犬细小病毒灭活疫苗的制备及效果观察
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第12-17页 |
| 1.1 CPV生物学特性 | 第12-13页 |
| 1.2 CPV的分子生物学特性 | 第13页 |
| 1.3 CPV抗原检测研究 | 第13-14页 |
| 1.3.1 电镜观察 | 第13页 |
| 1.3.2 血凝试验（HA） | 第13-14页 |
| 1.3.3 聚合酶链式反应（PCR） | 第14页 |
| 1.3.4 酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第14页 |
| 1.4 CPV抗体检测研究 | 第14-15页 |
| 1.4.1 血凝抑制试验（HI） | 第14页 |
| 1.4.2 中和试验（SN） | 第14-15页 |
| 1.5 CPV的预防治疗 | 第15页 |
| 1.6 疫苗研究进展 | 第15-16页 |
| 1.6.1 弱毒疫苗与灭活疫苗 | 第15-16页 |
| 1.6.2 基因工程疫苗与核酸疫苗 | 第16页 |
| 1.7 本研究目的与意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 细胞、毒株和商品化疫苗 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂及耗材 | 第17页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.4 培养基及主要溶液的配制 | 第18-19页 |
| 2.1.5 实验动物 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-27页 |
| 2.2.1 疫苗的制备及免疫预防 | 第19-27页 |
| 2.2.1.1 引物设计 | 第19页 |
| 2.2.1.2 F81细胞的复苏、传代培养与冻存 | 第19-20页 |
| 2.2.1.3 CPV培养接毒量和生长曲线的确定 | 第20页 |
| 2.2.1.4 CPV的鉴定 | 第20-22页 |
| 2.2.1.5 病毒的增殖培养 | 第22页 |
| 2.2.1.6 HA抗原制备 | 第22页 |
| 2.2.1.7 HA实验 | 第22页 |
| 2.2.1.8 病毒的浓缩 | 第22-23页 |
| 2.2.1.9 病毒的灭活 | 第23页 |
| 2.2.1.10 CPV灭活效果检测 | 第23页 |
| 2.2.1.11 灭活CPV与佐剂混合 | 第23-24页 |
| 2.2.1.12 疫苗的检验 | 第24-25页 |
| 2.2.1.13 CPV灭活疫苗免疫 | 第25-26页 |
| 2.2.1.14 免疫保护性实验 | 第26页 |
| 2.2.1.15 第三批疫苗免疫 | 第26-27页 |
| 2.2.2 高免血清的制备 | 第27页 |
| 2.2.2.1 免疫方案 | 第27页 |
| 2.2.2.2 HI检测抗体水平 | 第27页 |
| 2.2.2.3 颈动脉插管放血 | 第27页 |
| 2.2.2.4 高免血清的处理 | 第27页 |
| 2.2.3 数据处理 | 第27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-40页 |
| 3.1 CPV的增殖 | 第27-28页 |
| 3.2 细胞培养液PCR检测 | 第28-29页 |
| 3.3 CPV生长曲线的确定 | 第29-30页 |
| 3.4 病毒的浓缩 | 第30-31页 |
| 3.5 CPV的灭活效果检验 | 第31页 |
| 3.6 灭活疫苗的制备 | 第31页 |
| 3.7 灭活疫苗实验室检验 | 第31-32页 |
| 3.7.1 无菌检验 | 第31-32页 |
| 3.7.2 稳定性与剂型检测 | 第32页 |
| 3.8 抗体消长规律 | 第32-36页 |
| 3.9 二免后抗体消长规律 | 第36-37页 |
| 3.10 攻毒实验 | 第37-39页 |
| 3.10.1 攻毒剂量 | 第37-38页 |
| 3.10.2 攻毒结果 | 第38页 |
| 3.10.3 攻毒后犬粪便PCR检测 | 第38-39页 |
| 3.11 第三批疫苗的免疫效果 | 第39页 |
| 3.12 高免血清制备 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-44页 |
| 4.1 CPV灭活疫苗的制备 | 第40-41页 |
| 4.2 CPV灭活疫苗的免疫效果 | 第41-44页 |
| 全文总结 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录：攻读硕士期间发表学术论文 | 第50页 |
