
二、H1299-pCI-neo和H1299-pCI-PP1α稳定细胞系的建立 | 第25-30页 |
三、H1299-pLKO.1和H1299-pLKO.1-PP1α稳定细胞系的建立 | 第30-32页 |
四、Western blot分析与鉴定 | 第32-37页 |
五、RT-PCR分析与鉴定 | 第37-40页 |
六、细胞增殖实验 | 第40页 |
七、裸鼠荷瘤实验 | 第40-43页 |
第三章 实验结果和讨论 | 第43-55页 |
第一节 实验结果 | 第43-52页 |
一、在H1299细胞中过表达PPlα对PP1γ表达的影响 | 第43-44页 |
二、在H1299细胞中靶向沉默PPlα对PPlγ表达的影响 | 第44-45页 |
三、mRNA水平PP1α和PP1γ的表达关系 | 第45-47页 |
四、过表达PP1α对H1299细胞增殖的影响 | 第47-49页 |
五、过表达PP1α对H1299细胞致瘤性的影响 | 第49-50页 |
六、过表达和靶向沉默PP1α对周期蛋白表达的影响 | 第50-52页 |
第二节 讨论 | 第52-55页 |
一、H1299细胞中PP1α与PP1γ表达水平的相互制约关系 | 第52-53页 |
二、H1299细胞中PP1α抑瘤作用的可能分子机制 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附录 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-64页 |