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Candida sp.99-125脂肪酶固定化及其催化性能的研究

学位论文数据集第3-4页
摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
目录第8-14页
第一章 文献综述第14-36页
    1.1 酶及酶的固定化第14-24页
        1.1.1 酶第14页
        1.1.2 酶的固定化第14-22页
            1.1.2.1 酶固定化的基本原则第15-16页
            1.1.2.2 固定化酶的方法第16页
            1.1.2.3 固定化酶的性质第16-17页
            1.1.2.4 评价固定化酶的指标及其测定第17-18页
            1.1.2.5 固定化酶的材料第18-21页
            1.1.2.6 固定化酶的应用第21-22页
        1.1.3 固定化技术的研究新进展第22-24页
            1.1.3.1 共固定化技术第22页
            1.1.3.2 定向固定化技术第22-23页
            1.1.3.3 交联酶晶体第23-24页
            1.1.3.4 脂质体包埋第24页
    1.2 脂肪酶及脂肪酶的固定化第24-34页
        1.2.1 脂肪酶第24-30页
            1.2.1.1 脂肪酶的分类第25-27页
            1.2.1.2 脂肪酶的结构及活性中心第27-28页
            1.2.1.3 脂肪酶的催化机理第28-30页
        1.2.2 脂肪酶的固定化第30-32页
            1.2.2.1 吸附法第30页
            1.2.2.2 包埋法第30-31页
            1.2.2.3 共价结合法第31-32页
            1.2.2.4 交联法第32页
        1.2.3 脂肪酶固定化的应用第32-34页
            1.2.3.1 脂肪酶催化合成蜡酯的应用第32-33页
            1.2.3.2 脂肪酶催化生产生物柴油的应用第33-34页
    1.3 脂肪酶固定化的意义及工业化前景第34-36页
第二章 共价交联法固定化Candida sp.99-125脂肪酶第36-56页
    2.1 引言第36页
    2.2 实验设备与原料第36-38页
        2.2.1 实验材料第36-37页
        2.2.2 实验设备第37-38页
    2.3 实验方法第38-45页
        2.3.1 酶蛋白的测定第38-39页
        2.3.2 游离酶水解活力的测定第39-40页
        2.3.3 固定化脂肪酶水解活力的测定第40-41页
        2.3.4 壳聚糖微球的制备第41页
            2.3.4.1 不同壳聚糖浓度对壳聚糖成球的影响第41页
            2.3.4.2 凝结剂的组成对壳聚糖成球的影响第41页
        2.3.5 固定化脂肪酶载体的活化第41-42页
        2.3.6 固定化方法的选择第42页
        2.3.7 棕榈酸十六酯的合成第42-43页
        2.3.8 固定化条件对固定化酶水解活力的影响第43-44页
            2.3.8.1 活化剂用量对固定化酶的影响第43页
            2.3.8.2 活化时间对固定化酶的影响第43页
            2.3.8.3 交联剂用量对固定化酶的影响第43页
            2.3.8.4 交联时间对固定化酶的影响第43-44页
            2.3.8.5 pH值对固定化酶的影响第44页
        2.3.9 固定化酶的性质的研究第44-45页
            2.3.9.1 固定化酶的最适反应温度第44页
            2.3.9.2 固定化酶的热稳定性第44-45页
            2.3.9.3 固定化酶的有机溶剂稳定性第45页
            2.3.9.4 固定化酶的操作稳定性第45页
        2.3.10 固定化酶红外官能团的测定第45页
    2.4 结果与讨论第45-53页
        2.4.1 壳聚糖微球的制备第45-46页
        2.4.2 固定化方法的确立第46-48页
            2.4.2.1 固定化酶活化剂的选择第46-47页
            2.4.2.2 固定化方法的比较第47-48页
        2.4.3 固定化条件对固定化酶水解活力和固定化效率的影响第48-51页
