中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略语 | 第11-13页 |
前言 | 第13-16页 |
研究现状、成果 | 第13-15页 |
研究目的、方法 | 第15-16页 |
一、食源性肥胖大鼠LKB1/AMPK通路受损 | 第16-51页 |
1.1 对象和方法 | 第16-32页 |
1.1.1 主要仪器 | 第16-17页 |
1.1.2 主要试剂耗材 | 第17-18页 |
1.1.3 主要试剂配制 | 第18-21页 |
1.1.4 实验动物 | 第21-22页 |
1.1.5 高脂饲料和普通饲料配方及制作 | 第22-23页 |
1.1.6 动物体重和进食量监测 | 第23页 |
1.1.7 动物体脂肪检测 | 第23-24页 |
1.1.8 动物取材及后固定 | 第24-25页 |
1.1.9 组织包埋和切片 | 第25-26页 |
1.1.10 HE染色(石蜡切片) | 第26-27页 |
1.1.11 油红O染色(冰冻切片) | 第27页 |
1.1.12 免疫组织化学染色(冰冻切片) | 第27-28页 |
1.1.13 下丘脑PCR检测 | 第28-30页 |
1.1.14 下丘脑和脂肪Western Blot检测 | 第30-32页 |
1.1.15 统计学方法 | 第32页 |
1.2 结果 | 第32-44页 |
1.2.1 动物模型体重及进食量 | 第32-36页 |
1.2.2 动物脂肪含量测定结果 | 第36-38页 |
1.2.3 HE染色结果 | 第38-39页 |
1.2.4 油红O染色结果 | 第39-40页 |
1.2.5 动物下丘脑LKB1免疫组织化学检测结果 | 第40页 |
1.2.6 动物下丘脑mRNA检测结果 | 第40-41页 |
1.2.7 动物脂肪组织和下丘脑Western Blot检测结果 | 第41-44页 |
1.3 讨论 | 第44-49页 |
1.3.1 动物模型的建立 | 第44页 |
1.3.2 动物模型体重和体脂肪检测结果分析 | 第44-46页 |
1.3.3 组织学检测结果分析 | 第46页 |
1.3.4 脂肪组织LKB1/AMPK和mTOR通路变化分析 | 第46-47页 |
1.3.5 下丘脑LKB1/AMPK、mTOR通路和MC3R变化分析 | 第47-49页 |
1.4 小结 | 第49-51页 |
二、大鼠下丘脑过表达LKB1抑制脂肪生成 | 第51-75页 |
2.1 对象和方法 | 第51-63页 |
2.1.1 主要仪器 | 第51-52页 |
2.1.2 主要试剂 | 第52页 |
2.1.3 主要试剂配制 | 第52页 |
2.1.4 过表达LKB1腺相关病毒载体的构建 | 第52-60页 |
2.1.5 实验动物 | 第60页 |
2.1.6 大鼠脑室内注射 | 第60-62页 |
2.1.7 动物进食量和体重监测 | 第62页 |
2.1.8 动物体脂肪检测 | 第62页 |
2.1.9 动物取材 | 第62页 |
2.1.10 下丘脑Western Blot检测 | 第62页 |
2.1.11 统计学方法 | 第62-63页 |
2.2 结果 | 第63-70页 |
2.2.1 293T细胞重组质粒转染荧光检测 | 第63页 |
2.2.2 293T细胞目的基因表达检测结果 | 第63-64页 |
2.2.3 病毒滴度检测结果 | 第64-65页 |
2.2.4 动物体重和进食量监测结果 | 第65-66页 |
2.2.5 动物体脂肪含量测定结果 | 第66-69页 |
2.2.6 动物下丘脑Western Blot检测结果 | 第69-70页 |
2.3 讨论 | 第70-74页 |
2.3.1 病毒载体的建立 | 第70-71页 |
2.3.2 脑室内注射病毒动物模型的建立 | 第71页 |
2.3.3 动物模型体重和体脂肪含量结果分析 | 第71-72页 |
2.3.4 下丘脑LKB1/AMPK通路和MC3R、MC4R变化分析 | 第72-74页 |
2.4 小结 | 第74-75页 |
三、LKB1抑制前脂肪细胞的分化 | 第75-92页 |
3.1 对象和方法 | 第75-83页 |
3.1.1 主要仪器 | 第75页 |
3.1.2 主要试剂 | 第75-76页 |
3.1.3 主要试剂配制 | 第76-77页 |
3.1.4 过表达LKB1稳定转染细胞系的构建 | 第77-79页 |
3.1.5 沉默LKB1稳定转染细胞系的构建 | 第79-81页 |
3.1.6 细胞培养和分化 | 第81-82页 |
3.1.7 细胞油红O染色 | 第82-83页 |
3.1.8 细胞Western Blot检测 | 第83页 |
3.1.9 统计学方法 | 第83页 |
3.2 结果 | 第83-89页 |
3.2.1 过表达组 3T3-L1细胞转染效果检测 | 第83-84页 |
3.2.2 干扰组 3T3-L1细胞内LKB1表达Western Blot检测结果 | 第84-85页 |
3.2.3 脂肪细胞油红O染色结果 | 第85-86页 |
3.2.4 3T3-L1细胞Western Blot检测结果 | 第86-89页 |
3.3 讨论 | 第89-91页 |
3.3.1 3T3-L1细胞油红O染色结果分析 | 第89-90页 |
3.3.2 3T3-L1细胞内LKB1/AMPK和mTOR通路变化分析 | 第90页 |
3.3.3 3T3-L1细胞内脂肪生成相关因子的变化分析 | 第90-91页 |
3.4 小结 | 第91-92页 |
全文结论 | 第92-94页 |
论文创新点 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-103页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第103-104页 |
综述 | 第104-124页 |
下丘脑和脑干内神经核团与能量平衡的调节 | 第104-110页 |
LKB1研究进展及LKB1/AMPK对能量代谢的调控作用 | 第110-116页 |
综述参考文献 | 第116-124页 |
致谢 | 第124-125页 |
个人简历 | 第125页 |