中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略语 | 第12-14页 |
引言 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 布鲁氏菌致病的分子机制研究 | 第16-25页 |
1 布鲁氏菌的胞内生存机制 | 第16-18页 |
1.1 布鲁氏菌对宿主细胞的侵入过程 | 第16-17页 |
1.2 布鲁氏菌在胞内的生存与运输 | 第17页 |
1.3 布鲁氏菌在胞内的复制 | 第17-18页 |
2 布鲁氏菌与炎症反应 | 第18-20页 |
2.1 炎性小体 | 第18-19页 |
2.2 线粒体与炎性小体 | 第19-20页 |
2.3 炎性小体与布鲁氏菌感染 | 第20页 |
3 布鲁氏菌与自噬反应 | 第20-22页 |
3.1 细胞自噬的机制 | 第20-21页 |
3.2 线粒体调控细胞自噬 | 第21-22页 |
3.3“分子刹车”p62蛋白可抑制炎症的发生 | 第22页 |
3.4 细胞自噬与布鲁氏菌感染 | 第22页 |
4 布鲁氏菌与凋亡反应 | 第22-25页 |
4.1 细胞自噬与凋亡 | 第22-23页 |
4.2 细胞凋亡机制 | 第23页 |
4.3 线粒体调控细胞凋亡 | 第23-24页 |
4.4 细胞凋亡与布鲁氏菌感染 | 第24-25页 |
第二章 实验研究 | 第25-103页 |
实验一 AIR干扰、过表达和回复细胞系的构建与鉴定 | 第25-42页 |
1 材料与方法 | 第25-36页 |
1.1 材料 | 第25-26页 |
1.2 方法 | 第26-36页 |
2 结果 | 第36-40页 |
2.1 目的基因AIR的扩增与重组质粒的构建 | 第36-37页 |
2.2 细胞支原体检测 | 第37页 |
2.3 荧光显微镜观察慢病毒包装和感染效果 | 第37-38页 |
2.4 检测AIR基因在不同处理组细胞中的表达量 | 第38-40页 |
3 讨论 | 第40-41页 |
3.1 慢病毒载体的优势及对本实验的影响 | 第40-41页 |
3.2 慢病毒载体在疾病的预防和治疗中的作用 | 第41页 |
4 小结 | 第41-42页 |
实验二 初步探究AIR对布鲁氏菌感染引发炎症反应的影响 | 第42-70页 |
1 材料与方法 | 第43-52页 |
1.1 材料 | 第43页 |
1.2 方法 | 第43-52页 |
2 结果 | 第52-68页 |
2.1 布鲁氏菌的鉴定 | 第52页 |
2.2 16M侵染对各组细胞ROS产生水平的影响 | 第52-54页 |
2.3 MIito-ID? Red检测 16M侵染后线粒体的分布 | 第54-56页 |
2.4 电子显微镜观察线粒体分布情况 | 第56-57页 |
2.5 炎性相关基因Caspase-1、NLRP3、AIM2和ASC在基因水平的表达 | 第57-64页 |
2.6 ELISA检测 16M侵染后IL-1β、IL-18和Caspase-1 的表达量 | 第64-66页 |
2.7 NLRP3、Caspase-1 p10在蛋白水平上的表达 | 第66-68页 |
3 讨论 | 第68-69页 |
3.1 固有免疫与布鲁氏菌 | 第68页 |
3.2 固有免疫与ROS | 第68-69页 |
4 小结 | 第69-70页 |
实验三 初步探究AIR对由布鲁氏菌感染引发的自噬的影响 | 第70-88页 |
1 材料与方法 | 第70-73页 |
1.1 材料 | 第70-71页 |
1.2 方法 | 第71-73页 |
2 结果 | 第73-86页 |
2.1 RAW264.7-LC3细胞系的验证 | 第73-74页 |
2.2 激光共聚焦显微镜检测LC3与线粒体共定位 | 第74-78页 |
2.3 透射电子显微镜观察自噬小体的形成 | 第78-79页 |
2.4 qRT-PCR在mRNA水平检测自噬相关因子的表达量 | 第79-86页 |
2.5 Western blot检测p62蛋白的表达水平 | 第86页 |
3 讨论 | 第86-87页 |
3.1 细胞自噬与布鲁氏菌感染 | 第86页 |
3.2 ROS与自噬 | 第86-87页 |
4 小结 | 第87-88页 |
实验四 初步探究AIR对布鲁氏菌感染引发凋亡的影响 | 第88-103页 |
1 材料与方法 | 第88-91页 |
1.1 材料 | 第88-89页 |
1.2 方法 | 第89-91页 |
2 结果 | 第91-101页 |
2.1 凋亡相关基因Bcl-2 和Bax在mRNA水平上的表达情况 | 第91-96页 |
2.2 激光共聚焦显微镜检测各组细胞凋亡 | 第96页 |
2.3 透射电子显微镜检测各组细胞的凋亡 | 第96-97页 |
2.4 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率 | 第97-100页 |
2.5 Western blot检测 16M侵染对Caspase-3 蛋白表达量的影响 | 第100-101页 |
3 讨论 | 第101-102页 |
3.1 布鲁氏菌与凋亡 | 第101页 |
3.2 Bcl-2、ROS与自噬 | 第101-102页 |
4 小结 | 第102-103页 |
全文总结 | 第103-104页 |
创新点 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
作者简介 | 第112-113页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第113页 |