| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-24页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第13-14页 |
| 1.2 FHL2 的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 FHL2 的基本结构 | 第14-15页 |
| 1.2.2 FHL2 的功能研究 | 第15-17页 |
| 1.3 FHL2 在动物机体各组织包括卵巢组织中的表达定位 | 第17-18页 |
| 1.4 FHL2 对小鼠卵泡发育可能的调控作用 | 第18-22页 |
| 1.4.1 卵泡发育的相关调控因子及机制 | 第18-19页 |
| 1.4.2 对细胞增殖与凋亡及细胞周期的调控作用 | 第19-21页 |
| 1.4.3 对细胞分泌类固醇激素的调控作用 | 第21-22页 |
| 1.5 FHL2 对卵泡生长发育可能的调控机制 | 第22-23页 |
| 1.6 本试验目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料 | 第24-29页 |
| 2.1 实验动物 | 第24页 |
| 2.2 主要试剂与耗材 | 第24-25页 |
| 2.3 主要试剂盒 | 第25页 |
| 2.4 主要引物 | 第25-26页 |
| 2.5 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.6 主要溶液配制 | 第27-29页 |
| 3 方法 | 第29-42页 |
| 3.1 总RNA的提取 | 第29-30页 |
| 3.2 cDNA第一链合成 | 第30-31页 |
| 3.3 组织切片的制备及免疫组化 | 第31-32页 |
| 3.4 小鼠卵巢颗粒细胞的培养与传代 | 第32-33页 |
| 3.4.1 细胞的分离培养 | 第32-33页 |
| 3.4.2 换液与传代 | 第33页 |
| 3.5 细胞免疫荧光 | 第33-34页 |
| 3.6 干扰质粒的克隆与纯化提取 | 第34-35页 |
| 3.6.1 质粒的扩大培养 | 第34页 |
| 3.6.2 质粒大提 | 第34-35页 |
| 3.7 细胞的转染 | 第35-36页 |
| 3.8 蛋白印迹 | 第36-37页 |
| 3.9 实时定量PCR | 第37-38页 |
| 3.10 细胞凋亡检测 | 第38-39页 |
| 3.11 细胞周期检测 | 第39页 |
| 3.12 MTT法检测细胞增殖 | 第39-40页 |
| 3.13 ELISA检测雌激素和孕激素的浓度 | 第40-41页 |
| 3.14 试验设计 | 第41页 |
| 3.14.1 FHL2 在小鼠卵巢中的表达定位 | 第41页 |
| 3.14.2 shFHL2 干扰时间的筛选 | 第41页 |
| 3.14.3 FHL2 对颗粒细胞的调控作用 | 第41页 |
| 3.15 统计分析 | 第41-42页 |
| 4 结果与分析 | 第42-52页 |
| 4.1 小鼠卵巢组织中FHL2 的表达模式 | 第42-43页 |
| 4.2 FHL2 在小鼠卵巢组织上的表达定位 | 第43页 |
| 4.3 FHL2 在体外培养的小鼠卵巢颗粒细胞中的表达模式 | 第43-44页 |
| 4.4 FHL2 干扰质粒的克隆与纯化提取 | 第44-45页 |
| 4.5 shFHL2 质粒干扰效果鉴定 | 第45-46页 |
| 4.5.1 mRNA水平上检测shFHL2 干扰效果 | 第45页 |
| 4.5.2 蛋白水平上检测shFHL2 的干扰效果 | 第45-46页 |
| 4.6 转染shFHL2 后对颗粒细胞凋亡的影响 | 第46-48页 |
| 4.7 shFHL2 干扰对颗粒细胞周期的影响 | 第48-50页 |
| 4.8 转染shFHL2 后对颗粒细胞增殖的影响 | 第50页 |
| 4.9 转染shFHL2 后对类固醇激素分泌的影响 | 第50-52页 |
| 5 讨论 | 第52-57页 |
| 5.1 FHL2 在小鼠卵泡和颗粒细胞中的表达定位 | 第52-53页 |
| 5.2 FHL2 对小鼠颗粒细胞的增殖、凋亡以及周期的调控作用 | 第53-55页 |
| 5.3 FHL2 对小鼠颗粒细胞的类固醇激素分泌的调控作用 | 第55-57页 |
| 6 总结 | 第57-59页 |
| 6.1 本研究主要结果 | 第57页 |
| 6.2 本研究的创新点 | 第57-58页 |
| 6.3 本研究的不足之处与下一步计划 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
