中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
缩略语/符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-14页 |
研究现状、成果 | 第12-13页 |
研究目的、方法 | 第13-14页 |
一 材料和方法 | 第14-30页 |
(一) 实验动物 | 第14页 |
(二) 实验器材 | 第14-15页 |
(三) 主要实验试剂 | 第15页 |
(四) 实验步骤 | 第15-30页 |
1. 小鼠骨髓来源DC体外培养 | 第15-16页 |
2. 流式细胞仪检测DC表型抗原 | 第16页 |
3. 腺病毒转染DC | 第16-17页 |
(1) 流式细胞仪检测转染效率 | 第16-17页 |
(2) 台盼蓝检测活细胞 | 第17页 |
4. Western Blot检测转染后IDO表达 | 第17-21页 |
5. Ehrlich法检测转染后IDO活性 | 第21-22页 |
6. MACS免疫磁珠获取CD4~+T淋巴细胞 | 第22-23页 |
7. MTS法检测T细胞增殖活性 | 第23-24页 |
8. FCM检测CD4~+T细胞凋亡 | 第24页 |
9. FCM检测DC-T细胞培养中Treg群比例 | 第24页 |
10. ELISA检测混合体系中细胞因子 | 第24-25页 |
11. 同种异系小鼠小肠移植 | 第25-27页 |
12. 小肠HE染色 | 第27-29页 |
13. FCM检测脾脏Treg亚群比例 | 第29页 |
14. ELISA检测血清中炎症因子变化 | 第29-30页 |
15. 实验数据处理方法 | 第30页 |
二 结果 | 第30-39页 |
(一) 小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)的培养及鉴定 | 第30-31页 |
(二) 转染DC | 第31-33页 |
1. 荧光倒置显微镜评估转染 | 第31页 |
2. 流式细胞仪检测转染效率 | 第31-32页 |
3. 最佳MOI的确定 | 第32页 |
4. Western Blot检测转染DC的IDO蛋白 | 第32-33页 |
5. Ehrlich法检测IDO活性 | 第33页 |
(三) IDO及3-HAA抑制T细胞功能 | 第33-36页 |
1. MACS分离脾脏CD4~+T淋巴细胞的鉴定 | 第33页 |
2. IDO+DC及3-HAA抑制的T细胞增殖情况 | 第33-34页 |
3. IDO+DC及3-HAA诱导T细胞凋亡 | 第34页 |
4. IDO+DC和3-HAA诱导体外Treg | 第34-36页 |
5. 混合细胞培养液上清细胞因子 | 第36页 |
(四) IDO及3-HAA抑制小鼠小肠移植排斥反应 | 第36-39页 |
1. IDO及3-HAA延长小肠移植受体小鼠存活时间 | 第36-37页 |
2. 小鼠异位小肠移植术后移植物组织病理学检查 | 第37-38页 |
3. IDO和3-HAA在体内诱导Treg | 第38页 |
4. 小鼠血液炎症因子变化 | 第38-39页 |
三 讨论 | 第39-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-47页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第47-48页 |
综述 吲哚乙胺2,3双加氧酶(IDO)、B7共刺激信号分子与免疫耐受 | 第48-68页 |
引言 | 第48页 |
1 吲哚胺2,3双加氧酶(IDO) | 第48-56页 |
1.1 IDO免疫抑制效应的作用机制 | 第50-54页 |
1.1.1 IDO通过代谢方式参与免疫调节 | 第50-51页 |
1.1.2 IDO作为信号分子参与免疫调节 | 第51页 |
1.1.3 IDO与DC | 第51-53页 |
1.1.4 IDO与T细胞和Tregs | 第53-54页 |
1.2 IDO与器官移植 | 第54-56页 |
1.2.1 IDO对移植物的保护作用 | 第54-55页 |
1.2.2 IDO在器官移植中的作用 | 第55-56页 |
2 RNAi技术干扰DC表达B7表达与免疫耐受 | 第56-59页 |
2.1 RNAi技术 | 第56页 |
2.2 B7信号通路 | 第56-58页 |
2.3 siRNA干扰CD28:CD80/CD86通路 | 第58-59页 |
讨论 | 第59-60页 |
综述参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68页 |