摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第1章 引言 | 第13-29页 |
1.1 蛋白淀粉样纤维及相关疾病概述 | 第13-18页 |
1.1.1 蛋白淀粉样纤维化 | 第13-17页 |
1.1.2 蛋白淀粉样纤维相关疾病 | 第17-18页 |
1.2 溶菌酶的性质及其淀粉样纤纤维化 | 第18-20页 |
1.2.1 溶菌酶的性质 | 第18-19页 |
1.2.2 溶菌酶淀粉样纤纤维化 | 第19-20页 |
1.3 牛胰岛素的性质及其淀粉样纤维化 | 第20-22页 |
1.3.1 牛胰岛素的性质 | 第20页 |
1.3.2 牛胰岛素淀粉样纤维化 | 第20-22页 |
1.4 黄烷醇类多酚 | 第22-23页 |
1.5 EGCG对淀粉样纤维化的作用 | 第23-25页 |
1.6 EGCG的氧化机制 | 第25-26页 |
1.7 蛋白质淀粉样纤维的检测技术 | 第26-29页 |
1.7.1 ThT与ANS荧光检测 | 第26-27页 |
1.7.2 SDS-PAGE电泳技术 | 第27-28页 |
1.7.3 电泳转移印迹技术 | 第28页 |
1.7.4 透射电子显微镜技术 | 第28-29页 |
论文框架图 | 第29-31页 |
第2章 实验部分 | 第31-41页 |
2.1 材料试剂与仪器设备 | 第31-34页 |
2.1.1 实验药品与相关试剂 | 第31页 |
2.1.2 主要仪器与设备 | 第31-32页 |
2.1.3 实验试剂及配置 | 第32-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-41页 |
2.2.1 蛋白质淀粉样纤维样品的制备 | 第34页 |
2.2.2 HPLC样品的制备 | 第34-35页 |
2.2.3 LC-MS样品的制备 | 第35页 |
2.2.4 MS和MS/MS样品的制备 | 第35页 |
2.2.5 UV检测中样品的配置 | 第35页 |
2.2.6 红细胞溶血实验 | 第35-36页 |
2.2.7 考马斯亮蓝检测蛋白质含量 | 第36页 |
2.2.8 Zeta电位检测样品的制备以及实验条件 | 第36页 |
2.2.9 ThT荧光检测纤维生长动力学 | 第36-37页 |
2.2.10 ANS荧光检测纤维生长动力学 | 第37页 |
2.2.11 透射电子显微镜观察纤维形态 | 第37页 |
2.2.12 Tricine体系SDS-PAGE电泳 | 第37-39页 |
2.2.13 统计学处理实验数据 | 第39-41页 |
第3章 实验结果 | 第41-74页 |
3.1 EGCG稳定性检测 | 第41-43页 |
3.1.1 HPLC检测pH=8.0时EGCG的稳定性 | 第41-42页 |
3.1.2 Vc和EDTA对EGCG氧化过程的影响 | 第42页 |
3.1.3 HPLC检测pH=7.4体系中EGCG的稳定性 | 第42-43页 |
3.2 EGCG氧化产物的结构分析 | 第43-48页 |
3.2.1 UV检测EGCG氧化产物 | 第43-44页 |
3.2.2 LC-MS检测EGCG氧化产物 | 第44-46页 |
3.2.3 MS/MS检测EGCG氧化产物 | 第46-47页 |
3.2.4 EGCG氧化产物可能的形成途径 | 第47-48页 |
3.3 EGCG氧化产物对牛胰岛素纤维化过程的影响 | 第48-56页 |
3.3.1 牛胰岛素淀粉样纤维化生长动力学曲线 | 第48-49页 |
3.3.2 EGCG氧化产物对牛胰岛素纤维生长过程的影响 | 第49-52页 |
3.3.3 不同浓度的EGCG与其氧化产物对牛胰岛素纤维生长的影响 | 第52-53页 |
3.3.4 氧化不同时间段的EGCG对牛胰岛素纤维生长的影响 | 第53-54页 |
3.3.5 HPLC检测EGCG在牛胰岛素孵育液中的稳定性 | 第54页 |
3.3.6 EGCG氧化产物与牛胰岛素的结合机理 | 第54-56页 |
3.4 EGCG氧化产物对溶菌酶纤维化过程的影响 | 第56-62页 |
3.4.1 溶菌酶淀粉样纤维化生长动力学曲线 | 第56页 |
3.4.2 EGCG氧化产物对溶菌酶生长过程的影响 | 第56-59页 |
3.4.3 不同浓度的EGCG与其氧化产物对溶菌酶纤维生长的影响 | 第59-60页 |
3.4.4 氧化不同时间段的EGCG对溶菌酶淀粉样纤维生长的影响 | 第60-61页 |
3.4.5 EGCG氧化产物与溶菌酶的结合机理 | 第61-62页 |
3.5 EGCG及其氧化产物对成熟纤维的解聚作用 | 第62-69页 |
3.5.1 EGCG及其氧化产物对成熟纤维的沉降 | 第62页 |
3.5.2 ANS和Zeta电位检测纤维疏水性以及表面电荷的变化 | 第62-64页 |
3.5.3 考马斯亮蓝检测上清液中蛋白质的含量 | 第64-65页 |
3.5.4 Vc在EGCG及其氧化产物对成熟纤维解聚过程中的抗氧化作用 | 第65页 |
3.5.5 考马斯亮蓝检测上清液中蛋白质的含量(含Vc) | 第65-66页 |
3.5.6 电泳检测沉淀物 | 第66-69页 |
3.6 细胞毒性检测 | 第69-70页 |
3.7 四种黄烷醇类多酚的氧化 | 第70-74页 |
3.7.1 紫外检测四种黄烷醇类多酚的氧化 | 第70-71页 |
3.7.2 HPLC检测四种黄烷醇类多酚的氧化过程 | 第71-72页 |
3.7.3 四种黄烷醇类多酚对溶菌酶纤维生长过程的影响 | 第72-74页 |
第4章 结果讨论 | 第74-82页 |
4.1 外界因素对淀粉样纤维生长过程的影响 | 第74页 |
4.2 在实验条件下EGCG的稳定性 | 第74-77页 |
4.3 EGCG和EGCG氧化产物抑制纤维生长的机制 | 第77-78页 |
4.4 EGCG和EGCG氧化产物对成熟纤维的作用 | 第78-79页 |
4.5 黄烷醇类多酚的氧化以及对纤维生长过程的影响 | 第79-82页 |
第5章 结论 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-94页 |
致谢 | 第94-96页 |
攻读硕士期间的研究成果 | 第96页 |