中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-6页 |
前言 | 第11-13页 |
1. 材料 | 第13-16页 |
1.1 主要试剂 | 第13-16页 |
1.1.1 动物及造模主要试剂 | 第13页 |
1.1.2 酶联免疫吸附试验主要试剂盒 | 第13-14页 |
1.1.3 放射免疫分析法主要试剂盒 | 第14页 |
1.1.4 免疫组化主要试剂 | 第14页 |
1.1.5 RT-PCR主要试剂 | 第14页 |
1.1.6 Western-blot主要试剂 | 第14-15页 |
1.1.7 HE染色主要试剂 | 第15页 |
1.1.8 Masson染色主要试剂 | 第15-16页 |
1.2 主要仪器及设备 | 第16页 |
2. 实验方法 | 第16-31页 |
2.1 DOCA-盐型高血压小鼠模型建立及分组 | 第16-17页 |
2.2 鼠尾动脉压测定 | 第17页 |
2.3 心脏超声测定 | 第17-18页 |
2.4 血流动力学测定 | 第18页 |
2.5 心肌样品的制备 | 第18页 |
2.6 酶联免疫吸附实验测定 | 第18-22页 |
2.6.1 血清中NO测定 | 第18-19页 |
2.6.2 组织中cGMP测定 | 第19-21页 |
2.6.3 组织中MDA测定 | 第21-22页 |
2.6.4 组织中SOD测定 | 第22页 |
2.7 高效液相色谱法实验测定 | 第22-23页 |
2.8 放免法实验测定 | 第23页 |
2.9 RT-PCR实验测定 | 第23-25页 |
2.9.1 引物序列 | 第23-24页 |
2.9.2 RNA的提取 | 第24页 |
2.9.3 合成cDNA | 第24页 |
2.9.4 PCR反应过程 | 第24-25页 |
2.10 免疫组化实验测定 | 第25-26页 |
2.10.1 取材及固定 | 第25页 |
2.10.2 组织脱水 | 第25页 |
2.10.3 透明 | 第25页 |
2.10.4 脱蜡及复水 | 第25页 |
2.10.5 微波修复 | 第25页 |
2.10.6 血清封闭 | 第25页 |
2.10.7 加一抗 | 第25-26页 |
2.10.8 加二抗 | 第26页 |
2.10.9 加辣根酶标记链霉卵白素 | 第26页 |
2.10.10 显色 | 第26页 |
2.10.11 苏木素复染 | 第26页 |
2.10.12 再脱水 | 第26页 |
2.10.13 树胶封片 | 第26页 |
2.11 Western-blot测定 | 第26-29页 |
2.11.1 蛋白样品的制备 | 第26-27页 |
2.11.2 BCA蛋白浓度测定 | 第27页 |
2.11.3 制备加样蛋白 | 第27页 |
2.11.4 配胶 | 第27页 |
2.11.5 电泳 | 第27页 |
2.11.6 转膜 | 第27-28页 |
2.11.7 封闭及孵育一抗 | 第28页 |
2.11.8 孵育二抗 | 第28页 |
2.11.9 ECL显影 | 第28页 |
2.11.10 配方 | 第28-29页 |
2.12 心肌HE染色 | 第29-30页 |
2.12.1 取材及固定 | 第29页 |
2.12.2 脱水及透明 | 第29页 |
2.12.3 切片 | 第29页 |
2.12.4 再透明、脱蜡及脱水 | 第29页 |
2.12.5 苏木素染色 | 第29-30页 |
2.12.6 伊红染色 | 第30页 |
2.12.7 树胶封片 | 第30页 |
2.13 心肌Msson染色 | 第30-31页 |
2.13.1 取材及固定 | 第30页 |
2.13.2 石蜡包埋及制片 | 第30页 |
2.13.3 染色及读片 | 第30页 |
2.13.4 部分试剂配方 | 第30-31页 |
2.14 统计学方法 | 第31页 |
3. 结果 | 第31-42页 |
3.1 小鼠尾动脉压结果 | 第31页 |
3.2 各亚组小鼠心脏彩超参数 | 第31-32页 |
3.3 各亚组小鼠血流动力学参数 | 第32-33页 |
3.4 氧化应激指标及NO含量测定结果 | 第33-34页 |
3.5 心肌组织中BH_4、BH_2及BH_4/BH_2测定结果 | 第34页 |
3.6 放免法测定血浆中AngⅡ的含量 | 第34页 |
3.7 RT-PCR测定α-SA、TGFβ1、PKCε及β-MHC的表达结果 | 第34-36页 |
3.7.1 α-SA | 第34-35页 |
3.7.2 TGFβ1 | 第35页 |
3.7.3 PKCε | 第35-36页 |
3.7.4 β-MHC | 第36页 |
3.8 免疫组化测定结果 | 第36-40页 |
3.8.1 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF) | 第36-37页 |
3.8.2 磷酸化的受磷蛋白(phospho-phospholamban, Phospho-PLB) | 第37页 |
3.8.3 Bcl-2相关X蛋白(B cell lymphoma-2 Assaciated X protein, Bax) | 第37-38页 |
3.8.4 受磷蛋白(phospholamban, PLB) | 第38页 |
3-8.5 蛋白激酶C-zeta (Protein kinase Czeta, PKC-zeta) | 第38-39页 |
3.8.6 肌浆/内质网钙ATP酶2 (sarcoplasmic or endoplasmic reticulum caldumATPases2, Serca2) | 第39页 |
3.8.7 B细胞淋巴瘤/白血病-2 (B-celllymphoma-2, BCL-2) | 第39-40页 |
3.9 Western-blot测定结果 | 第40-41页 |
3.10 HE染色结果 | 第41页 |
3.11 Masson染色结果 | 第41-42页 |
4. 讨论 | 第42-45页 |
5. 不足与展望 | 第45页 |
6. 结论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
在学期间研究成果 | 第51-52页 |
英文缩略词表 | 第52-55页 |
致谢 | 第55页 |