摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
中英文对照及英文缩写词表 | 第5-8页 |
1 引言 | 第8-16页 |
1.1 Gal-1 | 第8-10页 |
1.1.1 Gal-1 的结构、配体和分布 | 第8-9页 |
1.1.2 Gal-1 生理功能 | 第9-10页 |
1.2 MGL | 第10-12页 |
1.2.1 MGL的发现、配体及分布 | 第10-11页 |
1.2.2 MGL生理功能 | 第11-12页 |
1.3 细胞凋亡 | 第12-15页 |
1.3.1 细胞凋亡的定义和特征 | 第12页 |
1.3.2 细胞凋亡信号通路 | 第12-15页 |
1.4 立题依据和研究思路 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-27页 |
2.1 主要实验材料和试剂 | 第16-17页 |
2.1.1 质粒和细菌菌株 | 第16页 |
2.1.2 细胞 | 第16-17页 |
2.1.3 抗体及主要试剂 | 第17页 |
2.2 实验仪器 | 第17-18页 |
2.3 实验方法 | 第18-27页 |
2.3.1 细胞培养 | 第18页 |
2.3.2 RT-PCR | 第18-19页 |
2.3.3 Real-time PCR | 第19-20页 |
2.3.4 Western blot | 第20-21页 |
2.3.5 人外周血单核细胞提取以及DC的诱导分化 | 第21页 |
2.3.6 T淋巴细胞分选 | 第21页 |
2.3.7 流式细胞术 | 第21-22页 |
2.3.8 PCR产物回收 | 第22页 |
2.3.9 小提质粒 | 第22-23页 |
2.3.10 双酶切、连接、转化 | 第23-24页 |
2.3.11 蛋白诱导表达、纯化及浓缩 | 第24-25页 |
2.3.12 Gal-1 结合 | 第25页 |
2.3.13 凋亡实验 | 第25-26页 |
2.3.14 免疫荧光 | 第26页 |
2.3.15 图片采集及数据分析 | 第26-27页 |
3 实验结果 | 第27-39页 |
3.1 人重组Gal-1 蛋白体外表达与纯化 | 第27-31页 |
3.1.1 PCR获得Gal-1 全长基因片段 | 第27页 |
3.1.2 pET-22b-Gal-1 原核表达载体的鉴定 | 第27-29页 |
3.1.3 人重组Gal-1 蛋白的表达与纯化 | 第29-30页 |
3.1.4 成功获得有活性的Gal-1 蛋白 | 第30-31页 |
3.2 Gal-1 通过caspase非依赖的方式诱导Jurkat细胞凋亡 | 第31-35页 |
3.2.1 恶性白血病细胞分泌Gal-1 | 第31-32页 |
3.2.2 Gal-1 诱导Jurkat细胞凋亡 | 第32-33页 |
3.2.3 Gal-1 通过caspase非依赖的方式诱导Jurkat细胞凋亡 | 第33-35页 |
3.3 MGL通过caspase非依赖的AIF入核的方式诱导Jurkat细胞凋亡 | 第35-38页 |
3.3.1 iDC表面表达MGL,mDC不表达 | 第35页 |
3.3.2 MGL诱导Jurkat细胞凋亡 | 第35-36页 |
3.3.3 MGL通过caspase非依赖的AIF入核的方式诱导Jurkat细胞凋亡 | 第36-38页 |
3.4 Gal-1 和MGL协同诱导Jurkat细胞凋亡 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
4.1 恶性白血病细胞利用微环境中的Gal-1 和MGL实现免疫逃逸 | 第39页 |
4.2 Gal-1 和MGL通过caspase非依赖的线粒体途径协同诱导T细胞凋亡 | 第39-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
致谢 | 第48页 |