| 中文摘要 | 第6-7页 |
| Summary | 第7-8页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 犬细小病毒的研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1.1 病原学 | 第10-11页 |
| 1.1.2 流行病学 | 第11页 |
| 1.1.3 临床症状 | 第11-12页 |
| 1.1.4 病理变化 | 第12页 |
| 1.1.5 诊断 | 第12-13页 |
| 1.1.6 防治 | 第13-14页 |
| 1.2 单克隆抗体药物的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 鼠源单克隆抗体 | 第14-15页 |
| 1.2.2 人源化嵌合抗体 | 第15页 |
| 1.2.3 人源化改型抗体 | 第15-16页 |
| 1.2.4 全人源抗体 | 第16-17页 |
| 1.2.5 抗体药物的未来展望 | 第17页 |
| 1.3 重组抗体技术的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 检测犬免疫球蛋白G的夹心ELISA方法的建立 | 第20-34页 |
| 2.1 材料与设备 | 第20-22页 |
| 2.1.1 实验材料和试剂 | 第20-22页 |
| 2.1.2 主要设备和仪器 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 犬血清中IgG的获得和浓度测定 | 第22-23页 |
| 2.2.2 犬IgG纯度鉴定 | 第23页 |
| 2.2.3 ELISA方法建立 | 第23-24页 |
| 2.2.4 特异性试验 | 第24-25页 |
| 2.2.5 敏感性试验 | 第25页 |
| 2.2.6 犬细小阳性血清和阴性血清IgG含量比较 | 第25页 |
| 2.3 结果 | 第25-32页 |
| 2.3.1 纯化IgG浓度测定 | 第25-26页 |
| 2.3.2 纯化IgG纯度测定 | 第26-27页 |
| 2.3.3 ELISA方法最优条件的确立 | 第27-30页 |
| 2.3.4 特异性试验 | 第30-31页 |
| 2.3.5 敏感性试验 | 第31-32页 |
| 2.3.6 细小阳性血清和阴性血清IgG含量比较 | 第32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 嵌合抗体重链?轻链全长基因的扩增与重组质粒的构建 | 第34-53页 |
| 3.1 材料与设备 | 第34-35页 |
| 3.1.1 细胞?质粒及主要试剂 | 第34页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 3.2 方法 | 第35-47页 |
| 3.2.1 鼠源单克隆抗体轻链?重链可变区的扩增 | 第35-39页 |
| 3.2.2 犬源抗体轻链?重链恒定区的扩增 | 第39-40页 |
| 3.2.3 犬-鼠嵌合抗体轻链?重链全长序列的扩增 | 第40-46页 |
| 3.2.4 重组质粒的构建 | 第46页 |
| 3.2.5 重组质粒的小量提取 | 第46页 |
| 3.2.6 重组质粒的鉴定 | 第46-47页 |
| 3.3 结果 | 第47-51页 |
| 3.3.1 杂交瘤细胞基因可变区的扩增 | 第47页 |
| 3.3.2 杂交瘤细胞基因可变区的序列分析 | 第47-48页 |
| 3.3.3 犬IgG抗体恒定区基因的扩增 | 第48-49页 |
| 3.3.4 犬-鼠嵌合抗体重链?轻链全长基因的扩增 | 第49-50页 |
| 3.3.5 重组质粒的酶切鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 嵌合抗体的表达与纯化 | 第53-65页 |
| 4.1 材料 | 第53-55页 |
| 4.1.1 细胞?质粒和主要试剂 | 第53页 |
| 4.1.2 细胞表达所用试剂 | 第53页 |
| 4.1.3 ELISA所用试剂 | 第53-54页 |
| 4.1.4 嵌合抗体纯化所用试剂 | 第54页 |
| 4.1.5 主要仪器 | 第54-55页 |
| 4.2 方法 | 第55-60页 |
| 4.2.1 重组质粒的的大量提取 | 第55-56页 |
| 4.2.2 CHO细胞的复苏 | 第56页 |
| 4.2.3 CHO细胞的培养 | 第56页 |
| 4.2.4 细胞的转染 | 第56-57页 |
| 4.2.5 ELISA检测 | 第57-58页 |
| 4.2.6 犬-鼠嵌合抗体纯化 | 第58页 |
| 4.2.7 犬-鼠嵌合抗体纯化的鉴定 | 第58-60页 |
| 4.3 结果 | 第60-63页 |
| 4.3.1 ELISA检测重组质粒的表达 | 第60-61页 |
| 4.3.2 嵌合抗体的纯化结果 | 第61-63页 |
| 4.4 讨论 | 第63-65页 |
| 第五章 全文结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录Ⅰ | 第70-71页 |
