| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| 1.1 原核表达系统 | 第9-15页 |
| 1.1.1 表达载体 | 第9-12页 |
| 1.1.2 目的蛋白在细胞中的定位 | 第12页 |
| 1.1.3 目的蛋白在细胞中的表达形式 | 第12-14页 |
| 1.1.4 重组蛋白的纯化 | 第14-15页 |
| 1.1.5 原核表达系统的特点 | 第15页 |
| 1.2 MYB2转录因子 | 第15-17页 |
| 1.2.1 MYB2蛋白的结构 | 第15-16页 |
| 1.2.2 MYB2转录因子的识别位点 | 第16页 |
| 1.2.3 MYB2转录因子的功能 | 第16-17页 |
| 1.3 CMO启动子 | 第17页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第17-19页 |
| 2 AtMYB2蛋白的原核表达 | 第19-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 质粒和菌株 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 PCR引物 | 第19页 |
| 2.1.4 培养基 | 第19页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-29页 |
| 2.2.1 AtMYB2原核表达载体的构建 | 第20-24页 |
| 2.2.2 工程菌的构建 | 第24-25页 |
| 2.2.3 融合蛋白的诱导表达 | 第25页 |
| 2.2.4 表达蛋白的分离与检测 | 第25-27页 |
| 2.2.5 AtMYB2可溶蛋白表达条件优化 | 第27-28页 |
| 2.2.6 AtMYB2可溶蛋白的纯化 | 第28-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-39页 |
| 2.3.1 AtMYB2原核表达载体的构建 | 第29-32页 |
| 2.3.2 工程菌的构建 | 第32-33页 |
| 2.3.3 AtMYB2蛋白的表达及表达形式分析 | 第33-34页 |
| 2.3.4 AtMYB2可溶蛋白表达条件优化 | 第34-37页 |
| 2.3.5 可溶蛋白的纯化 | 第37-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 2.4.1 可溶蛋白表达条件的优化 | 第39-40页 |
| 2.4.2 可溶蛋白的亲和纯化 | 第40页 |
| 2.5 小结 | 第40-41页 |
| 3 AtMYB2转录因子与SICMO启动子功能元件相互作用分析 | 第41-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第41页 |
| 3.1.1 试剂 | 第41页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 3.2.1 探针制备 | 第41页 |
| 3.2.2 凝胶阻滞分析实验 | 第41-44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-46页 |
| 3.3.1 探针制备 | 第44-45页 |
| 3.3.2 凝胶阻滞分析实验 | 第45-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3.5 小结 | 第47-48页 |
| 4 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录A pET-30a(+)载体图谱 | 第53-54页 |
| 附录B DL2000 DNA Marker | 第54-55页 |
| 附录C λ-HindⅢ DNA Marker | 第55-56页 |
| 附录D 蛋白分子量标准(低) | 第56-57页 |
| 附录E LB培养基配方 | 第57-58页 |
| 附录F pC5启动子序列 | 第58-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |