摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 绪论 | 第10-18页 |
1.1 虾青素的简介 | 第10-13页 |
1.1.1 虾青素的来源 | 第10页 |
1.1.2 虾青素的结构特点 | 第10-11页 |
1.1.3 虾青素的生物合成途径 | 第11-12页 |
1.1.4 虾青素的抗氧化能力及应用 | 第12-13页 |
1.2 杜氏藻的研究现状 | 第13-16页 |
1.2.1 杜氏藻简介 | 第13页 |
1.2.2 杜氏藻的盐度耐受力 | 第13-14页 |
1.2.3 杜氏藻中β-胡萝卜素的生物合成 | 第14页 |
1.2.4 类胡萝卜素合成途径的代谢工程 | 第14-16页 |
1.3 本研究的创新点 | 第16页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
1.5 本研究的技术路线 | 第17-18页 |
2 氯霉素对杜氏藻的影响及抑菌效果的研究 | 第18-25页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 材料及培养 | 第18页 |
2.1.2 试剂与仪器 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19页 |
2.2.1 杜氏藻的生物量的测定 | 第19页 |
2.2.2 杜氏藻的叶绿素光合参数的测定 | 第19页 |
2.2.3 氯霉素处理后藻液中的菌量检验 | 第19页 |
2.2.4 数据分析 | 第19页 |
2.3 结果与分析 | 第19-22页 |
2.3.1 杜氏藻的生物量测定 | 第19-20页 |
2.3.2 杜氏藻的叶绿素光合参数的测定 | 第20-22页 |
2.3.3 氯霉素处理后藻液的菌量检验 | 第22页 |
2.4 讨论 | 第22-25页 |
3 雨生红球藻的bkt和crtZ基因的克隆及重组表达载体的构建 | 第25-42页 |
3.1 实验材料 | 第25页 |
3.1.1 材料及培养 | 第25页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第25页 |
3.2 实验方法 | 第25-33页 |
3.2.1 bkt和crtZ基因的序列的获得 | 第25-26页 |
3.2.2 总RNA提取 | 第26页 |
3.2.3 反转录 | 第26-27页 |
3.2.4 bkt与crtZ基因的PCR扩增 | 第27-28页 |
3.2.5 bkt与crtZ基因PCR产物的纯化及回收 | 第28页 |
3.2.6 bkt和crtZ基因的连接,转化及测序 | 第28-30页 |
3.2.7 序列分析 | 第30页 |
3.2.8 PCR扩增bkt与crtZ基因的ORF | 第30-31页 |
3.2.9 构建重组表达载体 | 第31-32页 |
3.2.10 检测重组表达载体 | 第32-33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-40页 |
3.3.1 总RNA的提取 | 第33-34页 |
3.3.2 雨生红球藻bkt和crtZ基因的克隆 | 第34页 |
3.3.3 序列分析结果 | 第34-38页 |
3.3.4 转化载体pEGAD-bktO和pEGAD-crtZO的构建 | 第38-40页 |
3.4 讨论 | 第40-42页 |
4 基因枪法转化杜氏藻 | 第42-51页 |
4.1 实验材料 | 第42页 |
4.1.1 材料及培养 | 第42页 |
4.1.2 试剂与仪器 | 第42页 |
4.2 实验方法 | 第42-46页 |
4.2.1 基因枪子弹的制备及转化过程 | 第42-44页 |
4.2.2 恢复培养 | 第44页 |
4.2.3 转化株的筛选 | 第44-45页 |
4.2.4 转化株的检测 | 第45-46页 |
4.2.5 荧光显微镜观察 | 第46页 |
4.3 结果与分析 | 第46-49页 |
4.3.1 转化株筛选 | 第46-47页 |
4.3.2 转化株的检测 | 第47-49页 |
4.3.3 荧光显微镜观察 | 第49页 |
4.4 讨论 | 第49-51页 |
5 转化株的生长情况及虾青素的HPLC分析 | 第51-58页 |
5.1 实验材料 | 第51页 |
5.1.1 材料及培养 | 第51页 |
5.1.2 试剂与仪器 | 第51页 |
5.2 实验方法 | 第51-52页 |
5.2.1 野生株与转化株生长曲线及光合参数的测定 | 第51-52页 |
5.2.2 虾青素的HPLC分析 | 第52页 |
5.3 结果与分析 | 第52-56页 |
5.3.1 野生株与转化株生长曲线及Fv/Fm的比较 | 第52-54页 |
5.3.2 转化株虾青素含量的测定 | 第54-56页 |
5.4 讨论 | 第56-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录A D.m培养基配方及pEGAD质粒图谱 | 第65-66页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |