| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1.1 斑节对虾简介 | 第11页 |
| 1.1.2 甲壳动物蜕壳及其调控的研究 | 第11-14页 |
| 1.1.2.1 发育蜕皮 | 第12页 |
| 1.1.2.2 生长蜕壳 | 第12页 |
| 1.1.2.3 生殖蜕壳 | 第12页 |
| 1.1.2.4 再生蜕壳 | 第12-14页 |
| 1.1.3 影响甲壳动物蜕壳的环境因素 | 第14页 |
| 1.1.4 甲壳动物蜕壳的调控 | 第14-16页 |
| 1.1.5 几丁质和几丁质酶简介 | 第16-20页 |
| 1.1.5.1 几丁质的结构特征 | 第16页 |
| 1.1.5.2 几丁质在节肢动物中的分布特征 | 第16-17页 |
| 1.1.5.3 几丁质的降解 | 第17页 |
| 1.1.5.4 几丁质酶及其分类 | 第17页 |
| 1.1.5.5 几丁质酶基因的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.1.5.6 几丁质酶基因编码的氨基酸序列结构特征 | 第18-20页 |
| 1.2 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 三种几丁质酶基因的克隆与分析 | 第21-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第21页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.3.1 实验中所购买试剂一览： | 第22页 |
| 2.1.3.2 实验中自配试剂一览： | 第22-23页 |
| 2.1.3.3 实验中感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-35页 |
| 2.2.1 实验器材处理 | 第24页 |
| 2.2.2 总RNA提取和cDNA的合成 | 第24-26页 |
| 2.2.3 斑节对虾cDNA的合成 | 第26-27页 |
| 2.2.4 基因cDNA全长的克隆 | 第27-35页 |
| 2.2.4.1 引物的设计 | 第27-29页 |
| 2.2.4.2 片段验证 | 第29-30页 |
| 2.2.4.3 RACE获取基因全长 | 第30-33页 |
| 2.2.4.4 琼脂糖凝胶回收纯化 | 第33-34页 |
| 2.2.4.5 胶回收产物与载体连接 | 第34页 |
| 2.2.4.6 重组质粒转化 | 第34页 |
| 2.2.4.7 重组质粒的菌液PCR鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.5 序列分析与系统进化树的构建 | 第35页 |
| 2.3 实验结果 | 第35-47页 |
| 2.3.1 PmChi-2、PmChi-4、PmChi-5 基因的鉴定与特征分析 | 第35-38页 |
| 2.3.2 PmChi-2、PmChi-4、PmChi-5 氨基酸结构分析 | 第38-39页 |
| 2.3.3 PmChi-2、PmChi-4、PmChi-5 多重序列比对分析 | 第39-44页 |
| 2.3.4 PmChi-2、PmChi-4、PmChi-5 系统发育分析 | 第44-47页 |
| 2.4 讨论 | 第47-48页 |
| 第三章 三种几丁质酶基因的组织表达分析 | 第48-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第48页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第48页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-51页 |
| 3.2.1 实时荧光定量PCR模板的制备 | 第48-50页 |
| 3.2.2 实时荧光定量PCR | 第50-51页 |
| 3.3 实验结果 | 第51-54页 |
| 3.3.1 PmChi-2 基因的组织表达 | 第51-52页 |
| 3.3.2 PmChi-4 基因的组织表达 | 第52-53页 |
| 3.3.3 PmChi-5 基因的组织表达 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 三种几丁质酶基因在蜕皮周期中的表达分析 | 第56-62页 |
| 4.1 实验材料 | 第56页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第56页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-57页 |
| 4.2.1 实时荧光定量PCR模板的制备 | 第57页 |
| 4.2.2 实时荧光定量PCR | 第57页 |
| 4.3 实验结果 | 第57-60页 |
| 4.3.1 PmChi-2 基因在蜕皮周期中的表达分析 | 第57-58页 |
| 4.3.2 PmChi-4 基因在蜕皮周期中的表达分析 | 第58-59页 |
| 4.3.3 PmChi-5 基因在蜕皮周期中的表达分析 | 第59-60页 |
| 4.4 讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 三种几丁质酶基因在幼体发育阶段的表达分析 | 第62-67页 |
| 5.1 实验材料 | 第62页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第62页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第62页 |
| 5.2 实验方法 | 第62页 |
| 5.2.1 实时荧光定量PCR模板的制备 | 第62页 |
| 5.2.2 实时荧光定量PCR | 第62页 |
| 5.3 实验结果 | 第62-65页 |
| 5.3.1 PmChi-2 在幼体不同发育阶段的表达 | 第62-63页 |
| 5.3.2 PmChi-4 在幼体不同发育阶段的表达 | 第63-64页 |
| 5.3.3 PmChi-5 在幼体不同发育阶段的表达 | 第64-65页 |
| 5.4 讨论 | 第65-67页 |
| 第六章 二种几丁质酶基因在细菌胁迫后的表达分析 | 第67-70页 |
| 6.1 实验材料 | 第67页 |
| 6.1.1 实验动物 | 第67页 |
| 6.1.2 实验仪器 | 第67页 |
| 6.2 实验方法 | 第67页 |
| 6.2.1 实时荧光定量PCR模板的制备 | 第67页 |
| 6.2.2 实时荧光定量PCR | 第67页 |
| 6.3 实验结果 | 第67-69页 |
| 6.3.1 PmChi-4 在菌注射后的表达 | 第67-68页 |
| 6.3.2 PmChi-5 在菌注射后的表达 | 第68-69页 |
| 6.4 讨论 | 第69-70页 |
| 第七章 二种几丁质酶基因在氨氮胁迫后的表达分析 | 第70-74页 |
| 7.1 实验材料 | 第70页 |
| 7.1.1 实验动物 | 第70页 |
| 7.1.2 实验仪器 | 第70页 |
| 7.2 实验方法 | 第70-71页 |
| 7.2.1 实时荧光定量PCR模板的制备 | 第70页 |
| 7.2.2 实时荧光定量PCR | 第70-71页 |
| 7.3 实验结果 | 第71-73页 |
| 7.3.1 PmChi-4 在氨氮应激后的表达 | 第71-72页 |
| 7.3.2 PmChi-5 在氨氮应激后的表达 | 第72-73页 |
| 7.4 讨论 | 第73-74页 |
| 小结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 攻读学位期间发表的论文及参加的会议 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
