| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-27页 |
| 1.1 植物的抗病机制 | 第14-18页 |
| 1.1.1 PAMPs引发的免疫反应（PTI） | 第15页 |
| 1.1.2 效应蛋白诱导的免疫反应（ETI） | 第15-17页 |
| 1.1.3 过敏反应（HR）和系统获得性抗性（SAR） | 第17-18页 |
| 1.2 转录因子 | 第18-24页 |
| 1.2.1 植物抗病相关的转录因子 | 第18-19页 |
| 1.2.2 b ZIP家族转录因子 | 第19-20页 |
| 1.2.3 MYB家族转录因子 | 第20-21页 |
| 1.2.4 ERF家族转录因子 | 第21-22页 |
| 1.2.5 WRKY家族转录因子 | 第22-24页 |
| 1.3 WRKY转录因子在植物抗病中的研究现状 | 第24-26页 |
| 1.4 选题的目的及意义 | 第26-27页 |
| 第二章 棉花Gh WRKY106-1 基因的克隆和生物信息学分析 | 第27-39页 |
| 2.1 材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 棉花材料及菌株 | 第27页 |
| 2.1.2 试剂 | 第27页 |
| 2.1.3 生物信息学软件及网站 | 第27页 |
| 2.1.4 培养基 | 第27-28页 |
| 2.1.5 主要实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-33页 |
| 2.2.1 目的基因的克隆 | 第29页 |
| 2.2.2 枯萎病菌菌液的准备 | 第29页 |
| 2.2.3 实验材料的种植与处理 | 第29页 |
| 2.2.4 棉花总RNA的提取 | 第29-31页 |
| 2.2.5 c DNA第一链的合成 | 第31页 |
| 2.2.6 Gh WRKY106-1 基因的PCR扩增和回收纯化 | 第31-32页 |
| 2.2.7 目的基因与克隆载体的连接与转化 | 第32-33页 |
| 2.2.8 目的基因的生物信息学分析 | 第33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-38页 |
| 2.3.1 RNA的提取与质量检测 | 第33页 |
| 2.3.2 目的基因Gh WRKY106-1 的克隆与酶切验证 | 第33-35页 |
| 2.3.3 生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 2.3.4 Gh WRKY106-1 的同源比对分析和进化树构建 | 第36-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 Gh WRKY106-1 基因的表达特性分析 | 第39-44页 |
| 3.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.1 实验材料和菌株 | 第39页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第39页 |
| 3.1.3 实验药品 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 3.2.1 枯萎病菌和激素的处理 | 第39-40页 |
| 3.2.2 RNA的提取和c DNA第一链的合成 | 第40页 |
| 3.2.3 引物的设计和合成 | 第40页 |
| 3.2.4 实时荧光定量分析（q RT-PCR） | 第40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-42页 |
| 3.3.1 枯萎病菌诱导Gh WRKY106-1 基因的表达分析 | 第40-41页 |
| 3.3.2 Gh WRKY106-1 基因对激素SA、JA、ET的应答反应 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 Gh WRKY106-1 基因过表达载体构建和烟草遗传转化 | 第44-56页 |
| 4.1 材料 | 第44-45页 |
| 4.1.1 材料和菌株 | 第44页 |
| 4.1.2 试剂和药品 | 第44页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第44页 |
| 4.1.4 抗生素浓度及各类培养基 | 第44-45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-49页 |
| 4.2.1 Gh WRKY106-1 基因过表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 4.2.2 农杆菌感受态的制备 | 第46页 |
| 4.2.3 Gh WRKY106-1 重组质粒电击转化农杆菌感受态 | 第46-47页 |
| 4.2.4 Gh WRKY106-1 基因过表达载体转化烟草 | 第47页 |
| 4.2.5 转基因烟草植株的鉴定 | 第47-48页 |
| 4.2.6 T_1代转基因烟草植株卡那筛选和RT-PCR鉴定 | 第48页 |
| 4.2.7 T_1代植株枯萎病菌的处理 | 第48页 |
| 4.2.8 T_1代转基因烟草PRs基因的表达分析 | 第48-49页 |
| 4.3 结果与分析 | 第49-54页 |
| 4.3.1 Gh WRKY106-1 基因过表达载体的构建 | 第49-50页 |
| 4.3.2 过表达载体p PZP35S-Gh WRKY106-1 电击转化农杆菌感受态 | 第50-51页 |
| 4.3.3 烟草的遗传转化 | 第51-52页 |
| 4.3.4 T_1代转基因烟草的筛选及RT-PCR检测 | 第52-53页 |
| 4.3.5 T_1代转基因烟草中PRs基因的表达分析 | 第53-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 Gh WRKY106-1 基因在棉花中的功能研究 | 第56-68页 |
| 5.1 材料 | 第56-57页 |
| 5.1.1 材料和菌株 | 第56页 |
| 5.1.2 试剂和药品 | 第56页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第56页 |
| 5.1.4 所用引物 | 第56-57页 |
| 5.2 实验方法 | 第57-60页 |
| 5.2.1 pTRV2-Gh WRKY106-1 干扰载体的构建 | 第57-58页 |
| 5.2.2 材料的种植 | 第58页 |
| 5.2.3 注射菌液的制备 | 第58页 |
| 5.2.4 菌液的注射 | 第58页 |
| 5.2.5 基因沉默效率的观察和测定 | 第58-59页 |
| 5.2.6 枯萎病菌接菌实验 | 第59页 |
| 5.2.7 干扰植株PRs基因的表达分析 | 第59页 |
| 5.2.8 农杆菌侵染花柱头法田间转化Gh WRKY106-1 基因 | 第59-60页 |
| 5.3 结果与分析 | 第60-65页 |
| 5.3.1 p TRV2-GR-WRKY106-1 干扰载体的构建 | 第60-62页 |
| 5.3.2 VIGS干扰体系的建立 | 第62-63页 |
| 5.3.3 Gh WRKY106-1 基因的沉默效果检测 | 第63-64页 |
| 5.3.4 Gh WRKY106-1 基因沉默后棉花的抗病性鉴定 | 第64-65页 |
| 5.3.5 农杆菌侵染花柱头法田间转化Gh WRKY106-1 基因 | 第65页 |
| 5.4 讨论 | 第65-68页 |
| 第六章 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77-78页 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第78页 |
