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牛蒡子苷元抗肝纤维化作用及抑制肝星状细胞增殖的分子机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩略词表第12-14页
1 引言第14-18页
2 牛蒡子苷元对四氯化碳致肝纤维化大鼠的治疗作用第18-38页
    2.1 实验材料第19-23页
        2.1.1 实验动物第19页
        2.1.2 主要试剂第19-20页
        2.1.3 一抗来源第20页
        2.1.4 主要仪器第20-21页
        2.1.5 主要试剂配制第21-23页
    2.2 实验方法第23-26页
        2.2.1 大鼠肝纤维化模型制备、分组及给药第23页
        2.2.2 大鼠体重、肝重以及脾脏的测量第23页
        2.2.3 生化指标检测第23页
        2.2.4 组织病理学检查第23-24页
        2.2.5 放射免疫分析第24页
        2.2.6 免疫组化化学第24-25页
        2.2.7 组织免疫荧光第25页
        2.2.8 免疫印迹分析第25-26页
        2.2.9 统计学分析第26页
    2.3 实验结果第26-35页
        2.3.1 肝纤维化大鼠行为学及肝脏形态改变结果第26-27页
        2.3.2 ATG对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠体重、肝脏指数、脾脏指数的影响第27页
        2.3.3ATG对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠血清肝功能指标的影响第27-28页
        2.3.4 ATG对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠肝脏病理组织学的影响第28-30页
        2.3.5 ATG对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量和血清中肝纤维化标志物水平的影响第30-31页
        2.3.6 ATG对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠纤维化相关蛋白的影响第31-33页
        2.3.7 ATG对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠肝星状细胞增殖能力的影响第33页
        2.3.8 ATG对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠细胞周期相关调控蛋白的影响第33-35页
    2.4 讨论第35-38页
3 牛蒡子苷元抑制PDGF-BB刺激的肝星状细胞增殖分子机制研究第38-72页
    3.1 实验材料第39-41页
        3.1.1 细胞株第39页
        3.1.2 主要试剂第39-40页
        3.1.3 一抗来源第40页
        3.1.4 主要仪器第40-41页
        3.1.5 主要试剂配制第41页
    3.2 实验方法第41-46页
        3.2.1 细胞培养第41-42页
        3.2.2 细胞增殖试验第42页
        3.2.3 乳酸脱氢酶(LDH)释放实验第42页
        3.2.4 流式细胞术第42-43页
        3.2.5 RNA干扰第43页
        3.2.6 细胞总蛋白提取第43页
        3.2.7 胞浆和胞核蛋白的分别提取第43-44页
        3.2.8 免疫印迹分析第44页
        3.2.9 免疫共沉淀实验第44-45页
        3.2.10 CDK激酶活性的检测第45页
        3.2.11 免疫细胞化学法第45-46页
        3.2.12 统计学分析第46页
    3.3 实验结果第46-68页
        3.3.1 ATG对肝细胞和PDGF介导的HSCs毒性和细胞增殖的影响第46-47页
        3.3.2 ATG对活化的HSCs细胞周期的影响第47-48页
        3.3.3 ATG对活化的HSCs G_1期细胞周期相关蛋白表达的影响第48-50页
        3.3.4 ATG对活化的HSCs CDK2和CDK4/6 蛋白激酶活性的影响第50-51页
        3.3.5 ATG对活化的HSCs CDK2-p27~(kip1)、CDK4/6-p21~(cip1)胞内复合物形成的影响第51-52页
        3.3.6 p27~(kip1)在ATG诱导的HSCs G0/G_1期阻滞和增殖抑制中的关键作用第52-55页
        3.3.7 ATG对HSCs的周期阻滞作用依赖于PDGF信号传递第55页
        3.3.8 胞内PI3K/Akt信号调控ATG诱导的p27~(kip1)蛋白表达第55-59页
        3.3.9 ATG对活化的FOXOs家族活性水平的影响第59-64页
        3.3.10 ATG通过抑制PI3K/Akt信号通路而激活FOXO3a第64-66页
        3.3.11 沉默FOXO3a基因对ATG诱导活化的HSCs表达p27~(kip1)蛋白水平的影响第66-68页
    3.4 讨论第68-72页
4 全文总结第72-74页
致谢第74-76页
参考文献第76-82页
附图第82-86页
个人简历、在校期间发表的学术论文及取得的研究成果第86-87页

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