| 摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第14-33页 |
| 1.1 益生菌 | 第14-19页 |
| 1.1.1 益生菌概述 | 第14-16页 |
| 1.1.2 益生菌抗病毒研究进展 | 第16-17页 |
| 1.1.3 益生菌在水产养殖中的应用 | 第17-18页 |
| 1.1.4 益生菌作为黏膜疫苗递送载体的研究 | 第18-19页 |
| 1.2 传染性造血器官坏死病及传染性造血器官坏死病病毒 | 第19-22页 |
| 1.2.1 传染性造血器官坏死病概述 | 第19页 |
| 1.2.2 传播途径 | 第19-20页 |
| 1.2.3IHN的流行病学调查 | 第20页 |
| 1.2.4 临床症状 | 第20-21页 |
| 1.2.5 危害 | 第21页 |
| 1.2.6 疾病的防治措施 | 第21-22页 |
| 1.3 传染性造血器官坏死病的病原学特征 | 第22-23页 |
| 1.3.1 传染性造血器官坏死病病毒的分类地位与形态特征 | 第22页 |
| 1.3.2 传染性造血器官坏死病病毒的理化特性及培养特性 | 第22页 |
| 1.3.3 传染性造血器官坏死病病毒的结构蛋白及其特性 | 第22-23页 |
| 1.4 鱼类免疫系统 | 第23-28页 |
| 1.4.1 鱼类的主要免疫器官和免疫组织 | 第23-25页 |
| 1.4.2 鱼类的主要免疫细胞 | 第25-26页 |
| 1.4.3 细胞免疫及其免疫细胞因子 | 第26-27页 |
| 1.4.4 体液免疫及其免疫因子 | 第27-28页 |
| 1.5 鱼用疫苗的研究现状 | 第28-33页 |
| 1.5.1 鱼类疫苗的种类 | 第28-30页 |
| 1.5.2 疫苗的接种途径 | 第30-31页 |
| 1.5.3 我国鱼用疫苗的发展前景及存在问题 | 第31-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-49页 |
| 2.1 材料 | 第33-35页 |
| 2.1.1 基因工程菌株、载体，实验动物 | 第33页 |
| 2.1.2 细胞及病毒 | 第33页 |
| 2.1.3 引物 | 第33-34页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第34页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 2.2 试验方法 | 第35-49页 |
| 2.2.1 IHNV增殖，RNA的提取、反转录及鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.2 虹鳟鱼体内菌株的分离、纯化 | 第36-37页 |
| 2.2.3 虹鳟鱼体内菌株的温度梯度筛选 | 第37页 |
| 2.2.4 虹鳟鱼体内嗜冷菌株的鉴定 | 第37-39页 |
| 2.2.5 虹鳟鱼体内嗜冷菌株的益生特性筛选 | 第39-40页 |
| 2.2.6 虹鳟鱼体内嗜冷菌株的抗病毒特性筛选（一） | 第40-41页 |
| 2.2.7 虹鳟鱼体内嗜冷菌株的抗病毒特性筛选（二） | 第41-43页 |
| 2.2.8 对6株候选嗜冷益生菌株抗病毒特性体外验证 | 第43页 |
| 2.2.9 虹鳟鱼体内嗜冷益生菌株的生理生化试验 | 第43-44页 |
| 2.2.10候选菌株的包被、饲喂程序的制定及安全性评价 | 第44-46页 |
| 2.2.11 候选菌株在虹鳟体内抗病毒特性验证及免疫效果评价 | 第46-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-73页 |
| 3.1 IHNV增殖、滴度测定及PCR鉴定结果 | 第49-50页 |
| 3.2 虹鳟鱼体内菌株的分离结果 | 第50页 |
| 3.3 虹鳟鱼体内菌株的温度梯度筛选结果 | 第50-51页 |
| 3.4 虹鳟鱼体内嗜冷菌株的鉴定结果 | 第51-54页 |
| 3.4.1 16S rDNA序列分析比对结果 | 第51-52页 |
| 3.4.2 菌落形态及革兰氏染色结果 | 第52-54页 |
| 3.5 虹鳟鱼体内嗜冷菌株的益生特性筛选结果 | 第54-56页 |
| 3.5.1 菌体与EPC细胞共培养益生特性筛选结果 | 第54页 |
| 3.5.2 菌液培养上清与EPC细胞共培养益生特性筛选结果 | 第54-55页 |
| 3.5.3 菌液与EPC细胞共培养益生特性筛选结果 | 第55-56页 |
| 3.6 虹鳟鱼体内嗜冷菌株的抗病毒特性筛选（一） | 第56-58页 |
| 3.6.1 菌体与EPC细胞共培养体外抗病毒特性筛选筛选结果 | 第56页 |
| 3.6.2 菌液培养上清与EPC细胞共培养体外抗病毒特性筛选结果 | 第56-57页 |
| 3.6.3 菌液培养上清与EPC细胞共培养体外抗病毒特性筛选结果 | 第57-58页 |
| 3.7 虹鳟鱼体内嗜冷菌株的抗病毒特性筛选（二） | 第58-59页 |
| 3.7.1 运用TNF-α 诱导HT29-cells System对虹鳟嗜冷菌株进行筛选 | 第58页 |
| 3.7.2 运用PBMCs System对虹鳟嗜冷菌株进行筛选 | 第58-59页 |
| 3.8 虹鳟鱼体内嗜冷益生菌株的生理生化特性试验 | 第59-64页 |
| 3.8.1 耐酸、耐胆酸游离酸实验 | 第59-61页 |
| 3.8.2 候选菌株最适培养基及p H测定 | 第61-62页 |
| 3.8.3 生长曲线测定 | 第62页 |
| 3.8.4 API及普通生化反应鉴定结果 | 第62-64页 |
| 3.9 候选菌株投喂方式的改进 | 第64-65页 |
| 3.9.1 饲料携带菌株方式 | 第64页 |
| 3.9.2 饲料携带菌株方法优化 | 第64-65页 |
| 3.10 候选菌株的安全性评价及免疫效果评价结果 | 第65-68页 |
| 3.10.1 候选菌株的安全性评价结果 | 第65页 |
| 3.10.2 血清中ACH50、Ig M、SOD、LYS及IL-2 的测定 | 第65-67页 |
| 3.10.3 免疫细胞活性测定 | 第67-68页 |
| 3.11 虹鳟嗜冷益生菌体内抗病毒试验结果 | 第68-73页 |
| 3.11.1 IHNV攻毒半数致死量的测定（LD50） | 第68页 |
| 3.11.2 攻毒保护试验结果 | 第68-69页 |
| 3.11.3 血清中ACH50、Ig M、SOD、LYS及IL-2 的测定 | 第69-71页 |
| 3.11.4 脾脏体指数 ( Spleen Body Index， SBI) | 第71页 |
| 3.11.5 血清抗体IgM效价的变化 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-77页 |
| 4.1 虹鳟嗜冷菌株的分离、嗜冷菌株筛选及鉴定 | 第73页 |
| 4.2 虹鳟嗜冷菌株益生特性筛选 | 第73页 |
| 4.3 虹鳟嗜冷益生菌株多重抗病毒特性筛选 | 第73-74页 |
| 4.4 虹鳟嗜冷抗病毒益生菌株生理特性 | 第74-75页 |
| 4.5 虹鳟嗜冷抗病毒益生候选菌株体内安全性评价 | 第75-76页 |
| 4.6 虹鳟嗜冷抗病毒益生菌株体内抗病毒特性验证 | 第76-77页 |
| 5 结论 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 附录 | 第88-89页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第89页 |
