| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1 转基因作物的发展背景 | 第13-16页 |
| 1.1 转基因作物的发展历程 | 第13-14页 |
| 1.2 转基因作物出现的必要性 | 第14-15页 |
| 1.3 转基因作物的研究现状 | 第15-16页 |
| 2 转基因作物的环境安全性研究进展 | 第16-19页 |
| 2.1 转基因作物安全性问题的提出 | 第16-17页 |
| 2.1.1 巴西坚果事件 | 第16页 |
| 2.1.2 转Bt基因玉米花粉喂养斑蝶事件 | 第16页 |
| 2.1.3 转基因抗豌豆象甲虫豌豆事件 | 第16-17页 |
| 2.2 转基因作物安全的潜在风险 | 第17-18页 |
| 2.2.1 转基因作物的杂草化 | 第17页 |
| 2.2.2 转基因作物基因漂流 | 第17页 |
| 2.2.3 对遗传多样性的影响 | 第17页 |
| 2.2.4 对靶标、非靶标生物多样性的影响 | 第17-18页 |
| 2.2.5 对土壤生态系统的影响 | 第18页 |
| 2.2.6 食品引入过敏性蛋白质或者毒性物质 | 第18页 |
| 2.3 转基因作物生物安全性评价的必要性 | 第18-19页 |
| 3 转WYMV-Nib8基因小麦的抗病毒机制 | 第19-20页 |
| 4 本文研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 5 研究内容 | 第21-23页 |
| 第二章 转基因小麦对土壤微生物数量的影响 | 第23-43页 |
| 1 材料与方法 | 第23-30页 |
| 1.1 供试材料与试验设计 | 第23-24页 |
| 1.2 小麦根际土壤采集 | 第24页 |
| 1.3 小麦根际土壤样品预处理 | 第24页 |
| 1.4 主要试剂与仪器 | 第24-25页 |
| 1.4.1 试剂 | 第24页 |
| 1.4.2 仪器 | 第24-25页 |
| 1.5 试验方法 | 第25-30页 |
| 1.5.1 土壤微生物总DNA的提取 | 第25-26页 |
| 1.5.2 小麦根际土壤含水量测定 | 第26页 |
| 1.5.3 PCR技术 | 第26-27页 |
| 1.5.4 土壤总DNA和PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| 1.5.5 琼脂糖凝胶切胶回收 | 第27-28页 |
| 1.5.6 DNA克隆技术 | 第28页 |
| 1.5.7 标准质粒的提取 | 第28-29页 |
| 1.5.8 Real-time qPCR体系的建立 | 第29-30页 |
| 1.5.9 丛枝菌根的实时荧光定量PCR灵敏度检测 | 第30页 |
| 1.5.10 数据分析 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-40页 |
| 2.1 土壤微生物总DNA电泳结果 | 第30-31页 |
| 2.2 小麦根际土壤含水量测定结果 | 第31-32页 |
| 2.3 丛枝菌根Real-time qPCR体系的建立 | 第32-34页 |
| 2.3.1 丛枝菌根Real-time qPCR灵敏度检测 | 第32页 |
| 2.3.2 丛枝菌根Real-time qPCR标准曲线的建立 | 第32-34页 |
| 2.3.3 小麦N12-1根际土壤中丛枝菌根的Real-time qPCR检测结果 | 第34页 |
| 2.4 转基因小麦N12-1对根际土壤中镰刀菌数量的影响 | 第34-36页 |
| 2.4.1 镰刀菌Real-time qPCR体系的建立 | 第34-36页 |
| 2.4.2 小麦N12-1根际土壤中镰刀菌的Real-time qPCR检测结果 | 第36页 |
| 2.5 转基因小麦N12-1对根际土壤中荧光假单胞菌数量的影响 | 第36-38页 |
| 2.5.1 荧光假单胞菌Real-time qPCR体系的建立 | 第36-38页 |
| 2.5.2 小麦N12-1根际土壤中荧光假单胞菌的Real-time qPCR检测结果 | 第38页 |
| 2.6 转基因小麦N12-1对根际土壤中禾谷多黏菌数量的影响 | 第38-40页 |
| 2.6.1 禾谷多黏菌Real-time qPCR体系的建立 | 第38-40页 |
| 2.6.2 小麦N12-1根际土壤中禾谷多黏菌的Real-time qPCR检测结果 | 第40页 |
| 3 讨论 | 第40-43页 |
| 第三章 转基因小麦对土壤微生物多样性的影响 | 第43-61页 |
| 1 材料与方法 | 第43-47页 |
| 1.1 供试材料与试验设计、小麦根际土壤采集与样品预处理 | 第43页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第43-44页 |
| 1.2.1 仪器 | 第43页 |
| 1.2.2 主要试剂 | 第43-44页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第44页 |
| 1.4 试验方法 | 第44-47页 |
| 1.4.1 土壤微生物总DNA的提取 | 第44页 |
| 1.4.2 PCR扩增 | 第44-45页 |
| 1.4.3 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第45页 |
| 1.4.4 PCR产物纯化 | 第45-46页 |
| 1.4.5 DGGE检测 | 第46页 |
| 1.4.6 DGGE真菌图谱的回收与测序 | 第46-47页 |
| 1.4.7 数据分析 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-59页 |
| 2.1 转WYMV-Nib8基因小麦N12-1对土壤真菌群落多样性的影响 | 第47-51页 |
| 2.1.1 DGGE真菌指纹图谱多样性指数、均匀度指数 | 第48-50页 |
| 2.1.2 DGGE真菌指纹图谱主成分分析 | 第50-51页 |
| 2.2 转WYMV-Nib8基因小麦N12-1对土壤细菌群落多样性的影响 | 第51-54页 |
| 2.2.1 DGGE细菌指纹图谱多样性指数、均匀度指数 | 第52-53页 |
| 2.2.2 DGGE细菌指纹图谱主成分分析 | 第53-54页 |
| 2.3 系统发育分析 | 第54-59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 转基因小麦对土壤酶活的影响 | 第61-69页 |
| 1 材料与方法 | 第61-65页 |
| 1.1 供试材料与试验设计、小麦根际土壤采集与样品预处理 | 第61-62页 |
| 1.2 仪器和设备 | 第62页 |
| 1.3 主要试剂和溶液配制 | 第62-63页 |
| 1.3.1 脲酶 | 第62页 |
| 1.3.2 蔗糖酶 | 第62-63页 |
| 1.3.3 脱氢酶 | 第63页 |
| 1.4 试验方法 | 第63-65页 |
| 1.4.1 小麦根际土壤脲酶活性测定 | 第63页 |
| 1.4.2 小麦根际土壤蔗糖酶活性测定 | 第63-64页 |
| 1.4.3 小麦根际土壤脱氢酶活性测定 | 第64-65页 |
| 1.5 数据分析 | 第65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-67页 |
| 2.1 小麦根际土壤脲酶活性测定结果 | 第65-66页 |
| 2.2 小麦根际土壤蔗糖酶活性测定结果 | 第66页 |
| 2.3 小麦根际土壤脱氢酶活性测定结果 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 全文总结 | 第69-71页 |
| 创新点 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
