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四氢生物蝶呤通过蛋白激酶Cε途径对醋酸脱氧皮质酮—盐型高血压小鼠左室舒张功能的影响

中文摘要第3-4页
英文摘要第4-6页
前言第11-13页
1. 材料第13-16页
    1.1 主要试剂第13-16页
        1.1.1 动物及造模主要试剂第13页
        1.1.2 酶联免疫吸附试验主要试剂盒第13-14页
        1.1.3 放射免疫分析法主要试剂盒第14页
        1.1.4 免疫组化主要试剂第14页
        1.1.5 RT-PCR主要试剂第14页
        1.1.6 Western-blot主要试剂第14-15页
        1.1.7 HE染色主要试剂第15页
        1.1.8 Masson染色主要试剂第15-16页
    1.2 主要仪器及设备第16页
2. 实验方法第16-31页
    2.1 DOCA-盐型高血压小鼠模型建立及分组第16-17页
    2.2 鼠尾动脉压测定第17页
    2.3 心脏超声测定第17-18页
    2.4 血流动力学测定第18页
    2.5 心肌样品的制备第18页
    2.6 酶联免疫吸附实验测定第18-22页
        2.6.1 血清中NO测定第18-19页
        2.6.2 组织中cGMP测定第19-21页
        2.6.3 组织中MDA测定第21-22页
        2.6.4 组织中SOD测定第22页
    2.7 高效液相色谱法实验测定第22-23页
    2.8 放免法实验测定第23页
    2.9 RT-PCR实验测定第23-25页
        2.9.1 引物序列第23-24页
        2.9.2 RNA的提取第24页
        2.9.3 合成cDNA第24页
        2.9.4 PCR反应过程第24-25页
    2.10 免疫组化实验测定第25-26页
        2.10.1 取材及固定第25页
        2.10.2 组织脱水第25页
        2.10.3 透明第25页
        2.10.4 脱蜡及复水第25页
        2.10.5 微波修复第25页
        2.10.6 血清封闭第25页
        2.10.7 加一抗第25-26页
        2.10.8 加二抗第26页
        2.10.9 加辣根酶标记链霉卵白素第26页
        2.10.10 显色第26页
        2.10.11 苏木素复染第26页
        2.10.12 再脱水第26页
        2.10.13 树胶封片第26页
    2.11 Western-blot测定第26-29页
        2.11.1 蛋白样品的制备第26-27页
        2.11.2 BCA蛋白浓度测定第27页
        2.11.3 制备加样蛋白第27页
        2.11.4 配胶第27页
        2.11.5 电泳第27页
        2.11.6 转膜第27-28页
        2.11.7 封闭及孵育一抗第28页
        2.11.8 孵育二抗第28页
        2.11.9 ECL显影第28页
        2.11.10 配方第28-29页
    2.12 心肌HE染色第29-30页
        2.12.1 取材及固定第29页
        2.12.2 脱水及透明第29页
        2.12.3 切片第29页
        2.12.4 再透明、脱蜡及脱水第29页
        2.12.5 苏木素染色第29-30页
        2.12.6 伊红染色第30页
        2.12.7 树胶封片第30页
    2.13 心肌Msson染色第30-31页
        2.13.1 取材及固定第30页
        2.13.2 石蜡包埋及制片第30页
        2.13.3 染色及读片第30页
        2.13.4 部分试剂配方第30-31页
    2.14 统计学方法第31页
3. 结果第31-42页
    3.1 小鼠尾动脉压结果第31页
    3.2 各亚组小鼠心脏彩超参数第31-32页
    3.3 各亚组小鼠血流动力学参数第32-33页
    3.4 氧化应激指标及NO含量测定结果第33-34页
    3.5 心肌组织中BH_4、BH_2及BH_4/BH_2测定结果第34页
    3.6 放免法测定血浆中AngⅡ的含量第34页
    3.7 RT-PCR测定α-SA、TGFβ1、PKCε及β-MHC的表达结果第34-36页
        3.7.1 α-SA第34-35页
        3.7.2 TGFβ1第35页
        3.7.3 PKCε第35-36页
        3.7.4 β-MHC第36页
    3.8 免疫组化测定结果第36-40页
        3.8.1 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)第36-37页
        3.8.2 磷酸化的受磷蛋白(phospho-phospholamban, Phospho-PLB)第37页
        3.8.3 Bcl-2相关X蛋白(B cell lymphoma-2 Assaciated X protein, Bax)第37-38页
        3.8.4 受磷蛋白(phospholamban, PLB)第38页
        3-8.5 蛋白激酶C-zeta (Protein kinase Czeta, PKC-zeta)第38-39页
        3.8.6 肌浆/内质网钙ATP酶2 (sarcoplasmic or endoplasmic reticulum caldumATPases2, Serca2)第39页
        3.8.7 B细胞淋巴瘤/白血病-2 (B-celllymphoma-2, BCL-2)第39-40页
    3.9 Western-blot测定结果第40-41页
    3.10 HE染色结果第41页
    3.11 Masson染色结果第41-42页
4. 讨论第42-45页
5. 不足与展望第45页
6. 结论第45-47页
参考文献第47-51页
在学期间研究成果第51-52页
英文缩略词表第52-55页
致谢第55页

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