摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一部分 研究背景 | 第10-27页 |
一、秀丽隐杆线虫是研究寿命调控的良好模型 | 第10-11页 |
二、参与寿命调控的主要转录因子 | 第11-15页 |
三、GATA转录因子ELT-2 在寿命调控中发挥重要作用 | 第15-19页 |
(一) GATA转录因子家族 | 第15-16页 |
(二) 转录因子ELT-2 的主要功能 | 第16-19页 |
四、O-GlcNAc修饰及O-GlcNAc转移酶OGT的研究进展 | 第19-25页 |
(一) O-GlcNAc修饰及OGT概述 | 第19-20页 |
(二) O-GlcNAc修饰的生物学功能 | 第20-23页 |
(三) 线虫中O-GlcNAc修饰和OGT-1 的研究进展 | 第23-24页 |
(四) 调控OGT活性的主要途径 | 第24-25页 |
五、本论文的立题依据和研究意义 | 第25-27页 |
(一)立题依据 | 第25-26页 |
(二)研究内容和意义 | 第26-27页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第27-51页 |
一、实验材料 | 第27-29页 |
(一) 实验线虫品系 | 第27页 |
(二) 实验细胞品系 | 第27页 |
(三) 细菌菌株 | 第27页 |
(四) 质粒 | 第27-28页 |
(五) 主要试剂 | 第28页 |
(六) 主要仪器 | 第28-29页 |
二、实验方法 | 第29-51页 |
(一) 线虫的常规培养 | 第29-30页 |
(二) 线虫的同期化处理 | 第30-31页 |
(三) 线虫的冻存和复苏 | 第31-32页 |
(四) 线虫的RNAi处理 | 第32-34页 |
(五) 寿命分析 | 第34页 |
(六) PCR | 第34-37页 |
(七) 载体构建 | 第37-41页 |
(八) 双报告实验 | 第41-42页 |
(九) GST融合蛋白的原核诱导表达及纯化 | 第42-43页 |
(十) Western Blot实验 | 第43-46页 |
(十一) 激光共聚焦实验 | 第46-47页 |
(十二) 凝胶迁移实验(EMSA) | 第47-51页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第51-60页 |
一、OGT-1 在肠道及咽部的表达水平随着线虫的衰老进程逐渐降低 | 第51-53页 |
二、转录因子ELT-2 激活ogt-1 的表达 | 第53-56页 |
三、ELT-2 通过与ogt-1 启动子特异性结合激活ogt-1 启动子活性 | 第56-58页 |
四、ELT-2 影响OGT-1 调控寿命的功能 | 第58-60页 |
第四部分 讨论 | 第60-63页 |
第五部分 结论和创新点 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-73页 |
致谢 | 第73页 |