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高表达IDO的树突细胞及色氨酸代谢产物3-HAA抑制小鼠小肠移植急性排斥反应的研究

中文摘要第4-5页
Abstract第5页
缩略语/符号说明第10-12页
前言第12-14页
    研究现状、成果第12-13页
    研究目的、方法第13-14页
一 材料和方法第14-30页
    (一) 实验动物第14页
    (二) 实验器材第14-15页
    (三) 主要实验试剂第15页
    (四) 实验步骤第15-30页
        1. 小鼠骨髓来源DC体外培养第15-16页
        2. 流式细胞仪检测DC表型抗原第16页
        3. 腺病毒转染DC第16-17页
            (1) 流式细胞仪检测转染效率第16-17页
            (2) 台盼蓝检测活细胞第17页
        4. Western Blot检测转染后IDO表达第17-21页
        5. Ehrlich法检测转染后IDO活性第21-22页
        6. MACS免疫磁珠获取CD4~+T淋巴细胞第22-23页
        7. MTS法检测T细胞增殖活性第23-24页
        8. FCM检测CD4~+T细胞凋亡第24页
        9. FCM检测DC-T细胞培养中Treg群比例第24页
        10. ELISA检测混合体系中细胞因子第24-25页
        11. 同种异系小鼠小肠移植第25-27页
        12. 小肠HE染色第27-29页
        13. FCM检测脾脏Treg亚群比例第29页
        14. ELISA检测血清中炎症因子变化第29-30页
        15. 实验数据处理方法第30页
二 结果第30-39页
    (一) 小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)的培养及鉴定第30-31页
    (二) 转染DC第31-33页
        1. 荧光倒置显微镜评估转染第31页
        2. 流式细胞仪检测转染效率第31-32页
        3. 最佳MOI的确定第32页
        4. Western Blot检测转染DC的IDO蛋白第32-33页
        5. Ehrlich法检测IDO活性第33页
    (三) IDO及3-HAA抑制T细胞功能第33-36页
        1. MACS分离脾脏CD4~+T淋巴细胞的鉴定第33页
        2. IDO+DC及3-HAA抑制的T细胞增殖情况第33-34页
        3. IDO+DC及3-HAA诱导T细胞凋亡第34页
        4. IDO+DC和3-HAA诱导体外Treg第34-36页
        5. 混合细胞培养液上清细胞因子第36页
    (四) IDO及3-HAA抑制小鼠小肠移植排斥反应第36-39页
        1. IDO及3-HAA延长小肠移植受体小鼠存活时间第36-37页
        2. 小鼠异位小肠移植术后移植物组织病理学检查第37-38页
        3. IDO和3-HAA在体内诱导Treg第38页
        4. 小鼠血液炎症因子变化第38-39页
三 讨论第39-44页
结论第44-45页
参考文献第45-47页
发表论文和参加科研情况说明第47-48页
综述 吲哚乙胺2,3双加氧酶(IDO)、B7共刺激信号分子与免疫耐受第48-68页
    引言第48页
    1 吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)第48-56页
        1.1 IDO免疫抑制效应的作用机制第50-54页
            1.1.1 IDO通过代谢方式参与免疫调节第50-51页
            1.1.2 IDO作为信号分子参与免疫调节第51页
            1.1.3 IDO与DC第51-53页
            1.1.4 IDO与T细胞和Tregs第53-54页
        1.2 IDO与器官移植第54-56页
            1.2.1 IDO对移植物的保护作用第54-55页
            1.2.2 IDO在器官移植中的作用第55-56页
    2 RNAi技术干扰DC表达B7表达与免疫耐受第56-59页
        2.1 RNAi技术第56页
        2.2 B7信号通路第56-58页
        2.3 siRNA干扰CD28:CD80/CD86通路第58-59页
    讨论第59-60页
    综述参考文献第60-68页
致谢第68页

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