            2.4.3.1 活化剂用量对固定化酶水解活力和固定化效率的影响第48-49页
            2.4.3.2 活化时间对固定化酶水解活力和固定化效率的影响第49页
            2.4.3.3 交联剂用量对固定化酶水解活力和固定化效率的影响第49-50页
            2.4.3.4 交联时间对固定化酶水解活力和固定化效率的影响第50页
            2.4.3.5 pH值对固定化酶水解活力和固定化效率的影响第50-51页
        2.4.4 固定化酶的性质第51-53页
            2.4.4.1 固定化酶的最适反应温度第51-52页
            2.4.4.2 固定化酶的热稳定性第52页
            2.4.4.3 固定化酶的有机溶剂稳定性第52-53页
            2.4.4.4 固定化酶的操作稳定性第53页
    2.5 小结第53-56页
第三章 包埋法固定化Candida sp.99-125脂肪酶第56-74页
    3.1 引言第56页
    3.2 实验设备与原料第56-58页
        3.2.1 实验材料第56-57页
        3.2.2 实验设备第57-58页
    3.3 实验方法第58-62页
        3.3.1 脂肪酶蛋白的测定第58页
        3.3.2 游离酶及固定化酶水解活力的测定第58页
        3.3.3 固定化酶酯化活力的测定第58页
        3.3.4 酯化反应的气相色谱分析第58-59页
        3.3.5 固定化效率的计算第59页
        3.3.6 相对酶活回收率的计算第59页
        3.3.7 包埋法固定化脂肪酶第59-60页
        3.3.8 固定化条件对固定化脂肪酶的影响第60-61页
            3.3.8.1 海藻酸钠浓度对固定化脂肪酶的影响第60页
            3.3.8.2 CaCl2浓度对固定化脂肪酶的影响第60页
            3.3.8.3 给酶量对固定化脂肪酶的影响第60-61页
            3.3.8.4 微球直径对固定化脂肪酶的影响第61页
            3.3.8.5 固定化时间对固定化脂肪酶的影响第61页
        3.3.9 固定化酶的酶学性质的测定第61-62页
            3.3.9.1 固定化酶的最适温度第61-62页
            3.3.9.2 固定化脂肪酶的热稳定性第62页
        3.3.10 固定化酶的微观表征第62页
    3.4 结果与讨论第62-73页
        3.4.1 固定化条件对固定化酶水解活力的影响第62-65页
            3.4.1.1 海藻酸钠浓度对固定化酶水解活力的影响第62-63页
            3.4.1.2 CaCl_2浓度对固定化酶水解活力的影响第63-64页
            3.4.1.3 给酶量对固定化酶水解活力的影响第64页
            3.4.1.4 微球直径对固定化酶水解活力的影响第64-65页
            3.4.1.5 固定化时间对固定化酶水解活力的影响第65页
        3.4.2 固定化条件对固定化酶酯化活力的影响第65-67页
            3.4.2.1 海藻酸钠浓度对固定化酶酯化活力的影响第65-66页
            3.4.2.2 CaCl2浓度对固定化酶酯化活力的影响第66页
            3.4.2.3 给酶量对固定化酶酯化活力的影响第66页
            3.4.2.4 微球直径对固定化酶酯化活力的影响第66页
            3.4.2.5 固定化时间对固定化酶酯化活力的影响第66-67页
        3.4.3 固定化条件对固定化效率的影响第67-70页
            3.4.3.1 海藻酸钠浓度对固定化效率的影响第67-68页
            3.4.3.2 CaCl2浓度对固定化效率的影响第68页
            3.4.3.3 给酶量对固定化效率的影响第68-69页
            3.4.3.4 微球直径对固定化效率的影响第69页
            3.4.3.5 固定化时间对固定化效率的影响第69-70页
        3.4.4 固定化条件对相对酶活力回收率的影响第70-71页
            3.4.4.1 海藻酸钠浓度对相对酶活力回收率的影响第70页
            3.4.4.2 CaCl2浓度对相对酶活力回收率的影响第70页
            3.4.4.3 给酶量对相对酶活力回收率的影响第70-71页
            3.4.4.4 微球直径对相对酶活力回收率的影响第71页
