中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第11-13页 |
前言 | 第13-17页 |
一、小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎模型建立 | 第17-25页 |
1.1 对象和方法 | 第17-20页 |
1.1.1 实验对象 | 第17页 |
1.1.2 实验仪器、材料 | 第17页 |
1.1.3 主要试剂 | 第17页 |
1.1.4 实验所需主要工作液的配制 | 第17-18页 |
1.1.5 实验方法 | 第18-20页 |
1.1.5.1 建立稳定的小鼠EAT模型 | 第18页 |
1.1.5.2 甲状腺组织石蜡切片制备与病理检验 | 第18-19页 |
1.1.5.2.1 组织固定、包埋 | 第18-19页 |
1.1.5.2.2 HE染色 | 第19页 |
1.1.5.3 ELISA检测EAT模型小鼠甲状腺功能 | 第19-20页 |
1.1.5.4 各组小鼠脾脏指数检测 | 第20页 |
1.1.6 统计学方法 | 第20页 |
1.2 结果 | 第20-24页 |
1.2.1 小鼠甲状腺组织病理改变情况 | 第20-21页 |
1.2.2 2组小鼠血清TPOAb、TMAb、TGAb水平 | 第21-23页 |
1.2.3 脾脏指数 | 第23-24页 |
1.3 讨论 | 第24页 |
1.4 小结 | 第24-25页 |
二、间充质干细胞治疗实验性自身免疫性甲状腺炎 | 第25-39页 |
2.1 对象和方法 | 第25-30页 |
2.1.1 实验对象 | 第25页 |
2.1.2 实验仪器与材料 | 第25页 |
2.1.3 实验主要试剂 | 第25-26页 |
2.1.4 实验所需主要工作液的配制 | 第26-27页 |
2.1.5 实验方法 | 第27-29页 |
2.1.5.1 MSCs细胞培养 | 第27-28页 |
2.1.5.2 流式细胞仪检测MSCs细胞表型 | 第28页 |
2.1.5.3 EAT模型的建立及MSCs治疗EAT小鼠 | 第28页 |
2.1.5.4 流式细胞仪检测脾细胞免疫功能改变 | 第28-29页 |
2.1.6 统计学分析 | 第29-30页 |
2.2 结果 | 第30-37页 |
2.2.1 MSCs细胞形态 | 第30页 |
2.2.2 MSCs细胞表面抗原检测 | 第30-31页 |
2.2.3 小鼠甲状腺组织病理改变情况 | 第31-32页 |
2.2.4 各组小鼠血清TPOAb、TMAb、TGAb水平 | 第32-34页 |
2.2.5 脾脏指数 | 第34-35页 |
2.2.6 脾细胞免疫功能改变情况 | 第35-37页 |
2.3 讨论 | 第37-38页 |
2.3.1 MSCs的分离培养与鉴定 | 第37页 |
2.3.2 MSCs对EAT模型小鼠甲状腺病理、血清相关抗体和脾脏指数的影响 | 第37-38页 |
2.3.3 MSCs治疗EAT模型小鼠后,脾细胞CD8+T细胞比例下调 | 第38页 |
2.4 小结 | 第38-39页 |
三、MSC防治实验性自身免疫性甲状腺炎的作用机制研究 | 第39-58页 |
3.1 对象和方法 | 第39-48页 |
3.1.1 实验对象 | 第39页 |
3.1.2 实验仪器、材料 | 第39页 |
3.1.3 主要试剂 | 第39-40页 |
3.1.4 部分试剂的配制: | 第40页 |
3.1.5 实验方法 | 第40-47页 |
3.1.5.1 EAT模型建立,MSCs细胞培养 | 第40页 |
3.1.5.2 免疫组织化学法检测各组小鼠凋亡蛋白Caspase3的表达 | 第40-41页 |
3.1.5.3 免疫荧光法检测各组小鼠Caspase3的表达 | 第41-42页 |
3.1.5.4 正常对照组、EAT模型组、MSCs治疗组小鼠甲状腺组织RNA提取、浓度测定、逆转录和Q‐PCR扩增 | 第42-45页 |
3.1.5.4.1 各组小鼠甲状腺组织细胞RNA的分离提取 | 第42-43页 |
3.1.5.4.2 各组小鼠甲状腺细胞提取RNA的浓度测定 | 第43页 |
3.1.5.4.3 各组小鼠甲状腺细胞RNA逆转录体系配制 | 第43-45页 |
3.1.5.5 实时荧光定量PCR检测甲状腺细胞内凋亡受体Fas的表达水平 | 第45页 |
3.1.5.6 MSCs中凋亡受体Fas检测 | 第45页 |
3.1.5.7 MSCs向小鼠甲状腺组织的归巢能力检测 | 第45-46页 |
3.1.5.8 EAT模型小鼠脾细胞,正常C57BL/6 小鼠甲状腺组织与MSCs体外共培养 | 第46-47页 |
3.1.5.8.1 分离获取EAT模型小鼠脾细胞 | 第46页 |
3.1.5.8.2 分离获取C57BL/6 正常对照组小鼠甲状腺组织 | 第46-47页 |
3.1.5.8.3 共培养 | 第47页 |
3.1.6 统计学分析 | 第47-48页 |
3.2 结果 | 第48-54页 |
3.2.1 免疫组织化学法检测各组小鼠甲状腺组织内Caspase3的蛋白表达水平 | 第48页 |
3.2.2 免疫荧光法检测各组小鼠甲状腺组织内凋亡蛋白Caspase3的表达水平 | 第48-49页 |
3.2.3 正常对照组、EAT模型组、MSCs治疗组小鼠甲状腺组织内检测凋亡因子FasL的表达 | 第49-50页 |
3.2.4 甲状腺细胞内凋亡因子的表达水平 | 第50-51页 |
3.2.5 MSCs中凋亡因子表达情况 | 第51-52页 |
3.2.6 MSCs归巢到甲状腺组织 | 第52页 |
3.2.7 间充质干细胞能够抑制EAT小鼠脾细胞对小鼠甲状腺组织的凋亡 | 第52-54页 |
3.3 讨论 | 第54-56页 |
3.3.1 MSCs治疗EAT小鼠后,各组凋亡蛋白Caspase3的表达水平不同 | 第54页 |
3.3.2 MSCs细胞移植后,EAT小鼠中凋亡因子FasL的表达显著降低 | 第54-55页 |
3.3.3 甲状腺组织及MSCs中均高表达凋亡受体Fas | 第55页 |
3.3.4 MSCs能够归巢至甲状腺组织,发挥免疫调节作用,抑制实验性自身免疫性甲状腺炎的凋亡 | 第55-56页 |
3.3.5 MSCs能够抑制EAT小鼠脾细胞对正常小鼠甲状腺组织的杀伤作用 | 第56页 |
3.4 小结 | 第56-58页 |
结论 | 第58-59页 |
论文创新点 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第68-69页 |
综述 | 第69-79页 |
综述参考文献 | 第72-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
个人简历 | 第80页 |