| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 1 研究内容和技术路线 | 第12-13页 |
| 1.1 研究内容 | 第12-13页 |
| 1.2 技术路线 | 第13页 |
| 2 心肌细胞的培养 | 第13-14页 |
| 3 确定适宜的低氧处理时间 | 第14-16页 |
| 3.1 实验主要仪器和试剂 | 第14页 |
| 3.2 实验方法及步骤 | 第14-15页 |
| 3.3 实验结果 | 第15-16页 |
| 4 MicroRNA-206 模拟物以及抑制剂转染 | 第16-19页 |
| 4.1 主要实验仪器和试剂 | 第16页 |
| 4.2 实验方法及步骤 | 第16-17页 |
| 4.3 实验结果 | 第17-19页 |
| 5 MTT法测干扰microRNA-206 后各组H9c2心肌细胞活力改变 | 第19-22页 |
| 5.1 实验主要仪器和试剂 | 第19页 |
| 5.2 实验方法及步骤 | 第19-20页 |
| 5.3 实验结果 | 第20-22页 |
| 6 AnnexinV/PI双标法流式细胞术检测干扰后各组H9c2细胞凋亡率 | 第22-26页 |
| 6.1 实验主要仪器和试剂 | 第22页 |
| 6.2 实验方法及步骤 | 第22-24页 |
| 6.3 实验结果 | 第24-26页 |
| 7 qRT-PCR检测microRNA-206 及其靶基因mRNA水平 | 第26-31页 |
| 7.1 实验主要仪器和试剂 | 第26页 |
| 7.2 实验方法及步骤 | 第26-29页 |
| 7.2.1 使用RNeasy? Plus Mini Kit试剂盒抽提纯化总RNA | 第26-27页 |
| 7.2.2 RNA浓度和纯度的检测 | 第27页 |
| 7.2.3 逆转录合成cDNA | 第27-28页 |
| 7.2.4 荧光定量PCR检测microRNA-206 和mRNA水平 | 第28-29页 |
| 7.3 实验结果 | 第29-31页 |
| 7.3.1 低氧处理 48 h后，心肌细胞microRNA-206 的表达差异 | 第29-30页 |
| 7.3.2 低氧环境下干扰microRNA-206 后各组靶基因的mRNA水平变化 | 第30-31页 |
| 8 Western Blot检测干扰后各组EGFR、HIF-1α和IGF-1 蛋白表达水平变化 | 第31-36页 |
| 8.1 实验主要仪器和试剂 | 第31-32页 |
| 8.2 实验方法及步骤 | 第32-34页 |
| 8.2.1 提取细胞蛋白 | 第32页 |
| 8.2.2 BCA法测蛋白浓度 | 第32-33页 |
| 8.2.3 SDS－PAGE电泳 | 第33页 |
| 8.2.4 转膜 | 第33页 |
| 8.2.5 封闭、一抗和二抗的孵育 | 第33-34页 |
| 8.2.6 曝光 | 第34页 |
| 8.3 实验结果 | 第34-36页 |
| 9 双荧光素酶报告载体（EGFR 3’UTR和HIF-13’UTR）的构建及其鉴定 | 第36-38页 |
| 9.1 实验主要仪器和试剂 | 第36页 |
| 9.2 实验方法及步骤 | 第36-38页 |
| 9.2.1 双荧光素酶载体的构建 | 第36页 |
| 9.2.2 细胞转染 | 第36-37页 |
| 9.2.3 双荧光素酶活性鉴定 | 第37-38页 |
| 9.3 实验结果 | 第38页 |
| 10 统计分析 | 第38页 |
| 11 讨论 | 第38-41页 |
| 12 全文结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 附录A 中英文缩略词表 | 第44-45页 |
| 附录B 综述 | 第45-56页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 在学研究成果 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
