| 摘要 | 第4-5页 |
| Summary | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-10页 |
| Ⅰ引言 | 第10-11页 |
| Ⅱ 文献综述 | 第11-28页 |
| 1 马铃薯生产及研究概况 | 第11-12页 |
| 2 马铃薯SGAs的研究现状 | 第12-15页 |
| 2.1 SGAs的结构 | 第12-13页 |
| 2.2 SGAs的含量以及分布的结构 | 第13-14页 |
| 2.3 SGAs的生物学效应 | 第14-15页 |
| 3 糖苷生物碱在环境中的分解途径 | 第15-16页 |
| 3.1 降解 | 第15页 |
| 3.2 植物酶的分解 | 第15-16页 |
| 3.3 微生物的分解和代谢物的形成 | 第16页 |
| 3.4 SGAs在土壤中的降解 | 第16页 |
| 4 GAs合成代谢途径 | 第16-19页 |
| 5 糖基转移酶家族 | 第19-21页 |
| 5.1 糖基转移酶家族的分类及特点 | 第20页 |
| 5.2 糖基转移酶的功能 | 第20-21页 |
| 6 启动子的研究 | 第21-28页 |
| 6.1 组成型启动子 | 第21-22页 |
| 6.3 诱导型启动子 | 第22-25页 |
| 6.4 组织特异性启动子 | 第25-28页 |
| Ⅲ 研究的目的意义 | 第28-29页 |
| Ⅳ 研究技术路线 | 第29-30页 |
| Ⅴ 材料与方法 | 第30-46页 |
| 1 实验材料 | 第30-31页 |
| 1.1 植物材料 | 第30页 |
| 1.2 菌种和质粒 | 第30页 |
| 1.3 工具酶和试剂 | 第30页 |
| 1.4 主要实验仪器与设备 | 第30-31页 |
| 1.5 培养基 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-33页 |
| 2.1 大肠杆菌感受态的制备(采用CaCl2法) | 第31-32页 |
| 2.2 PCR产物回收方法 | 第32页 |
| 2.3 连接和转化 | 第32页 |
| 2.4 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第32-33页 |
| 2.5 大肠杆菌质粒的提取 | 第33页 |
| 3 基因克隆 | 第33-37页 |
| 3.1 SGT3的生物信息学分析 | 第33-34页 |
| 3.2 PCR引物的合成与设计 | 第34-35页 |
| 3.3 目的基因克隆 | 第35-37页 |
| 4 构建表达载体pCERS3 | 第37-41页 |
| 4.1 rbcS启动子插入载体pCEPSPS | 第37页 |
| 4.2 sgt3基因插入载体pCEr | 第37-38页 |
| 4.3 nos终止子插入载体pCEr-sgt3 | 第38-41页 |
| 5 表达载体pCERS3转化农杆菌 | 第41-42页 |
| 5.1 农杆菌感受态的制备 | 第41页 |
| 5.2 冻融法转化农杆菌 | 第41页 |
| 5.3 农杆菌质粒的提取 | 第41-42页 |
| 5.4 转化农杆菌的鉴定 | 第42页 |
| 6 遗传转化 | 第42-43页 |
| 6.1 农杆菌介导的马铃薯遗传转化及鉴定 | 第42-43页 |
| 6.2 马铃薯转基因再生植株的DNA小量提取与PCR初步检测 | 第43页 |
| 7 目的基因的表达分析 | 第43-44页 |
| 7.1 RNA的提取 | 第44页 |
| 7.2 实验样本及表达量计算方法 | 第44页 |
| 8 糖苷生物碱标准曲线的绘制及含量测定 | 第44-46页 |
| 8.1 糖苷生物碱标准曲线的绘制 | 第44-45页 |
| 8.2 马铃薯糖苷生物碱的提取 | 第45页 |
| 8.3 马铃薯糖苷生物碱含量的测定 | 第45-46页 |
| Ⅵ 结果与分析 | 第46-61页 |
| 3 sgt3基因的克隆与鉴定 | 第46-54页 |
| 3.1 sgt3基因的生物信息学分析 | 第46-47页 |
| 3.2 sgt3基因的亚克隆 | 第47-51页 |
| 3.3 rbcS启动子的克隆 | 第51-53页 |
| 3.4 nos-ter的亚克隆 | 第53-54页 |
| 4 植物表达载体pCERS3的构建及检测 | 第54-56页 |
| 4.1 pCEr载体的构建 | 第54页 |
| 4.2 pCEr-sgt3载体的构建 | 第54页 |
| 4.3 pCERS3载体的构建 | 第54-55页 |
| 4.4 pCERS3载体的检测 | 第55-56页 |
| 5 遗传转化 | 第56-61页 |
| 5.1 转化再生苗的获得及检测 | 第56-58页 |
| 5.2 转基因植株中sgt3基因的表达水平 | 第58-59页 |
| 5.3 糖苷生物碱含量分析 | 第59-61页 |
| Ⅶ 讨论 | 第61-63页 |
| Ⅶ 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 导师简介 | 第74-76页 |
| 作者简介 | 第76-77页 |