摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
主要符号对照表 | 第8-9页 |
第1章 引言 | 第9-16页 |
1.1 滤泡辅助型T细胞的分化和功能 | 第9-11页 |
1.2 孤儿受体Nr4a家族 | 第11-12页 |
1.3 孤儿受体Nr4a家族在免疫系统中的功能 | 第12-13页 |
1.4 本论文的目的和意义 | 第13-14页 |
1.5 本论文的主要研究內容 | 第14-16页 |
第2章 Nr4a受体在Tfh细胞的表达分析 | 第16-28页 |
2.1 本章引论 | 第16页 |
2.2 实验材料与方法 | 第16-24页 |
2.2.1 主要试剂 | 第16-17页 |
2.2.2 主要仪器 | 第17页 |
2.2.3 主要试剂的配置 | 第17-18页 |
2.2.4 主要实验动物 | 第18页 |
2.2.5 实验方法 | 第18-24页 |
2.2.5.1 原代淋巴细胞的制备 | 第18-19页 |
2.2.5.2 原代T淋巴细胞的磁珠分离 | 第19页 |
2.2.5.3 淋巴细胞的过继转移和小鼠免疫 | 第19-20页 |
2.2.5.4 淋巴细胞的免疫荧光标记与流式分选 | 第20-21页 |
2.2.5.5 T淋巴细胞体外活化培养和收集 | 第21页 |
2.2.5.6 m RNA的提取与RT-PCR | 第21-23页 |
2.2.5.7 实时荧光定量PCR | 第23-24页 |
2.3 实验结果 | 第24-26页 |
2.3.1 Nr4a家族分子在Tfh细胞亚群的表达情况 | 第24-25页 |
2.3.2 Nr4a家族分子T细胞活化过程中的表达情况 | 第25-26页 |
2.4 讨论 | 第26-28页 |
第3章 Nr4a家族分子T细胞活化过程中的表达情况 | 第28-44页 |
3.1 本章引论 | 第28-29页 |
3.2 实验材料与方法 | 第29-37页 |
3.2.1 主要试剂 | 第29-31页 |
3.2.2 主要仪器 | 第31页 |
3.2.3 主要试剂的配置 | 第31-33页 |
3.2.4 主要实验动物 | 第33页 |
3.2.5 实验方法 | 第33-37页 |
3.2.5.1 基因克隆及表达载体构建 | 第33-35页 |
3.2.5.2 反转录病毒的制备 | 第35-36页 |
3.2.5.3 初始淋巴细胞的磁珠分选,培养与感染 | 第36页 |
3.2.5.4 感染的T细胞的流式分选 | 第36-37页 |
3.2.5.5 淋巴细胞的过继转移 | 第37页 |
3.2.5.6 淋巴细胞免疫荧光标记与流式分析 | 第37页 |
3.3 结果 | 第37-42页 |
3.3.1 Nr4a过表达系统的建立 | 第37-38页 |
3.3.2 体内检测Nr4a过表达T细胞分化成为Tfh细胞的能力 | 第38-40页 |
3.3.3 Nr4a过表达对Tfh细胞辅助GC反应的能力的影响 | 第40-42页 |
3.4 讨论 | 第42-44页 |
第4章 Nr4a基因缺陷T细胞的Tfh分化和功能 | 第44-54页 |
4.1 本章引论 | 第44-45页 |
4.2 实验材料与方法 | 第45-50页 |
4.2.1 主要试剂 | 第45-46页 |
4.2.2 主要仪器 | 第46页 |
4.2.3 主要试剂的配置 | 第46页 |
4.2.4 主要实验动物 | 第46-47页 |
4.2.5 实验方法 | 第47-50页 |
4.2.5.1 小鼠基因组DNA的制备与基因型鉴定 | 第47-48页 |
4.2.5.2 初始淋巴细胞的磁珠分离 | 第48页 |
4.2.5.3 T淋巴细胞运动的体外培养和感染标记 | 第48-49页 |
4.2.5.4 感染的T细胞的流式分选 | 第49页 |
4.2.5.5 骨髓嵌合体小鼠模型建立 | 第49-50页 |
4.3 实验结果 | 第50-53页 |
4.3.1 T细胞特异性Nr4a全敲除小鼠表型和配种 | 第50-51页 |
4.3.2 Nr4a-TKOOT-2 骨髓嵌合体小鼠模型建立 | 第51-52页 |
4.3.3 Nr4a缺陷对Tfh细胞分化和辅助功能影响的分析 | 第52-53页 |
4.4 讨论 | 第53-54页 |
第5章总结和展望 | 第54-56页 |
5.1 工作总结 | 第54页 |
5.2 工作展望 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-65页 |
附录 | 第65-67页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第67页 |