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虾青素合成酶基因bkt和crtZ转化盐生杜氏藻的研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 绪论第10-18页
    1.1 虾青素的简介第10-13页
        1.1.1 虾青素的来源第10页
        1.1.2 虾青素的结构特点第10-11页
        1.1.3 虾青素的生物合成途径第11-12页
        1.1.4 虾青素的抗氧化能力及应用第12-13页
    1.2 杜氏藻的研究现状第13-16页
        1.2.1 杜氏藻简介第13页
        1.2.2 杜氏藻的盐度耐受力第13-14页
        1.2.3 杜氏藻中β-胡萝卜素的生物合成第14页
        1.2.4 类胡萝卜素合成途径的代谢工程第14-16页
    1.3 本研究的创新点第16页
    1.4 本研究的目的及意义第16-17页
    1.5 本研究的技术路线第17-18页
2 氯霉素对杜氏藻的影响及抑菌效果的研究第18-25页
    2.1 实验材料第18-19页
        2.1.1 材料及培养第18页
        2.1.2 试剂与仪器第18-19页
    2.2 实验方法第19页
        2.2.1 杜氏藻的生物量的测定第19页
        2.2.2 杜氏藻的叶绿素光合参数的测定第19页
        2.2.3 氯霉素处理后藻液中的菌量检验第19页
        2.2.4 数据分析第19页
    2.3 结果与分析第19-22页
        2.3.1 杜氏藻的生物量测定第19-20页
        2.3.2 杜氏藻的叶绿素光合参数的测定第20-22页
        2.3.3 氯霉素处理后藻液的菌量检验第22页
    2.4 讨论第22-25页
3 雨生红球藻的bkt和crtZ基因的克隆及重组表达载体的构建第25-42页
    3.1 实验材料第25页
        3.1.1 材料及培养第25页
        3.1.2 试剂与仪器第25页
    3.2 实验方法第25-33页
        3.2.1 bkt和crtZ基因的序列的获得第25-26页
        3.2.2 总RNA提取第26页
        3.2.3 反转录第26-27页
        3.2.4 bkt与crtZ基因的PCR扩增第27-28页
        3.2.5 bkt与crtZ基因PCR产物的纯化及回收第28页
        3.2.6 bkt和crtZ基因的连接,转化及测序第28-30页
        3.2.7 序列分析第30页
        3.2.8 PCR扩增bkt与crtZ基因的ORF第30-31页
        3.2.9 构建重组表达载体第31-32页
        3.2.10 检测重组表达载体第32-33页
    3.3 结果与分析第33-40页
        3.3.1 总RNA的提取第33-34页
        3.3.2 雨生红球藻bkt和crtZ基因的克隆第34页
        3.3.3 序列分析结果第34-38页
        3.3.4 转化载体pEGAD-bktO和pEGAD-crtZO的构建第38-40页
    3.4 讨论第40-42页
4 基因枪法转化杜氏藻第42-51页
    4.1 实验材料第42页
        4.1.1 材料及培养第42页
        4.1.2 试剂与仪器第42页
    4.2 实验方法第42-46页
        4.2.1 基因枪子弹的制备及转化过程第42-44页
        4.2.2 恢复培养第44页
        4.2.3 转化株的筛选第44-45页
        4.2.4 转化株的检测第45-46页
        4.2.5 荧光显微镜观察第46页
    4.3 结果与分析第46-49页
        4.3.1 转化株筛选第46-47页
        4.3.2 转化株的检测第47-49页
        4.3.3 荧光显微镜观察第49页
    4.4 讨论第49-51页
5 转化株的生长情况及虾青素的HPLC分析第51-58页
    5.1 实验材料第51页
        5.1.1 材料及培养第51页
        5.1.2 试剂与仪器第51页
    5.2 实验方法第51-52页
        5.2.1 野生株与转化株生长曲线及光合参数的测定第51-52页
        5.2.2 虾青素的HPLC分析第52页
    5.3 结果与分析第52-56页
        5.3.1 野生株与转化株生长曲线及Fv/Fm的比较第52-54页
        5.3.2 转化株虾青素含量的测定第54-56页
    5.4 讨论第56-58页
结论第58-59页
参考文献第59-65页
附录A D.m培养基配方及pEGAD质粒图谱第65-66页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第66-67页
致谢第67页

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