| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| ·基因沉默 | 第10-11页 |
| ·Argonaute 蛋白 | 第11-13页 |
| ·RNAi 技术概述 | 第13-15页 |
| ·RNAi 的作用机制 | 第14-15页 |
| ·RNAi 载体 | 第15-17页 |
| ·hpRNA 载体 | 第15-16页 |
| ·发夹结构 | 第16-17页 |
| ·启动子的结构及功能 | 第17页 |
| ·转录终止子 | 第17页 |
| ·RNAi 在家蚕研究中的应用 | 第17-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-34页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·所用实验材料 | 第20页 |
| ·试剂及仪器 | 第20-22页 |
| ·引物 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-29页 |
| ·质粒 DNA 的小量制备 | 第22-23页 |
| ·家蚕总 RNA 提取方法 | 第23-24页 |
| ·家蚕基因组提取方法 | 第24页 |
| ·家蚕 BmN 细胞总 RNA 的提取方法 | 第24-25页 |
| ·反转录体系 | 第25页 |
| ·PCR 反应、酶切和酶连 | 第25-28页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第28-29页 |
| ·家蚕 BmN 细胞培养及细胞转染技术 | 第29-32页 |
| ·细胞培养基的配制 | 第29页 |
| ·细胞传代培养 | 第29-31页 |
| ·细胞的冻存和复苏 | 第31-32页 |
| ·细胞转染技术（脂质体转染） | 第32页 |
| ·实验常用溶液、试剂配方 | 第32-34页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·抗生素和培养基 | 第32-34页 |
| 3 结果和分析 | 第34-42页 |
| ·RNAi 载体的构建结果 | 第34-39页 |
| ·相关片段克隆 | 第34-35页 |
| ·各片段 T 载体连接 | 第35页 |
| ·重组质粒 pFBDM-1、pFBDM-2 及 pBac[A3-EGFPafm]-1 构建 | 第35-39页 |
| ·AGO1 和 AGO2 基因干涉效果 | 第39-42页 |
| ·细胞转染 | 第39-40页 |
| ·荧光定量 PCR 检测基因 AGO1 和 AGO2 表达量变化 | 第40-42页 |
| 4 结论 | 第42-44页 |
| 5 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |