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ω-3 PUFA调节膜脂组成缓解NAFLD中内质网应激作用机制研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
主要缩写词第11-12页
1 绪论第12-18页
    1.1 内质网应激与非酒精性脂肪肝研究进展第12-15页
        1.1.1 非酒精性脂肪肝病的概述第12页
        1.1.2 内质网应激及其激活途径第12-14页
        1.1.3 内质网应激与NAFLD第14-15页
    1.2 Ω-3 多不饱和脂肪酸第15-17页
        1.2.1 ω-3PUFA与心脑血管疾病第16页
        1.2.2 ω-3PUFA与炎症第16页
        1.2.3 ω-3PUFA与癌症第16页
        1.2.4 ω-3PUFA与NAFLD第16-17页
    1.3 立题依据与研究内容第17-18页
2 NAFLD动物模型的建立第18-33页
    2.1 实验材料与方法第18-24页
        2.1.1 主要试剂第18-19页
        2.1.2 主要仪器第19-20页
        2.1.3 动物和饲料第20-21页
        2.1.4 血液样本、肝脏组织采集第21-22页
        2.1.5 血液生化指标检测第22页
        2.1.6 组织病理学分析第22页
        2.1.7 肝组织总RNA提取及逆转录成cDNA第22-23页
        2.1.8 引物设计第23页
        2.1.9 Real-time PCR第23页
        2.1.10 数据统计第23-24页
    2.2 实验结果第24-32页
        2.2.1 高脂高胆固醇饮食对大鼠体重及肝重的影响第24-25页
        2.2.2 各组大鼠血清脂质水平第25-27页
        2.2.3 各组大鼠血清FFA、GST、SOD水平第27-28页
        2.2.4 各组大鼠血清ALT、AST水平第28-29页
        2.2.5 大鼠肝组织病理H&E、Masson染色结果第29-32页
        2.2.6 大鼠肝组织BIP、ATF4 mRNA表达结果第32页
    2.3 结论第32-33页
3 Ω-3PUFA缓解PA负荷诱导的大鼠BRL肝细胞内质网应激的作用机制研究第33-49页
    3.1 材料与方法第33-38页
        3.1.1 主要试剂第33页
        3.1.2 主要仪器第33-34页
        3.1.3 PA对BRL细胞增殖活性实验第34-35页
        3.1.4 细胞分组第35页
        3.1.5 细胞RNA提取及逆转录成cDNA第35页
        3.1.6 引物设计第35-36页
        3.1.7 Real-time PCR第36页
        3.1.8 细胞膜PC、PE超高效液相质谱检测第36-37页
        3.1.9 细胞膜脂肪酸组成GC/MS检测第37页
        3.1.10 细胞内游离Ca2+浓度检测第37-38页
        3.1.11 流式细胞仪Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡第38页
        3.1.12 统计学分析第38页
    3.2 实验结果第38-47页
        3.2.1 不同浓度PA对BRL细胞增殖活性MTT检测第38-39页
        3.2.2 目的基因BIP、ATF6 mRNA水平的表达第39-40页
        3.2.3 目的基因PEMT、SERCA在mRNA水平表达情况第40页
        3.2.4 液相质谱联用检测细胞膜PC、PE相对含量第40-41页
        3.2.5 气相质谱联用检测细胞膜磷脂脂肪酸组成第41-44页
        3.2.6 细胞内游离Ca2+浓度检测结果第44-45页
        3.2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡第45-47页
    3.3 结论第47-49页
4 讨论第49-51页
参考文献第51-56页
致谢第56-57页
攻读学位期间的研究成果第57页

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