| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 植物遗传转化研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 植物遗传转化机制 | 第10页 |
| 1.1.2 植物遗传转化方法 | 第10-13页 |
| 1.2 苜蓿遗传转化研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 苜蓿概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 农杆菌介导的苜蓿遗传转化机理 | 第14-15页 |
| 1.2.3 农杆菌介导的苜蓿遗传转化的影响因素 | 第15-16页 |
| 1.3 抗菌肽研究现状 | 第16-21页 |
| 1.3.1 抗菌肽简介 | 第16-17页 |
| 1.3.2 抗菌肽作用机制 | 第17-18页 |
| 1.3.3 抗菌肽Rev4在植物遗传转化中的研究进展 | 第18-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-26页 |
| 2.1 材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.3 PCR扩增引物序列 | 第21页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.1.6 培养基配方 | 第22-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 紫花苜蓿整体转化法体系 | 第23-24页 |
| 2.2.1.1 菌种活化 | 第23页 |
| 2.2.1.2 苜蓿种子消毒 | 第23-24页 |
| 2.2.1.3 侵染 | 第24页 |
| 2.2.1.4 共培养 | 第24页 |
| 2.2.1.5 抗性转化植株的获得 | 第24页 |
| 2.2.2 转基因植株的分子鉴定 | 第24-26页 |
| 2.2.2.1 总DNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.2.2 PCR扩增 | 第24页 |
| 2.2.2.3 PCR产物的序列测定 | 第24-25页 |
| 2.2.2.4 总RNA的提取 | 第25页 |
| 2.2.2.5 RT-PCR | 第25-26页 |
| 第三章 结果与分析 | 第26-37页 |
| 3.1 紫花苜蓿转抗菌肽Rev4体系的建立 | 第26-27页 |
| 3.1.1 紫花苜蓿种子整体侵染法 | 第26页 |
| 3.1.2 转抗菌肽基因抗性植株的获得 | 第26页 |
| 3.1.3 抗性植株的移栽 | 第26-27页 |
| 3.2 转基因植株的PCR鉴定 | 第27-28页 |
| 3.2.1 紫花苜蓿基因组的提取 | 第27页 |
| 3.2.2 抗菌肽基因的PCR鉴定 | 第27-28页 |
| 3.3 PCR产物的序列测定3.4 转化植株的半定量RT-PCR鉴定 | 第28-34页 |
| 3.4 转化植株的 RT-PCR 鉴定 | 第34-37页 |
| 3.4.1 苜蓿总RNA提取 | 第34-35页 |
| 3.4.2 RT-PCR分析 | 第35-37页 |
| 第四章 讨论 | 第37-40页 |
| 4.1 紫花苜蓿种子整体侵染法 | 第37页 |
| 4.2 抗菌肽基因pKLP36-PcRIL PCR程序的优化 | 第37页 |
| 4.3 PCR产物测序结果讨论 | 第37-38页 |
| 4.4 苜蓿RNA提取方案的优化 | 第38-39页 |
| 4.5 外源水杨酸诱导抗菌肽表达 | 第39-40页 |
| 结论 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 攻读硕士期间发表的主要科研成果 | 第48-50页 |
| 后记 | 第50页 |
