| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 注释说明清单 | 第15-16页 |
| 引言 | 第16-18页 |
| 1 HRM分析技术在登革热病毒分型中的研究和应用 | 第18-41页 |
| 1.1 前言 | 第18-19页 |
| 1.2 材料与方法 | 第19-23页 |
| 1.2.1 细胞株 | 第19页 |
| 1.2.2 病毒株 | 第19页 |
| 1.2.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 1.2.4 主要试剂 | 第20-21页 |
| 1.2.5 主要溶液的配制 | 第21-22页 |
| 1.2.6 引物设计与合成 | 第22-23页 |
| 1.3 实验方法 | 第23-29页 |
| 1.3.1 细胞培养 | 第23页 |
| 1.3.2 病毒培养 | 第23页 |
| 1.3.3 病毒RNA提取 | 第23-24页 |
| 1.3.4 RNA质量检测 | 第24页 |
| 1.3.5 cDNA合成 | 第24-25页 |
| 1.3.6 特异性试验 | 第25页 |
| 1.3.7 PCR扩增及HRM分析 | 第25-26页 |
| 1.3.8 灵敏度试验 | 第26页 |
| 1.3.9 测序验证 | 第26-27页 |
| 1.3.10 荧光PCR验证 | 第27-28页 |
| 1.3.11 普通PCR验证 | 第28-29页 |
| 1.4 实验结果 | 第29-37页 |
| 1.4.1 正常C6/36细胞 | 第29页 |
| 1.4.2 病毒在C6/36细胞中增殖 | 第29-30页 |
| 1.4.3 病毒RNA提取结果 | 第30页 |
| 1.4.4 引物特异性 | 第30-31页 |
| 1.4.5 PCR-HRM分析结果 | 第31-32页 |
| 1.4.6 PCR-HRM灵敏度 | 第32-33页 |
| 1.4.7 临床样本检测结果 | 第33-34页 |
| 1.4.8 测序结果 | 第34-35页 |
| 1.4.9 荧光PCR结果 | 第35-36页 |
| 1.4.10 普通PCR结果 | 第36-37页 |
| 1.5 讨论 | 第37-41页 |
| 2 登革热患者体内细胞因子mRNA表达水平及意义 | 第41-56页 |
| 2.1 前言 | 第41页 |
| 2.2 材料与方法 | 第41-46页 |
| 2.2.1 病例筛选 | 第41页 |
| 2.2.2 健康对照 | 第41页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第41-42页 |
| 2.2.4 主要试剂 | 第42-43页 |
| 2.2.5 主要溶液的配制 | 第43-44页 |
| 2.2.6 引物设计与合成 | 第44页 |
| 2.2.7 比较CT值法(2~(-ΔΔCT))公式推导 | 第44-46页 |
| 2.3 实验方法 | 第46-49页 |
| 2.3.1 总RNA提取 | 第46-47页 |
| 2.3.2 RNA质量检测 | 第47页 |
| 2.3.3 cDNA合成 | 第47-48页 |
| 2.3.4 标准曲线制备 | 第48页 |
| 2.3.5 RT-PCR检测mRNA表达水平 | 第48-49页 |
| 2.3.6 统计学分析 | 第49页 |
| 2.4 实验结果 | 第49-54页 |
| 2.4.1 总RNA提取结果 | 第49页 |
| 2.4.2 标准曲线制备结果 | 第49-50页 |
| 2.4.3 RT-PCR检测结果 | 第50-52页 |
| 2.4.4 数据分析 | 第52-54页 |
| 2.5 讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录A 双脱氧终止法测序结果 | 第62-66页 |
| 后记或致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介及读研期间主要科研成果 | 第67页 |