摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第11-25页 |
1.1 课题研究背景及目的和意义 | 第11-12页 |
1.2 SALL4的国内外研究进展及分析 | 第12-16页 |
1.2.1 SALL4简介 | 第12-13页 |
1.2.2 SALL4基因与肿瘤发生的关系 | 第13-16页 |
1.3 miRNAs研究现状 | 第16-19页 |
1.3.1 miRNAs简介 | 第16-18页 |
1.3.2 miRNAs与肿瘤 | 第18页 |
1.3.3 miR-103/195/15b在肿瘤中的研究进展 | 第18-19页 |
1.4 lncRNAs的研究现状 | 第19-23页 |
1.4.1 lncRNAs简介 | 第19-20页 |
1.4.2 lncRNAs的转录和加工过程 | 第20-21页 |
1.4.3 lncRNAs的作用机制 | 第21-22页 |
1.4.4 lncRNAs与肿瘤发生发展的关系 | 第22-23页 |
1.5 主要研究内容 | 第23-24页 |
1.6 实验技术路线 | 第24-25页 |
第2章 实验材料方法 | 第25-43页 |
2.1 实验材料 | 第25-28页 |
2.1.1 细胞系 | 第25页 |
2.1.2 抗体 | 第25页 |
2.1.3 实验主要试剂及配方 | 第25-27页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-42页 |
2.2.1 细胞培养及转染 | 第28-29页 |
2.2.2 细胞增殖实验 | 第29-31页 |
2.2.3 PCR反应 | 第31-34页 |
2.2.4 荧光素酶双报告实验 | 第34页 |
2.2.5 慢病毒包装构建稳转细胞系 | 第34-35页 |
2.2.6 Transwell检测细胞的迁移和侵袭实验 | 第35-36页 |
2.2.7 细胞周期实验 | 第36页 |
2.2.8 Western blot | 第36-38页 |
2.2.9 免疫荧光 | 第38页 |
2.2.10 原位杂交 | 第38-41页 |
2.2.11 caspase3/7 检测细胞凋亡 | 第41-42页 |
2.3 生物信息学预测网站及分析软件 | 第42-43页 |
第3章 miR-103/195/15b以SALL4为靶基因影响细胞的增殖与迁移 | 第43-53页 |
3.1 miR-103/195/15b表达下调后对细胞增殖与迁移的影响 | 第43-47页 |
3.1.1 miR-103/195/15b表达下调效果检测 | 第43-44页 |
3.1.2 miR-103/195/15b表达下调后对细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
3.1.3 miR-103/195/15b表达下调后对细胞迁移的影响 | 第45-46页 |
3.1.4 miR-103/195/15b表达下调后对细胞侵袭的影响 | 第46-47页 |
3.2 SALL4为miR-103/195/15b直接靶基因的确认 | 第47-50页 |
3.2.1 荧光素酶双报告系统检测 | 第47-48页 |
3.2.2 miR-103/195/15b表达下调后对SALL4的影响 | 第48-49页 |
3.2.3 确认miR-103/195/15b以SALL4为靶基因的回复实验 | 第49-50页 |
3.3 讨论 | 第50-51页 |
3.4 本章小结 | 第51-53页 |
第4章 LINC00665与SALL4共表达促进胶质瘤细胞的增殖与迁移 | 第53-64页 |
4.1 LINC00665与SALL4相关性分析 | 第53-55页 |
4.1.1 生物信息学分析 | 第53-54页 |
4.1.2 LINC00665在胶质瘤组织和细胞系中的表达分析 | 第54页 |
4.1.3 LINC00665与SALL4在胶质瘤组织中表达相关性分析 | 第54-55页 |
4.2 LINC00665在细胞中的定位 | 第55-56页 |
4.3 LINC00665对胶质瘤细胞增殖和迁移的影响 | 第56-61页 |
4.3.1 慢病毒包装并筛选LINC00665过表达的细胞系 | 第56-57页 |
4.3.2 LINC00665过表达后促进胶质瘤细胞的增殖能力 | 第57-58页 |
4.3.3 LINC00665过表达后促进胶质瘤细胞的迁移与侵袭 | 第58-59页 |
4.3.4 LINC00665过表达后对胶质瘤细胞周期的影响 | 第59页 |
4.3.5 LINC00665过表达后对miR-103/195/15b、SALL4、c-Myc和Tenascin-C的表达影响 | 第59-61页 |
4.4 讨论 | 第61-62页 |
4.5 本章小结 | 第62-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-75页 |
致谢 | 第75页 |