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西瓜嗜酸菌趋化性测定及趋化基因cheA和cheY功能研究

附件第5-6页
摘要第6-7页
Abstract第7页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-24页
    1.1 瓜类细菌性果斑病(BFB)第13-16页
        1.1.1 瓜类细菌性果斑病的发生及发病症状第13-14页
        1.1.2 瓜类细菌性果斑病病原菌的研究第14-15页
        1.1.3 瓜类细菌性果斑病防治措施第15-16页
    1.2 细菌趋化性第16-22页
        1.2.1 趋化性细菌的运动方式第16-17页
        1.2.2 细菌趋化性分子机制第17-21页
        1.2.3 趋化性在微生物致病机理中的作用第21-22页
        1.2.4 细菌趋化性的作用第22页
    1.3 研究目的意义及内容第22-24页
第二章 西瓜嗜酸菌趋化性的初步测定第24-31页
    2.1 材料第24-25页
        2.1.1 菌种第24页
        2.1.2 培养基及试剂第24-25页
    2.2 方法第25-26页
        2.2.1 趋化待测液的制备第25页
        2.2.2 菌液的制备第25页
        2.2.3 趋化反应实验第25页
        2.2.4 碳源对西瓜嗜酸菌趋化性的影响第25页
        2.2.5 氨基酸对西瓜嗜酸菌趋化性的影响第25-26页
        2.2.6 有机酸对西瓜嗜酸菌趋化性的影响第26页
        2.2.7 氯化钠等对西瓜嗜酸菌趋化性的影响第26页
        2.2.8 数据分析第26页
    2.3 结果与分析第26-30页
        2.3.1 碳源对西瓜嗜酸菌趋化性的影响第26-27页
        2.3.4 氨基酸对西瓜嗜酸菌趋化性的影响第27-28页
        2.3.5 有机酸对西瓜嗜酸菌趋化性的影响第28-29页
        2.3.6 氯化钠等对西瓜嗜酸菌趋化性的影响第29-30页
    2.4 讨论第30-31页
第三章 西瓜嗜酸菌趋化相关基因的生物信息学预测分析第31-36页
    3.1 实验材料第31页
    3.2 实验方法第31页
    3.3 结果与分析第31-35页
        3.3.1 che部分趋化基因的核苷酸及氨基酸的序列特征第31-32页
        3.3.2 趋化信号转导通路第32页
        3.3.3 疏水性分析第32-33页
        3.3.4 跨膜结构域预测第33页
        3.3.5 二级结构预测第33-34页
        3.3.6 细菌CheA核心蛋白氨基酸序列分析及系统发育树的构建第34-35页
    3.4 讨论第35-36页
第四章 西瓜嗜酸菌趋化基因cheA和cheY的功能分析第36-55页
    4.1 试验材料第36-37页
        4.1.1 植物、菌株、质粒及引物第36页
        4.1.2 培养基及培养条件第36-37页
        4.1.3 生化试剂第37页
        4.1.4 主要仪器第37页
    4.2 实验方法第37-45页
        4.2.1 引物设计第37-38页
        4.2.2 自杀性重组质粒的构建及突变体的筛选第38-43页
        4.2.3 重组质粒的构建及互补菌株筛选第43页
        4.2.4 趋化性测定第43-44页
        4.2.5 鞭毛观察第44页
        4.2.6 菌落边缘形态的观察第44页
        4.2.7 致病性与过敏性测定第44页
        4.2.8 生物膜测定第44-45页
        4.2.9 运动性测定第45页
        4.2.10 种子表面定殖能力测定第45页
    4.3 结果与分析第45-54页
        4.3.1 自杀性重组质粒的验证第45-46页
        4.3.2 突变菌株的验证第46-47页
        4.3.3 CcheA互补菌株的验证第47页
        4.3.4 趋化性测定第47-50页
        4.3.5 电镜观察第50页
        4.3.6 菌落边缘形态观察第50-51页
        4.3.7 致病性和过敏性测定第51-53页
        4.3.8 生物膜形成测定第53页
        4.3.9 运动性测定第53-54页
        4.3.10 种子表面定殖能力测定第54页
    4.4 讨论第54-55页
第五章 cheA基因对相关基因表达量的影响第55-60页
    5.1 材料第55页
        5.1.1 供试菌株第55页
        5.1.2 仪器与试剂第55页
    5.2 实验方法第55-58页
        5.2.1 荧光定量PCR引物的设计第55-56页
        5.2.2 细菌总RNA的提取第56页
        5.2.3 RNA反转录第56-57页
        5.2.4 荧光定量PCR反应第57页
        5.2.5 数据分析第57-58页
    5.3 结果与分析第58-59页
        5.3.1 西瓜嗜酸菌总RNA提取第58页
        5.3.2 cheA突变株中相关基因的表达第58-59页
    5.4 讨论第59-60页
第六章 全文结论第60-61页
参考文献第61-67页
致谢第67页
基金第67-68页
作者简历第68页

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