            3.4.4.5 固定化时间对相对酶活力回收率的影响第71页
        3.4.5 固定化酶的酶学性质第71-72页
            3.4.5.1 固定化酶的最适温度第71-72页
            3.4.5.2 固定化脂肪酶的热稳定性第72页
        3.4.6 固定化酶的表面形态第72-73页
    3.5 小结第73-74页
第四章 固定化Candida sp.99-125脂肪酶催化合成生物柴油第74-96页
    4.1 引言第74页
    4.2 实验设备与材料第74-75页
        4.2.1 实验材料第74-75页
        4.2.2 实验设备第75页
    4.3 实验方法第75-81页
        4.3.1 固定化方法的选择第75-76页
            4.3.1.1 海藻酸钠包埋粗酶粉固定化脂肪酶第75-76页
            4.3.1.2 海藻酸钠直接包埋发酵液固定化脂肪酶第76页
        4.3.2 固定化脂肪酶在微水相中催化生物柴油第76页
        4.3.3 固定化脂肪酶在无溶剂体系中催化合成生物柴油第76页
        4.3.4 生物柴油的气相色谱分析第76-77页
        4.3.5 海藻酸钠包埋发酵液固定化脂肪酶的正交实验设计第77-78页
        4.3.6 反应条件对催化合成生物柴油的影响第78-80页
            4.3.6.1 pH值的影响第78页
            4.3.6.2 固定化酶用量对反应的影响第78页
            4.3.6.3 体系含水量对反应的影响第78-79页
            4.3.6.4 反应温度对反应的影响第79页
            4.3.6.5 甲醇的流加方式对反应的影响第79页
            4.3.6.6 固定化脂肪酶催化合成生物柴油的反应进程的测定第79页
            4.3.6.7 固定化脂肪酶合成生物柴油的操作稳定性第79-80页
        4.3.7 固定化脂肪酶在无溶剂体系中催化合成生物柴油的研究第80-81页
            4.3.7.1 油醇摩尔比对合成生物柴油的影响第80页
            4.3.7.2 固定化酶用量对合成生物柴油的影响第80页
            4.3.7.3 反应温度对合成生物柴油的影响第80页
            4.3.7.4 含水量对合成生物柴油的影响第80页
            4.3.7.5 固定化脂肪酶合成生物柴油的操作稳定性第80-81页
        4.3.8 使用D-海藻糖复包衣固定化后的脂肪酶第81页
        4.3.9 使用正硅酸甲酯复包衣固定化后的脂肪酶第81页
        4.3.10 固定化酶包衣前后的微观表征第81页
    4.4 结果与讨论第81-94页
        4.4.1 固定化脂肪酶反应条件的优选及微水介质中催化合成生物柴油的研究第81-88页
            4.4.1.1 海藻酸钠包埋发酵液固定化脂肪酶反应条件的优选第82-84页
            4.4.1.2 海藻酸钠包埋发酵液固定化脂肪酶催化合成生物柴油的研究第84-87页
            4.4.1.3 海藻酸钠包埋发酵液固定化脂肪酶催化合成生物柴油的反应进程第87页
            4.4.1.4 固定化脂肪酶合成生物柴油的操作稳定性第87-88页
        4.4.2 固定化脂肪酶在无溶剂体系中催化合成生物柴油的研究第88-92页
            4.4.2.1 油醇摩尔比对合成生物柴油的影响第88-89页
            4.4.2.2 固定化酶用量对合成生物柴油的影响第89页
            4.4.2.3 温度对合成生物柴油的影响第89-90页
            4.4.2.4 含水量对合成生物柴油的影响第90-91页
            4.4.2.5 固定化脂肪酶合成生物柴油的操作稳定性第91-92页
        4.4.3 固定化酶在其它体系中的催化性能第92-93页
        4.4.4 固定化酶包衣前后的微观表征第93-94页
            4.4.4.1 D-海藻糖包衣后固定化酶的微观结构第93页
            4.4.4.2 TMOS复膜后固定化酶的微观结构第93-94页
    4.5 小结第94-96页
第五章 结论第96-98页
参考文献第98-104页
致谢第104-105页
研究成果及发表的学术论文第105-106页
作者简介第106-107页
导师简介第107-108页
附件第108-109页

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