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GATA转录因子ELT-2调控ogt-1转录及影响秀丽隐杆线虫寿命的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一部分 研究背景第10-27页
    一、秀丽隐杆线虫是研究寿命调控的良好模型第10-11页
    二、参与寿命调控的主要转录因子第11-15页
    三、GATA转录因子ELT-2 在寿命调控中发挥重要作用第15-19页
        (一) GATA转录因子家族第15-16页
        (二) 转录因子ELT-2 的主要功能第16-19页
    四、O-GlcNAc修饰及O-GlcNAc转移酶OGT的研究进展第19-25页
        (一) O-GlcNAc修饰及OGT概述第19-20页
        (二) O-GlcNAc修饰的生物学功能第20-23页
        (三) 线虫中O-GlcNAc修饰和OGT-1 的研究进展第23-24页
        (四) 调控OGT活性的主要途径第24-25页
    五、本论文的立题依据和研究意义第25-27页
        (一)立题依据第25-26页
        (二)研究内容和意义第26-27页
第二部分 实验材料与方法第27-51页
    一、实验材料第27-29页
        (一) 实验线虫品系第27页
        (二) 实验细胞品系第27页
        (三) 细菌菌株第27页
        (四) 质粒第27-28页
        (五) 主要试剂第28页
        (六) 主要仪器第28-29页
    二、实验方法第29-51页
        (一) 线虫的常规培养第29-30页
        (二) 线虫的同期化处理第30-31页
        (三) 线虫的冻存和复苏第31-32页
        (四) 线虫的RNAi处理第32-34页
        (五) 寿命分析第34页
        (六) PCR第34-37页
        (七) 载体构建第37-41页
        (八) 双报告实验第41-42页
        (九) GST融合蛋白的原核诱导表达及纯化第42-43页
        (十) Western Blot实验第43-46页
        (十一) 激光共聚焦实验第46-47页
        (十二) 凝胶迁移实验(EMSA)第47-51页
第三部分 实验结果与分析第51-60页
    一、OGT-1 在肠道及咽部的表达水平随着线虫的衰老进程逐渐降低第51-53页
    二、转录因子ELT-2 激活ogt-1 的表达第53-56页
    三、ELT-2 通过与ogt-1 启动子特异性结合激活ogt-1 启动子活性第56-58页
    四、ELT-2 影响OGT-1 调控寿命的功能第58-60页
第四部分 讨论第60-63页
第五部分 结论和创新点第63-64页
参考文献第64-73页
致谢第73页

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